Ⅰ. 서1) 론
당뇨병 (Diabetes mellitus)이란 인슐린의 절 대적 또는 상대적 결핍 및 조직에서의 인슐린 작용성 저하 (인슐린 저항성)에 기인한 고혈당
•교신저자 : 김이화, 충북 제천시 신월동 산21-1 세명대학교 한의과대학 경혈학교실, Tel. 043-649-1348, Fax. 043-649-1348, E-mail : [email protected]
｢본 연구는 한국과학재단 목적기초연구 (2001-2-20600-001-2) 지원으로 수행되었음.｣
및 이에 수반되는 대사장애를 특징으로 하는 질환군으로, 치료의 목표는 혈당의 효과적인 조절을 통하여 합병증의 발생을 예방하거나 지 연시키는 것이다1).
한의학에서는 당뇨병을 소갈 (消渴)의 범주 에서 찾아볼 수 있는데, 消란 燒로서 태운다는 뜻이고 渴은 입이 마른다는 표현이므로 ‘消穀 善飢, 渴而多飮’하는 병증을 의미한다. 소갈이 오래되면 대부분 전변증이 나타나는데, 당뇨병 성 만성합병증과 유사한 이들 소갈전병증을 한
鍼이 Streptozotocin으로 유발된 糖尿病 흰쥐 대뇌피질에서의 Nitric Oxide Synthase 발현에 미치는 영향
이기영1․이은용1․장미현2․김연정2․정주호3․서정철4․김창주2․김이화1
세명대학교 한의과대학 침구경혈학교실1, 경희대학교 의과대학 생리학교실2, 경희대학교 의과대학 약리학교실3, 동의대학교 한의과대학 침구학교실4
Effects of Acupuncture on NADPH-d-positive Neurons in Cerebrocortex of Streptozotocin-induced Diabetic Rats
Ki-Young Lee1․Eun-Yong Lee1․Mi-Hyun Jang2․Youn-Jung Kim2․Joo-Ho Chung3․ Jung-Chul Seo4․Chang-Ju Kim2․Ee-Hwa Kim1
Dept. of AM-Meridian & Pointology, College of Oriental Medicine, Se-Myung University1, Dept. of Physiology, College of Medicine, Kyung-Hee University2,
Dept. of Pharmacology, College of Medicine, Kyung-Hee University3,
Dept. of Acupuncture & Moxibustion, College of Oriental Medicine, Dong-Eui University4
Abstract
It has known that acupuncture exerts various effects, such as analgesia, promotion of homeostasis, improvements in brain circulation, and rectification of internal disorders in Oriental medicine. Of particular, acupuncture at the Zusanli acupoint (ST36) has been widely used to relieve symptoms of diabetes mellitus. The effect of acupuncture at Zusanli on nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-diaphorase (NADPH-d)-positive neurons in streptozotocin (STZ)-induced diabetic rats was investigated via immunohistochemistry. Decreased NADPH-d-positive neurons was detected in cerebrocortex of STZ-induced diabetic rats. Needling on the Zusanli in diabetic rats resulted in increase of NADPH-d-positive neurons in cerebrocortex. The present study indicate that acupuncture may affect NADPH-d-positive neurons in cerebrocortex of STZ-induced diabetic rats.
Key Words : Acupuncture, NOS, NADPH-d-diaphorase, Cerebrocortex, Streptozotocin, Diabetes mellitus J . K or. A M – M erid ia n & P oin tolog y S oc.
의학에서는 ‘心痛’, ‘偏枯’, ‘四肢偏廢’, ‘四肢痿 弱’, ‘手足麻木’, ‘浮腫’, ‘尿濁’, ‘失明’, ‘腫滿’, ‘泄 瀉’, ‘便秘’, ‘陰痿’, ‘頻尿’, ‘癰疽’, ‘牙痛齒落’등의 병증으로 설명하고 있다2).
산화질소 (nitric oxide, NO)는 신경계통 조 직에서 신경전달물질, 신경조절물질 또는 이차 전령물질 (second messenger)로 작용하는 것 으로 알려진 자유래디칼 (free radical)이다. 과 거에는 endothelium-derived relaxing factor (EDRF)로 알려졌지만 현재는 기체임이 확인되 었다. NO는 중추신경계통, 말초신경계통, 심장 혈관계통에서 작용을 나타냄이 보고되어왔다.
