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실험사료의 배치는 완전확률계획법(Completely randomized design)을 실시하고, 성장 및 분석결과는 SPSS (Version 12.0) 프로그램을 이용하여 One-way ANOVA 로 통계 분석된다. 데이터 값의 유의차는 Duncan's multiple test (P≤0.05)로 비교되었다 데이터는 평균값±표준편차(mean±SD)로 나타내었다. 백분율 데이터는 arcsine 변형값으로 계산하여 통계 분석하였다.

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Table 4. Formulation of the experimental diets for red seabream (Pagrus major).

Ingredients (% DM) Con HE0.15 HE0.3 LE0.15 LE0.3

2 L-ascorbic acid, 121.2; DL- tocopheryl acetate, 18.8; thiamin hydrochloride, 2.7; riboflavin, 9.1; pyridoxine hydrochloride, 1.8; niacin, 36.4; Ca-D-pantothenate, 12.7; myo-inositol, 181.8; D-biotin, 0.27; folic acid, 0.68; p-aminobezoic acid, 18.2; menadione, 1.8; retinyl acetate, 0.73; cholecalficerol, 0.003; cyanocobalamin, 0.003.

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같은 활성산소종이 감소되었기 때문이라 판단된다. Lysozyme 활성은 HE0.3 실험구가 다른 실험구에 비해 유의적으로 높은 값을 나타내었다. SOD 활성분석의 경우 모든 실험구에서 유의적인 차이를 확인할 수 없었다. 모든 결과를 종합해볼 때 유화제 종류에 따른 차이는 미비한 것으로 나타났으며 성장 및 사료효율 향상을 위한 참돔 사료 내 유화제 적정 첨가 농도는 0.3% 이상일 것으로 사료된다. 또한 0.3% HE 첨가는 참돔의 면역활성을 증가시킬 수 있을 것으로 사료된다.

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Table 5. Growth performance of red seabream (Pagrus major, initial body weight, 30.0±0.3

g) fed the five experimental diets for 12 weeks.

Con HE0.15 HE0.3 LE0.15 LE0.3 FBM (g) 78.7±6.7 76.7±0.9 79.1±5.4 79.3±2.4 81.6±4.7 WG (%)1 162±20 153±8 161±16 163±8 173±20 FCR2 1.39±0.04 1.37±0.13 1.26±0.14 1.38±0.08 1.34±0.10 PER3 1.53±0.04 1.56±0.15 1.70±0.20 1.55±0.09 1.60±0.12 SGR (%)4 1.14±0.09 1.11±0.04 1.14±0.07 1.15±0.03 1.19±0.09 FI (g)5 64.2±4.7 63.4±5.3 60.6±2.0 64.7±2.2 65.2±3.3 Survival (%) 82.7±2.3 94.7±9.2 97.3±4.6 90.7±2.3 88.0±4.0

Values in the same row having different superscript letters are significantly different (P< 0.05).

1Weight gain (%) = 100 × (final mean body weight – initial mean body weight)/initial mean body weight

2Feed conversion ratio = dry feed fed/wet weight gain

3Protein efficiency ratio = wet weight gain/total protein given

4Specific growth rate (%) = [(loge final body weight – loge initial body weight)/days] × 100

5Feed intake (g) = dry feed fed/fish

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Fig. 1. Final body weight and weight gain of red seabream (Pagrus major) fed the five

experimental diets for 12 weeks.

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Fig. 2. Specific growth rate and feed intake of red seabream (Pagrus major) fed the five

experimental diets for 12 weeks.

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Fig. 3. Feed conversion ratio and protein efficiency ratio of red seabream (Pagrus major) fed

the five experimental diets for 12 weeks.

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Table 6. Blood parameters of red seabream (Pagrus major) fed the five experimental diets

for 12 weeks.

Con HE0.15 HE0.3 LE0.15 LE0.3

Hematocrit (%) 45.7±2.9 43.0±1.4 43.7±2.2 42.5±2.2 43.9±2.3

Hemoglobin (g/dL) 6.97±0.85 7.64±0.75 7.61±0.25 7.52±0.21 7.63±0.60

Values in the same column having different superscript letters are significantly different (P< 0.05).

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Table 7. Non-specific immune responses of red seabream (Pagrus major) fed the five

experimental diets for 12 weeks.

