실험사료의 배치는 완전확률계획법(Completely randomized design)을 실시하고, 성장 및 분석결과는 SPSS (Version 12.0) 프로그램을 이용하여 One-way ANOVA 로 통계 분석된다. 데이터 값의 유의차는 Duncan's multiple test (P≤0.05)로 비교되었다 데이터는 평균값±표준편차(mean±SD)로 나타내었다. 백분율 데이터는 arcsine 변형값으로 계산하여 통계 분석하였다.
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Table 4. Formulation of the experimental diets for red seabream (Pagrus major).
Ingredients (% DM) Con HE0.15 HE0.3 LE0.15 LE0.3
2 L-ascorbic acid, 121.2; DL- tocopheryl acetate, 18.8; thiamin hydrochloride, 2.7; riboflavin, 9.1; pyridoxine hydrochloride, 1.8; niacin, 36.4; Ca-D-pantothenate, 12.7; myo-inositol, 181.8; D-biotin, 0.27; folic acid, 0.68; p-aminobezoic acid, 18.2; menadione, 1.8; retinyl acetate, 0.73; cholecalficerol, 0.003; cyanocobalamin, 0.003.
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같은 활성산소종이 감소되었기 때문이라 판단된다. Lysozyme 활성은 HE0.3 실험구가 다른 실험구에 비해 유의적으로 높은 값을 나타내었다. SOD 활성분석의 경우 모든 실험구에서 유의적인 차이를 확인할 수 없었다. 모든 결과를 종합해볼 때 유화제 종류에 따른 차이는 미비한 것으로 나타났으며 성장 및 사료효율 향상을 위한 참돔 사료 내 유화제 적정 첨가 농도는 0.3% 이상일 것으로 사료된다. 또한 0.3% HE 첨가는 참돔의 면역활성을 증가시킬 수 있을 것으로 사료된다.
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Table 5. Growth performance of red seabream (Pagrus major, initial body weight, 30.0±0.3
g) fed the five experimental diets for 12 weeks.Con HE0.15 HE0.3 LE0.15 LE0.3 FBM (g) 78.7±6.7 76.7±0.9 79.1±5.4 79.3±2.4 81.6±4.7 WG (%)1 162±20 153±8 161±16 163±8 173±20 FCR2 1.39±0.04 1.37±0.13 1.26±0.14 1.38±0.08 1.34±0.10 PER3 1.53±0.04 1.56±0.15 1.70±0.20 1.55±0.09 1.60±0.12 SGR (%)4 1.14±0.09 1.11±0.04 1.14±0.07 1.15±0.03 1.19±0.09 FI (g)5 64.2±4.7 63.4±5.3 60.6±2.0 64.7±2.2 65.2±3.3 Survival (%) 82.7±2.3 94.7±9.2 97.3±4.6 90.7±2.3 88.0±4.0
Values in the same row having different superscript letters are significantly different (P< 0.05).
1Weight gain (%) = 100 × (final mean body weight – initial mean body weight)/initial mean body weight
2Feed conversion ratio = dry feed fed/wet weight gain
3Protein efficiency ratio = wet weight gain/total protein given
4Specific growth rate (%) = [(loge final body weight – loge initial body weight)/days] × 100
5Feed intake (g) = dry feed fed/fish
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Fig. 1. Final body weight and weight gain of red seabream (Pagrus major) fed the five
experimental diets for 12 weeks.25
Fig. 2. Specific growth rate and feed intake of red seabream (Pagrus major) fed the five
experimental diets for 12 weeks.26
Fig. 3. Feed conversion ratio and protein efficiency ratio of red seabream (Pagrus major) fed
the five experimental diets for 12 weeks.27
Table 6. Blood parameters of red seabream (Pagrus major) fed the five experimental diets
for 12 weeks.Con HE0.15 HE0.3 LE0.15 LE0.3
Hematocrit (%) 45.7±2.9 43.0±1.4 43.7±2.2 42.5±2.2 43.9±2.3
Hemoglobin (g/dL) 6.97±0.85 7.64±0.75 7.61±0.25 7.52±0.21 7.63±0.60
Values in the same column having different superscript letters are significantly different (P< 0.05).