NO의 형성은 흥분성 아미노산 수용체에 대한 자극과 관련이 있으며 일단 산화질소가 생성되 면 수용성 guanylate cyclase가 자극된다. 산화 질소는 산화질소합성효소 (nitric oxide synth- ase, NOS)에 의하여 arginine으로부터 합성되 며 이때 NADH와 tetrahydrobiopterin이 조효 소 (coenzyme)로 작용하는 것으로 알려져 있다
3).
Streptozotocin (STZ)을 주입하여 인위적으 로 유발시킨 당뇨병 흰쥐의 병리기전은 인체에 서 인슐린 의존성 당뇨병의 기전과 비슷하다.
당뇨병에 의한 NOS의 작용기전은 생체내 여 러조직에서 다양하게 나타난다. 분리된 Lan- gerhans islet와 total pancreas homogenate 에서는 정상군에 비해서 NOS의 활성도가 떨 어지는 것으로 알려져 있으며, 고혈압의 STZ 당뇨병 흰쥐에서는 NOS의 길항제인 L-argi- nine과 L-LAME을 처치했을 때 손상된 NOS system이 관찰되었다. NOS에 의해서 결합되 는 NO의 역할은 감염이나 염증과 관련성이 있 는 것으로 알려져 있다4).
최근 한의학계에서 NOS와 관련된 연구가 시도되고 있으나, 침이 당뇨병이 유발된 흰쥐 의 대뇌피질에서 NOS의 활성도에 미치는 영 향에 대한 보고는 없었다. 본 연구진들은 최근 에 이침이 절식시킨 흰쥐의 대뇌피질에서 NO 의 발현을 관찰하여 유의한 효과에 대해서 보 고하였다. 이에 본 연구에서는 침자극이 당뇨 병의 합병증 기전에 있어 중추적 조절과 관련
된 물질인 NO의 발현변화에 미치는 영향을 관 찰하고자 인위적으로 STZ을 주입하여 당뇨병 을 유발시킨 Sprague Dawley(SD)계 흰쥐에게 인체에 상응하는 족삼리에 침자극을 가한 후 NO의 합성효소인 NOS의 變化를 nicotina- mide-adenine-dinucleotide-phosphate diaphorase (NADPH-d) 조직화학 방법으로 관 찰한 결과 약간의 지견을 얻었기에 보고하는 바이다.
Ⅱ. 실 험
1. 실험동물 및 재료 1) 실험동물
실험에 사용한 동물은 체중 200g 내외의 SD 계 수컷 흰쥐를 한국화학연구소에서 공급받아 실험 당일까지 물과 일반 고형사료를 충분히 공급하면서, 실온 22±2℃를 유지하여 2주간 실험실 환경에 적응시킨 후 사용하였다.
2) 재료
침은 길이 40㎜, 직경 0.25㎜의 stainless steel(정화침구사, 한국) 1回用 침을 사용하였 다.
2. 실험방법 1) 실험군 설정
․정상군(Normal): SD계 흰쥐 6마리를 1군으 로 정상적으로 물과 사료를 공급한 군.
․대조군(Control): SD계 흰쥐 6마리를 1군으 로 streptozotocin(50mg/kg)을 투여한 군.
․실험군 A(Sample A): 정상군에 족삼리 자침 을 시행한 군.
․실험군 B(Sample B): 대조군에 족삼리 자침 을 시행한 군.
2) 당뇨병 유발
흰쥐에 streptozotocin (Sigma, USA)을 45
mg/kg의 용량으로 normal saline에 용해시킨 후 곧바로 복강내로 주입한다. 실험동물을 미 정맥에서 혈액을 채취하여 YSI glucose analyser를 이용하여 혈당을 측정하고 혈당수 치가 300mg/dl 이상되는 실험동물만 선별하여 실험한다.
3) 침자극
침자극은 인체의 족삼리에 상응하는 부위에 1일 1회 20분씩 5일간 자침하였다.
4) 조직처리
모든 실험동물에게 pentobarbital sodium (60㎎/㎏)을 복강주사하여 마취시킨 후 흉강을 열고 좌심실을 통하여 0.05M 인산염완충식염 수(phosphate buffered saline, PBS)를 1분간 주입하고, 0.1M 인산염완충액(phosphate bu- ffer, PB)에 녹인 4% paraformaldehyde 용액 (4℃)을 10분간 관류고정시켰다. 이때 관류속 도는 50∼60㎖/min이 되도록 하였다. 관류고 정 후 뇌를 적출하여 4∼6㎜ 두께로 관상 절개 하여 동일한 고정액에 담가서 4℃에서 16∼18 시간 동안 후고정한 다음, 0.1M PBS에 녹인 20% sucrose 용액에서 2∼5일간 보관하였다.