Con HE0.15 HE0.3 LE0.15 LE0.3 NBT (absorbance) 1.03±0.04 1.07±0.04 1.10±0.01 1.08±0.02 1.09±0.03 MPO (absorbance) 1.23±0.16 1.17±0.14 1.13±0.07 1.20±0.09 1.16±0.08 Lysozyme (ug/ml) 29.2±4.7a 29.9±9.3a 42.0±5.8b 26.9±6.0a 29.8±4.3a SOD (% inhibition) 29.6±5.3 26.5±6.1 22.1±6.4 26.8±4.4 24.4±3.7

Mean values of triplicate groups, values are presented as mean ± SD. Values in the same column having different superscript letters are significantly different (P< 0.05).

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31 Schmitz (1961) 방법으로 methylation 한 후 Gas chromatography (Agilent technologies, 6890N, USA)를 이용하여 분석하였다.

32 peptidoglycan 의 N-acetylmuramic acid 과 N-acetyl-D-glucosamine 잔기들 사이의 β-1,4-glucoside 결합을 가수분해하여 세균의 세포벽을 파괴함으로써 항균작용을

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Lyophilized hen egg white lysozyme (HEWL; sigma, USA)를 이용하여 standard curve 을 구하고 ug/ml 로 표시하였다.

4.1.4. 통계학적 분석

실험사료의 배치는 완전확률계획법(Completely randomized design)을 실시하고, 성장 및 분석결과는 SPSS (Version 12.0) 프로그램을 이용하여 One-way ANOVA 로 통계 분석된다. 데이터 값의 유의차는 Tukey's test (P≤0.05)로 비교되었다 데이터는 평균값±표준편차(mean±SD)로 나타내었다. 백분율 데이터는 arcsine 변형 값으로 계산하여 통계 분석하였다.

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Table 8. Formulation of the experimental diets for olive flounder (Paralichthys olivaceus).

Ingredients

CON DGLL DGLH DGPL DGPH DGLP

2 L-ascorbic acid, 121.2; DL- tocopheryl acetate, 18.8; thiamin hydrochloride, 2.7; riboflavin, 9.1; pyridoxine hydrochloride, 1.8; niacin, 36.4; Ca-D-pantothenate, 12.7; myo-inositol, 181.8; D-biotin, 0.27; folic acid, 0.68; p-aminobezoic acid, 18.2; menadione, 1.8; retinyl acetate, 0.73; cholecalficerol, 0.003; cyanocobalamin, 0.003.

3DGLL: low purity 1,3-lauryl glycerol.

4DGLH: high purity 1,3-lauryl glycerol.

5DGPL: low purity 1,3-palmityl glycerol.

6DGPH: high purity 1,3-palmityl glycerol.

7DGLP: 50% low purity 1,3-lauryl glycerol + 50% low purity 1,3-palmityl glycerol.

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Table 9. Fatty acid composition (% total fatty acids) of the experimental diets.

Fatty acid CON DGLL DGLH DGPL DGPH DGLP

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4.2. 결과 및 고찰

실험 종료 후 조사된 성장 결과를 Table 10 에 나타내었다. 분석결과

diglycerol 로 어유를 50% 대체한 모든 실험구(DGLL, DGLH, DGPL, DGPH)가 대조구와 유의적인 차이를 보이지 않았으며 어유를 100% 대체한 DGLP 또한 대조구와 유의적인 차이가 없었다. 생존율은 모든 실험구에서 유의적인 차이가 없었다. 혈액학적 분석결과와 면역분석 결과를 Table 11, 12 에 나타내었다.

분석결과 성장결과와 마찬가지로 모든 분석에서 실험구간에 유의적인 차이가 없었다. 전어체에서의 지방산분석 결과는 Table 13 에 나타내었다. 분석결과

DGLL, DGLH, DGLP 실험구에서만 lauric acid 가 축척된 것을 확인할 수 있었다.

이는 실험사료의 lauric acid 가 어체로 전이된 것으로 사료된다. Palmitic acid 함량은 모든 실험구에서 유의적인 차이가 없었다. DHA 와 EPA 함량은 모든 실험구에서 유의적인 차이가 없었으나 DGLP 실험구의 DHA 함량이 대조구에 비해 다소 감소되는 경향을 보였다. 분석된 성장 결과로 미루어 볼 때 diglycerol 은 넙치 배합사료 내 어유를 100%까지 대체 할 수 있을 것으로 사료된다.

이러한 대체수준은 넙치의 일반적인 건강도, 면역활성 및 필수 지방산 (DHA, EPA) 대사에 악 영향을 미치지 않는 것으로 판단된다.

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Table 10. Growth performance of olive flounder (Paralichthys olivaceus, mean initial body

weight 13.4±0.1 g) fed the six experimental diets for 12 weeks.

CON DGLL DGLH DGPL DGPH DGLP

Mean values of triplicate groups, values are presented as mean ± SD. Values in the same column having different superscript letters are significantly different (P< 0.05).