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Table 7. Non-specific immune responses of red seabream (Pagrus major) fed the five
experimental diets for 12 weeks.Con HE0.15 HE0.3 LE0.15 LE0.3 NBT (absorbance) 1.03±0.04 1.07±0.04 1.10±0.01 1.08±0.02 1.09±0.03 MPO (absorbance) 1.23±0.16 1.17±0.14 1.13±0.07 1.20±0.09 1.16±0.08 Lysozyme (ug/ml) 29.2±4.7a 29.9±9.3a 42.0±5.8b 26.9±6.0a 29.8±4.3a SOD (% inhibition) 29.6±5.3 26.5±6.1 22.1±6.4 26.8±4.4 24.4±3.7
Mean values of triplicate groups, values are presented as mean ± SD. Values in the same column having different superscript letters are significantly different (P< 0.05).
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31 Schmitz (1961) 방법으로 methylation 한 후 Gas chromatography (Agilent technologies, 6890N, USA)를 이용하여 분석하였다.
32 peptidoglycan 의 N-acetylmuramic acid 과 N-acetyl-D-glucosamine 잔기들 사이의 β-1,4-glucoside 결합을 가수분해하여 세균의 세포벽을 파괴함으로써 항균작용을
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Lyophilized hen egg white lysozyme (HEWL; sigma, USA)를 이용하여 standard curve 을 구하고 ug/ml 로 표시하였다.
4.1.4. 통계학적 분석
실험사료의 배치는 완전확률계획법(Completely randomized design)을 실시하고, 성장 및 분석결과는 SPSS (Version 12.0) 프로그램을 이용하여 One-way ANOVA 로 통계 분석된다. 데이터 값의 유의차는 Tukey's test (P≤0.05)로 비교되었다 데이터는 평균값±표준편차(mean±SD)로 나타내었다. 백분율 데이터는 arcsine 변형 값으로 계산하여 통계 분석하였다.
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Table 8. Formulation of the experimental diets for olive flounder (Paralichthys olivaceus).
Ingredients
CON DGLL DGLH DGPL DGPH DGLP
2 L-ascorbic acid, 121.2; DL- tocopheryl acetate, 18.8; thiamin hydrochloride, 2.7; riboflavin, 9.1; pyridoxine hydrochloride, 1.8; niacin, 36.4; Ca-D-pantothenate, 12.7; myo-inositol, 181.8; D-biotin, 0.27; folic acid, 0.68; p-aminobezoic acid, 18.2; menadione, 1.8; retinyl acetate, 0.73; cholecalficerol, 0.003; cyanocobalamin, 0.003.
3DGLL: low purity 1,3-lauryl glycerol.
4DGLH: high purity 1,3-lauryl glycerol.
5DGPL: low purity 1,3-palmityl glycerol.
6DGPH: high purity 1,3-palmityl glycerol.
7DGLP: 50% low purity 1,3-lauryl glycerol + 50% low purity 1,3-palmityl glycerol.
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Table 9. Fatty acid composition (% total fatty acids) of the experimental diets.
Fatty acid CON DGLL DGLH DGPL DGPH DGLP
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4.2. 결과 및 고찰
실험 종료 후 조사된 성장 결과를 Table 10 에 나타내었다. 분석결과
diglycerol 로 어유를 50% 대체한 모든 실험구(DGLL, DGLH, DGPL, DGPH)가 대조구와 유의적인 차이를 보이지 않았으며 어유를 100% 대체한 DGLP 또한 대조구와 유의적인 차이가 없었다. 생존율은 모든 실험구에서 유의적인 차이가 없었다. 혈액학적 분석결과와 면역분석 결과를 Table 11, 12 에 나타내었다.
분석결과 성장결과와 마찬가지로 모든 분석에서 실험구간에 유의적인 차이가 없었다. 전어체에서의 지방산분석 결과는 Table 13 에 나타내었다. 분석결과
DGLL, DGLH, DGLP 실험구에서만 lauric acid 가 축척된 것을 확인할 수 있었다.
이는 실험사료의 lauric acid 가 어체로 전이된 것으로 사료된다. Palmitic acid 함량은 모든 실험구에서 유의적인 차이가 없었다. DHA 와 EPA 함량은 모든 실험구에서 유의적인 차이가 없었으나 DGLP 실험구의 DHA 함량이 대조구에 비해 다소 감소되는 경향을 보였다. 분석된 성장 결과로 미루어 볼 때 diglycerol 은 넙치 배합사료 내 어유를 100%까지 대체 할 수 있을 것으로 사료된다.
이러한 대체수준은 넙치의 일반적인 건강도, 면역활성 및 필수 지방산 (DHA, EPA) 대사에 악 영향을 미치지 않는 것으로 판단된다.
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Table 10. Growth performance of olive flounder (Paralichthys olivaceus, mean initial body
weight 13.4±0.1 g) fed the six experimental diets for 12 weeks.CON DGLL DGLH DGPL DGPH DGLP
Mean values of triplicate groups, values are presented as mean ± SD. Values in the same column having different superscript letters are significantly different (P< 0.05).