Cryocut(Leica, Germany)을 이용하여 40㎛
두께의 연속횡단절편을 제작하였고, 자른 조직 은 매 5장마다 1장씩을 취하여 염색을 시행하 였다.
5) NADPH-d 조직화학
NADPH-d 조직화학을 위하여 조직절편을 0.1% β-NADPH, 0.01% nitroblue tetrazo- lium, 0.3% Triton X-100을 0.1M PB에 녹인 반응혼합액에 넣어 37℃ 수조에서 60∼90분간 반응시켜 원하는 정도의 반응이 나타나면 조직 을 PBS로 씻어서 더 이상의 발색을 정지시켰 다. 발색이 끝난 조직은 gelatin- coated slide 에 얹어서 2시간 동안 실온에서 건조시킨 후 xylene으로 투명화시켜 histomount로 봉입하 였다.
6) 조직관찰 및 영상분석
대뇌피질에 분포하는 NADPH-d 신경세포는 광학현미경을 통해 염색된 세포의 수를 영상분 석기로 측정하였다. 각 부위 세부구조의 위치 와 명칭은 Paxinos와 Watson의 부도5)를 참고 하였는데 본 실험은 대뇌피질의 영역 中 resto- plenial granular/agranular cerebral cortex (RSG/A), frontal cortex area 1/2(FR1/2), hin- dlimb area of cortex(HL), parietal cortex area 1(PAR1), parietal cortex area 2(PAR2) 및 perirhinal cortex(PRH)의 여섯 영역을 관 찰하였다.
7) 통계처리
실험결과는 SPSS Window program(Ver.
7.5)을 이용하였으며, 모든 측정값은 평균값±
표준오차(Mean±standard error)로 나타내었 고, 유의성은 p＜0.05로 하였다. 각 실험군간의 통계학적 분석은 ANOVA와 Duncan test 검정
6)을 실시하였다.
Ⅲ. 실험성적
1. RSG와 RSA 영역에서의 NADPH-d 변화 대뇌피질의 RSG/RSA의 NADPH-d 변화를 분석하여 본 결과, 정상군의 OD값은 1.61 ± 0.24, 대조군은 1.54 ± 0.24, 실험군 A는 1.00
± 0.27, 실험군 B는 2.13 ± 0.26이었다. 정상군 과 대조군은 통계학적으로 유의한 차가 인정되 지 않았다. 실험군 B는 실험군 A에 비해 유의 한 증가를 나타냈다(Table Ⅰ).
2. FR1 및 FR2 영역에서의 NADPH-d 변화 대뇌피질의 FR1/FR2의 NADPH-d 변화를 분석하여 본 결과, 정상군의 OD값은 2.44 ± 0.27, 대조군은 2.08 ± 0.26, 실험군 A는 2.13 ± 0.35, 실험군 B는 2.31 ± 0.35이었다. 정상군, 대조군, 실험군 A 및 실험군 B 모두 통계학적으 로 유의한 차가 인정되지 않았다 (Table Ⅱ).
Table Ⅰ. The number of NADPH-d-positive neurons in the RSG/RSA of rats.
Group Number
of slices Average D u n c a n Grouping Normal 18 1.61 ± 0.241) AB2) Control 13 1.54 ± 0.24 AB Sample A 8 1.00 ± 0.27 A Sample B 16 2.13 ± 0.26 B 1) Data are mean ± SEM
2) Means with the same letter are not significantly different at α=0.05
Normal : Untreated Group
Control : Streptozotocin-induced-diabetes Group Sample A : Nondiabetic Acupunctured Group Sample B : Streptozotocin-induced-diabetes-and -Acupunctured Group
Table Ⅱ. The number of NADPH-d-positive neurons in the FR1/FR2 of rats.