1Final mean body weight (g)

2Weight gain (%) = (final body weight - initial body weight)/initial body weight × 100

3Specific growth rate (%) = [(loge final body weight – loge initial body weight)/days] × 100

4Feed conversion ratio = dry feed fed/wet weight gain

5Protein efficiency ratio = wet weight gain/total protein given

6Feed intake (g) = dry feed fed/fish

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Fig. 4. Final body weight and weight gain of olive flounder (Paralichthys olivaceus) fed the

six experimental diets for 12 weeks.

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Fig. 5. Specific growth rate and feed intake of olive flounder (Paralichthys olivaceus) fed

the six experimental diets for 12 weeks.

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Fig. 6. Feed conversion ratio and protein efficiency ratio of olive flounder (Paralichthys

olivaceus) fed the six experimental diets for 12 weeks.

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Table 11. Blood parameters of olive flounder (Paralichthys olivaceus) fed the six

experimental diets for 12 weeks.

CON DGLL DGLH DGPL DGPH DGLP

Hematocrit (%) 23.7±0.3 22.7±1.7 22.3±3.5 25.4±1.8 21.6±2.6 24.3±2.7

Hemoglobin (g/dL) 2.06±0.46 1.72±0.40 1.62±0.36 1.76±0.31 1.44±0.07 1.86±0.11

Mean values of triplicate groups, values are presented as mean ± SD. Values in the same column having different superscript letters are significantly different (P< 0.05).

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Table 12. Non-specific immune responses of olive flounder (Paralichthys olivaceus) fed the

six experimental diets for 12 weeks.

CON DGLL DGLH DGPL DGPH DGLP

NBT (absorbance) 0.68±0.06 0.62±0.03 0.67±0.16 0.69±0.09 0.60±0.12 0.65±0.11

MPO (absorbance) 1.07±0.14 1.47±0.20 1.16±0.13 1.25±0.12 1.13±0.28 1.23±0.17

Lysozyme (ug/ml) 57.6±12.2 54.7±5.9 66.1±4.4 62.1±4.5 70.1±14.3 72.0±5.8

Mean values of triplicate groups, values are presented as mean ± SD. Values in the same column having different superscript letters are significantly different (P< 0.05).

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Table 13. Whole body fatty acid composition (% total fatty acids).

Fatty acid Con DGLL DGLH DGPL DGPH DGLP

Values in the same column having different superscript letters are significantly different (P< 0.05).

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실험사료와 전어체에서의 지방산 분석은 다음과 같이 실시하였다. 먼저 Folch et al. (1959)의 방법에 따라 지방을 추출한다. 추출된 지방을 Metcalfe and Schmitz (1961) 방법으로 methylation 한 후 Gas chromatography (Agilent technologies, 6890N, USA)를 이용하여 분석하였다.

47 peptidoglycan 의 N-acetylmuramic acid 과 N-acetyl-D-glucosamine 잔기들 사이의 β-1,4-glucoside 결합을 가수분해하여 세균의 세포벽을 파괴함으로써 항균작용을

Lyophilized hen egg white lysozyme (HEWL; sigma, USA)를 이용하여 standard curve 을 구하고 ug/ml 로 표시하였다.

5.1.4. 통계학적 분석

실험사료의 배치는 완전확률계획법(Completely randomized design)을 실시하고, 성장 및 분석결과는 SPSS (Version 12.0) 프로그램을 이용하여 One-way ANOVA 로

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통계 분석된다. 데이터 값의 유의차는 Tukey's test (P≤0.05)로 비교되었다 데이터는 평균값±표준편차(mean±SD)로 나타내었다. 백분율 데이터는 arcsine 변형 값으로 계산하여 통계 분석하였다.

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Table 14. Formulation of the experimental diets for olive flounder (Paralichthys olivaceus).

Ingredients

HFO LFO LPP(2)0.5 LPP(2)1.0 LPP(2)1.5 LPP(3)1.0

2 L-ascorbic acid, 121.2; DL- tocopheryl acetate, 18.8; thiamin hydrochloride, 2.7; riboflavin, 9.1; pyridoxine hydrochloride, 1.8; niacin, 36.4; Ca-D-pantothenate, 12.7; myo-inositol, 181.8; D-biotin, 0.27; folic acid, 0.68; p-aminobezoic acid, 18.2; menadione, 1.8; retinyl acetate, 0.73; cholecalficerol, 0.003; cyanocobalamin, 0.003.

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Table 15. Fatty acid composition (% total fatty acids) of the experimental diets.

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