1Final mean body weight (g)
2Weight gain (%) = (final body weight - initial body weight)/initial body weight × 100
3Specific growth rate (%) = [(loge final body weight – loge initial body weight)/days] × 100
4Feed conversion ratio = dry feed fed/wet weight gain
5Protein efficiency ratio = wet weight gain/total protein given
6Feed intake (g) = dry feed fed/fish
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Fig. 4. Final body weight and weight gain of olive flounder (Paralichthys olivaceus) fed the
six experimental diets for 12 weeks.39
Fig. 5. Specific growth rate and feed intake of olive flounder (Paralichthys olivaceus) fed
the six experimental diets for 12 weeks.40
Fig. 6. Feed conversion ratio and protein efficiency ratio of olive flounder (Paralichthys
olivaceus) fed the six experimental diets for 12 weeks.
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Table 11. Blood parameters of olive flounder (Paralichthys olivaceus) fed the six
experimental diets for 12 weeks.CON DGLL DGLH DGPL DGPH DGLP
Hematocrit (%) 23.7±0.3 22.7±1.7 22.3±3.5 25.4±1.8 21.6±2.6 24.3±2.7
Hemoglobin (g/dL) 2.06±0.46 1.72±0.40 1.62±0.36 1.76±0.31 1.44±0.07 1.86±0.11
Mean values of triplicate groups, values are presented as mean ± SD. Values in the same column having different superscript letters are significantly different (P< 0.05).
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Table 12. Non-specific immune responses of olive flounder (Paralichthys olivaceus) fed the
six experimental diets for 12 weeks.CON DGLL DGLH DGPL DGPH DGLP
NBT (absorbance) 0.68±0.06 0.62±0.03 0.67±0.16 0.69±0.09 0.60±0.12 0.65±0.11
MPO (absorbance) 1.07±0.14 1.47±0.20 1.16±0.13 1.25±0.12 1.13±0.28 1.23±0.17
Lysozyme (ug/ml) 57.6±12.2 54.7±5.9 66.1±4.4 62.1±4.5 70.1±14.3 72.0±5.8
Mean values of triplicate groups, values are presented as mean ± SD. Values in the same column having different superscript letters are significantly different (P< 0.05).
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Table 13. Whole body fatty acid composition (% total fatty acids).
Fatty acid Con DGLL DGLH DGPL DGPH DGLP
Values in the same column having different superscript letters are significantly different (P< 0.05).
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실험사료와 전어체에서의 지방산 분석은 다음과 같이 실시하였다. 먼저 Folch et al. (1959)의 방법에 따라 지방을 추출한다. 추출된 지방을 Metcalfe and Schmitz (1961) 방법으로 methylation 한 후 Gas chromatography (Agilent technologies, 6890N, USA)를 이용하여 분석하였다.
47 peptidoglycan 의 N-acetylmuramic acid 과 N-acetyl-D-glucosamine 잔기들 사이의 β-1,4-glucoside 결합을 가수분해하여 세균의 세포벽을 파괴함으로써 항균작용을
Lyophilized hen egg white lysozyme (HEWL; sigma, USA)를 이용하여 standard curve 을 구하고 ug/ml 로 표시하였다.
5.1.4. 통계학적 분석
실험사료의 배치는 완전확률계획법(Completely randomized design)을 실시하고, 성장 및 분석결과는 SPSS (Version 12.0) 프로그램을 이용하여 One-way ANOVA 로
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통계 분석된다. 데이터 값의 유의차는 Tukey's test (P≤0.05)로 비교되었다 데이터는 평균값±표준편차(mean±SD)로 나타내었다. 백분율 데이터는 arcsine 변형 값으로 계산하여 통계 분석하였다.
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Table 14. Formulation of the experimental diets for olive flounder (Paralichthys olivaceus).
Ingredients
HFO LFO LPP(2)0.5 LPP(2)1.0 LPP(2)1.5 LPP(3)1.0
2 L-ascorbic acid, 121.2; DL- tocopheryl acetate, 18.8; thiamin hydrochloride, 2.7; riboflavin, 9.1; pyridoxine hydrochloride, 1.8; niacin, 36.4; Ca-D-pantothenate, 12.7; myo-inositol, 181.8; D-biotin, 0.27; folic acid, 0.68; p-aminobezoic acid, 18.2; menadione, 1.8; retinyl acetate, 0.73; cholecalficerol, 0.003; cyanocobalamin, 0.003.
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