Group Number of
slices Average Duncan Grouping Normal 18 2.44 ± 0.271) A2) Control 13 2.08 ± 0.26 A Sample A 8 2.13 ± 0.35 A Sample B 16 2.31 ± 0.35 A 1) Data are mean ± SEM
2) Means with the same letter are not significantly different at α=0.05
Normal : Untreated Group
Control : Streptozotocin-induced-diabetes Group
Sample A : Nondiabetic Acupunctured Group Sample B : Streptozotocin-induced-diabetes-and -Acupunctured Group
3. HL 영역에서의 NADPH-d 변화
대뇌피질의 HL의 NADPH-d 변화를 분석하 여 본 결과, 정상군의 OD값은 15.50 ± 1.09, 대조군은 10.15 ± 0.75, 실험군 A는 12.75 ± 1.31, 실험군 B는 15.87 ± 0.96이었다. 정상군 에 비해 대조군은 유의한 감소를 나타내었으며 실험군 B는 대조군에 비해 유의한 증가를 나타
내었다. 실험군 A는 대조군에 비해 증가를 나 타내었으나 유의성은 나타나지 않았다(Table
Ⅲ).
4. PAR1 영역에서의 NADPH-d 변화 대뇌피질의 PAR1의 NADPH-d 변화를 분석 하여 본 결과, 정상군의 OD값은 15.78 ± 0.87, 대조군은 11.92 ± 0.97, 실험군 A는 11.75 ± 1.46, 실험군 B는 14.62 ± 1.06이었다. 정상군 에 비해 대조군은 유의한 감소를 나타냈고 실 험군 A도 감소를 보였다. 실험군 A와 B는 대 조군에 비해서 유의성은 나타나지 않았다 (Table Ⅳ).
5. PAR2 영역에서의 NADPH-d 변화 대뇌피질의 PAR2의 NADPH-d 변화를 분석 하여 본 결과, 정상군의 OD값은 12.83 ± 0.64, 대조군은 9.15 ± 0.79, 실험군 A는 11.25 ± 0.84, 실험군 B는 11.12 ± 0.68이었다. 정상군 에 비해 대조군은 유의한 감소를 나타냈고, 실 험군 A와 B는 대조군에 비해 증가를 나타냈으 나 유의성은 나타나지 않았다(Table Ⅴ).
Table Ⅲ. The number of NADPH-d-positive neurons in the HL of rats.
Group Number
of slices Average Duncan Grouping Normal 18 15.50 ± 1.091) A2) Control 13 10.15 ± 0.75 B Sample A 8 12.75 ± 1.31 AB Sample B 16 15.87 ± 0.96 A 1) Data are mean ± SEM
2) Means with the same letter are not significantly different at α=0.05
Normal : Untreated Group
Control : Streptozotocin-induced-diabetes Group
Sample A : Nondiabetic Acupunctured Group Sample B : Streptozotocin-induced-diabetes-and -Acupunctured Group
Table Ⅳ. The number of NADPH-d-positive neurons in the PAR1 of rats.
Group Number of
slices Average D u n c a n Grouping Normal 18 15.78 ± 0.871)A2) Control 13 11.92 ± 0.97 B Sample A8 11.75 ± 1.46 B Sample B16 14.62 ± 1.06 AB 1) Data are mean ± SEM
2) Means with the same letter are not significantly different at α=0.05
Normal : Untreated Group
Control : Streptozotocin-induced-diabetes Group Sample A : Nondiabetic Acupunctured Group Sample B : Streptozotocin-induced-diabetes-and -Acupunctured Group
Table Ⅴ. The number of NADPH-d-positive neurons in the PAR2 of rats.
Group Number
of slices Average Duncan Grouping Normal 18 12.83 ± 0.641) A2) Control 13 9.15 ± 0.79 B Sample A 8 11.25 ± 0.84 AB Sample B 16 11.12 ± 0.68 AB 1) Data are mean ± SEM
2) Means with the same letter are not significantly different at α=0.05
Normal : Untreated Group
Control : Streptozotocin-induced-diabetes Group Sample A : Nondiabetic Acupunctured Group Sample B : Streptozotocin-induced-diabetes-and -Acupunctured Group
6. PRH 영역에서의 NADPH-d 변화 대뇌피질의 PRH의 NADPH-d 변화를 분석 하여 본 결과, 정상군의 OD값은 13.72 ± 1.15, 대조군은 11.76 ± 0.84, 실험군 A는 12.12 ± 0.81, 실험군 B는 14.37 ± 0.76이었다. 정상군, 대조군, 실험군 A 및 실험군 B 모두 통계학적 으로 유의한 차가 인정되지 않았다(Table Ⅵ).
Table Ⅵ. The number of NADPH-d-positive neurons in the PRH of rats.
Group Number
of slices Average Duncan Grouping Normal 18 13.72 ± 1.151) A2) Control 13 11.76 ± 0.84 A Sample A 8 12.12 ± 0.81 A Sample B 16 14.37 ± 0.76 A 1) Data are mean ± SEM
2) Means with the same letter are not significantly different at α=0.05
Normal : Untreated Group
Control : Streptozotocin-induced-diabetes Group Sample A : Nondiabetic Acupunctured Group Sample B : Streptozotocin-induced-diabetes-and -Acupunctured Group
Ⅳ. 考 察
당뇨병은 insulin작용의 절대적 또는 상대적 부족이나 insulin 표적세포에서 insulin의 생물 학적 효과 감소로 인하여 발생되는 고혈당 상 태 및 탄수화물, 지방 및 단백질의 대사장애가 지속되는 질환으로 병태생리에 따라 제 Ⅰ형, 인슐린 의존성 당뇨병과 제2형 제Ⅱ형, 인슐린 비의존형 당뇨병으로 대별하고, 그 이외에 영 양실조성 당뇨병과 임신성 당뇨병 및 이차성 당뇨병으로 구분하며 서로 다른 발병원인 및 유발인자에 따라 임상양상이 다르게 나타나는 이형성(heterogeneity)의 질환군으로 유전인자 를 갖고 있는 사람에게 비만, 성장 호르몬, 감 염, 임신, 스트레스, 갑상선 기능 항진 등의 환 경인자가 서로 얽혀 고혈당과 그에 따른 다음, 다뇨, 다식등의 증상이 유발되며 모세혈관 병 증, 동맥경화증, 신장, 눈, 말초신경질환 등 여 러 합병증을 동반한다7).
한의학에서 당뇨는 소갈에 해당되며 소갈에 대한 이론은 여러학설이 있으나 종합하면 삼소 로 귀결되며 상소, 중소, 하소로 구분하고 있으 며, 치법은 청열 보음 윤조 사화 생진양혈등을 위주로 하였다8). 그간의 연구들을 고찰해보면 강9)은 저실자추출물이 Streptozotocin으로 당
뇨병을 유발시킨 동물모델에서 음경해물체에 서의 NOS 활성이 증가되었음을 보고하였다.
정10)등은 죽력이 당뇨병에 미치는 영향을 규명 하기 위하여 streptozotocin으로 생쥐에 당뇨병 을 유발시키고 검체를 투여한 결과 당뇨 생쥐 의 신장과 간장에 영향을 주지 않으면서 혈당 강하 효과가 있음을 보고하였고, 김11)등은 alloxan으로 유발시킨 당뇨병 흰쥐의 삼음교 (Sp6)에 대한 인삼 및 홍삼 약침이 혈청중 insulin, glucose, glucagon 및 c-peptide 함량 에 유의한 영향을 주는 것으로 보고하였다.
NO는 자유롭게 확산하는 가스로서 신경계, 혈관계 및 면역계에서 세포사이의 작용을 매개 하는 메신저 물질로 중요한 역할을 한다12). 1990년 초에 동물세포에서 세포간의 메신저로 서 생성된다는 것을 발견하였고 혈압, platelet adhesion, neutrophil의 집성뿐만 아니라 뇌에 서 synaptic plasticity의 역할과 관련이 있을 것으로 보고되어졌다13). 즉 NO는 혈소판내에 서 혈소판의 응집을 억제하며 대식세포에서 세 포독성을 매개하는 작용을 하며 일부 인체조직 에서는 혈관확장을 매개하는 물질로도 알려져 있다. 혈관확장을 매개하는 물질로서 뇌 조직 에서는 확인되지 않았으나 대뇌혈류순환은 NO 에 의해 조절되며 NO는 내피세포 뿐만 아니라 혈관주위 신경섬유에서 나오는 것으로 확인되 었다. 또한 신경계에서 NO는 장기기억의 역행 성전도물질로 작용할 것으로 생각되며 NO가 과도 생성될 경우에는 신경독소로 작용한다고 알려져 있다14).
NOS는 NO를 만드는 효소로써 그 작용에 대한 것은 확실히 알려진 바가 없다. 1981년 이전까지 NO의 생성은 특정한 세균의 질소화 과정에서 발생되는 것으로 생각되었으나 Mon- cada15) 등은 NO가 L-arginine의 guanidino nitrogen으로부터 NOS에 의하여 생성된다는 사실을 밝혔다.
NOS를 갖고 있는 신경세포를 조직학적으로 관찰하는 방법으로 NADPH-d 조직화학을 사 용하는데 이 방법은 NOS가 nitroblue tetrazo- lium(NBT)을 물에 녹지 않는 NBT formazan
으로 환원시키는 NADPH-d 활성작용이 있다 는 원리를 이용한 방법이다. 이 작용에는 꼭 NADPH가 필요하며 NOS는 NADPH를 전자 공여자로 필요로 한다. NADPH-d 활성은 NOS 없이도 부신피질과 신장에서 나타날 수 있지만, 대뇌피질과 선조체에 분포하는 NADPH-d 함유신경원은 NOS와 일치하는 것 으로 알려졌다16,17). 즉 NO를 만드는 효소인 NOS를 함유한 신경세포는 NADPH-d 조직화 학을 통하여 염색할 수 있으며 NOS의 효소활 성은 NADPH-d 활성도와 비례한다는 보고18) 가 있어 본 실험에서 NADPH-d의 활성도를 측 정하였다.
침자극이 중추신경계에 미치는 영향에 대한 국내 연구는 최근에 신경전달 물질과 관련지어 져 활발히 진행되고 있다. 손19) 등은 침자극을 가한 실험군의 대뇌 활성도를 컴퓨터 영상분석 기를 사용하여 동위원소 standard와 비교 분석 한 결과 실험군 뇌세포의 여러 구역에서 활성 이 증가된 것을 관찰하였고, 김20) 등은 전침자 극이 뇌의 신경전달 물질에 미치는 영향에 대 해 전침자극 후 NADPH-d 신경세포와 NPY 신경세포의 염색성을 관찰한 결과, NOS와 NPY가 전침자극 부위에 따라 각각 다른 신경 세포의 변화를 보여 전침료법이 중추신경계의 수 많은 peptidegic system를 활성화시킨다는 가설을 제시하였다. 또한 김21-24) 등은 이침자극 으로 인한 여러 가지 신경전달 물질 (CCK, VIP, TPH, leptin)의 변화를 관찰하였는데 이 침자극 후 대뇌피질 대부분의 영역에서 유의한 증가를 나타내어, 신경전달물질이 침자극에 의 해서 활성화될 수 있다는 가능성을 보여주었 다.
본 실험 결과에 있어, 대조군은 정상군에 비해 대부분의 대뇌피질에서 NOS의 활성도가 유의 성(p＜0.05)있게 감소되었다. 이러한 결과는 기 존의 실험결과와 일치하는 것으로 STZ로 유발 된 당뇨쥐의 대뇌피질은 NOS의 활성도가 감 소됨을 확인할 수 있었다. 또한 STZ로 당뇨병 을 유발시킨 흰쥐에 족삼리 침자극을 시행한 실험군은 STZ-당뇨병 흰쥐에 비해서 NOS의
활성도가 증가하였다. 이러한 결과는 당뇨병이 유발된 흰쥐에 있어서 대뇌피질에서 저하된 NOS의 활성도를 침자극에 의해서 조절될 수 있음을 보여주는 결과라고 할 수 있다. 이상의 결과로 보아 족삼리 침치료가 NADPH-d 신경 세포에 변화를 줄 수 있음을 관찰할 수 있었으 며, 뇌세포에 존재하는 NO가 침자극에 의해서 활성화될 수 있다는 가능성을 제시할 수 있었 다. 결국 한의학에서 치료법 중의 하나로 사용 되는 침요법이 신경계 세포사이의 메신저 물질 인 NO의 활성변화에 영향을 준다는 가능성을 제시할 수 있으며, 향후 지속적이며 다각적인 방향으로 연구해야 할 것으로 사려된다.
참고문헌
1. 민헌기. 임상내분비학. 서울:고려의학. 1990:
268-9.
2. 두호경, 안세영, 안영민. 당뇨병의 만성합병증 에 대한 한의학적 고찰. 경희의학. 1998;14:
245-6.
3. Holz RW, Fisher SK. Synaptic Tran- smission and cellular signalling : an over- view. In: iegel GJ, Agranoff BW, Albers RW, Fisher SK, Uhler MD, eds. Basic Neurochemistry. Philadephia:Lippincott -Raven. 1999:210-1.
4. Yu WJ, Juang SW, Chin WT, Chi TC, Wu TJ, Cheng JT. Decrease of nitric oxide synthase in the cerebrocortex of strepto- zotocin-induced diabetic rats. Neuros- cience Letters, 1999;272:99-102.
5. Paxinos G, Watson C. The rat brain in stereotaxic coordinates. 3rd ed.. San Diego:
Academic Press. 1985.
6. 박순영. 의학통계학. 서울:경희대학교출판 국. 1998:162-183.
7. 두호경. 신계내과학. 서울:동양의학연구원.
1989:594-647.
8. 이기순. 한방내과학. 서울:수문사. 1969:174 -94.
9. 강정준, 정지천, 신억섭. 저실자추출물이 Streptozotocin에 의한 당뇨병 흰쥐 음경해면 체의 Nitric oxide synthase 활성 및 Nitrite 함량에 미치는 영향. 대한한의학회지. 1998;
19(2):112-24.
10. 정찬원, 장경선, 최찬헌, 오영준. 대나무 숯 제조과정에서 나오는 죽력이 Streptozotocin 으로 유발된 당뇨 생쥐에 미치는 영향(I). 동의 생리병리학회지. 2001;15(1):28-35.
11. 김웅시, 고형균, 강성길. 수삼, 백삼 및 홍삼수 침이 Alloxan 당뇨병 흰쥐에 미치는 영향.
대한침구학회지. 1989;6(1):1-14.
12. Giatgen A. The Dual Role of Nitric Oxide in Islet β-Cell. New Physiol Sci. 1999;
14:49-53.
13. Feldman PL, Griffith OW, Sheuhr DJ. The surprising life of nitric oxide. Chem Eng News. 1993:26-38.
14. Koh JY, Choi DW. Vulnerability of cultured cortical neurons to damage by endotoxins, Differential susceptibility of neurons containing NADPH-diaphorase. J Neu- rosci. 1993;8:2153-63.
15. Moncada S, Palmer RMJ, Higgs EA. Nitric Oxide, Physiology. Phathology and Phar- macol Rev. 1991;43:109-42.
16. Dawson TM, Bredt DS, Fotuhi M, Hwang PM, Snyder SH. Nitric oxide synthase and neuronal NADPH diaphorase are identical in brain and peripheral tissues. Proc Natl Acad Sci. 1991;88: 7797-801.
17. Hope BT, Michael GJ, Knigge KM, Vincent SR. Neuronal NADPH diaphorase is a nitric oxide synthase. Proc Natl Acad Sci.
1991;88:2811-4.
18. Bicker G. NO News from insect brains.
Trends Neurosci. 1998;21:349-55.
19. 손낙원, 원란, 손영주, 김용석, 박영배. 침자극 이 중추신경계에 미치는 영향에 대한 영상화 연구. 전국한의학학술대회. 2000:75-6.
20. 김창환, 김용석, 허영범, 유진화. 전침자극이
SHR 흰쥐 대뇌의 NADPH-diaphorase와 Neuropeptide Y 신경세포에 미치는 영향. 대 한침구학회지. 1999;16(4):283-91.
21. 김이화, 김연정, 임백빈, 장미현, 정주호, 김창 주. 이침이 절식시킨 흰쥐의 대뇌피질에서 CCK 활성변화에 미치는 영향. 대한침구학회 지. 2000;17(3):168-75.
22. 김이화, 김연정, 임백빈, 장미현, 정주호, 김창 주. 이침이 절식시킨 흰쥐의 뇌신경세포 활성 변화에 미치는 영향, 대한침구학회지. 2001;
18(1):21-8.
23. 이정현, 김이화, 이은용. 이침자극이 절식 stress로 인한 흰쥐 대뇌피질의 NADPH -diaphorase 신경세포에 미치는 영향. 대한침 구학회지. 2001;18(2):79-90.
24. Kim EH, Kim Y, Jang MH, Lim BV, Kim YJ, Chung JH, Kim CJ. Auricular acupuncture decreases neuropeptide Y expression in the hypothalamus of food- deprived Sprague-Dawley rats. Neuro- science Letters. 2001;307:113-116.
