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화합물은 1차적으로 mouse 백혈병 P388을 사용 하고，천연물은 P388 및in W r o에서 KB 세포 등을 이용하여 검색한 후에 여기서 효과가 있을 경우에 mouse 결장암(C8) ， human 결장암 이종 이식 (C X-1)， mouse 유암(C D ), human 유암이 종이식 (M X -1 )，mouse 폐암(Lewis페암)，human 폐암 이종이식 (L X - 1)， mouse B16 melanoma,
mouse 백혈병 L1210 등을 이용하여 약효검색을
실시한다. 그러나 mouse Lewis 폐암과 human 폐암의 nude mouse이식 LX-1 등은 그유용성에
문제가 있어 1983년부터는 약간 개선하여 이들
을 제외한 대신 mouse ascitic sarcoma 인 M5076 을 포함시켜 실시하고 있다.
약효 검색의 일례를 들어보면 P388을 i가 vivo 에서 실험하는 경우에는 CDF, mouse에 106 cells 롤 ip로 이식한 후 약물을 ip로서 투여했을 때
투여군과 대조군의 생존비 (T /C% )가 합성품은
120% ，천연물은 130% 이상일 경우에 유효하다 고 판정하고 있다. 이러한 검색에서의 성적과 임상효과와 비교하여 볼 때에 T /C% 가 커서 유 효성이 크다고 판단된 것과 실제 임상효과에 있 어서 일정한 연관성은 없다. 그렇지만 임상에서
효과가 있는 항암제는 이러한 검색 system 중에
서 어느 한 암종에서라도 명확한 효과가 있다고 판단된 것임은 확실하다.
또한 항암제 개발에 있어서 중요한 점은 그
안전성을 충분히 검토하는 것이 필요하다. 급 성， 아급성，만성독성 시험과 최기형성，발암성 및 돌연변이원성 등의 시험이 필요하다.
그리고 중추신경，호흡， 순환기계， 자율신경 계，골격근 및 신기능 등에 대한 약리작용을 임 상 치료량에 해당하는 양 이상의 양까지에서도 검토해야만 한다. 그 외에 약물동태에 관련된 시 험도 중요하다. 임상에 이용시에는 이 외에도 제형의 문제와 양산의 문제점 등 중요한 과제가 있다.
이상은 주로 화학요법제에 대한 시험방법으로 작용기전 등이 전혀 다른 면역요법제의 경우에 는 약효 평가도 다른 특수한 실험 방법에 의해 서 실시되어져야 한다.
참 고 문 헌
1) 齊藤達雄: 암의 약물요법 개 발과 효과판정 , realize Inc. Japan (1985).
2) Mirabell, C.K., Johnson, R.K., Sung, C.M., Faucette, L.， Muirhead K. and Crook: S.T.
Cancer Res. 45，32 (1985).
3) Finlay G .J.， and Baguley: B.C., Europ. J.
Cancer Clin. Oncol. 20，947 (1984).
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Europ. J. Cancer. 17, 129 (1981).
간
(肝
)보호약물의 작용평가
유한양행
1. 서 언
생체장기중에서 간은 가장 큰 장기이며 2,000 여종 이상의 효소를보유하여 생체기능유지에필 수적인 역할을 담당하고 있다. 특히 위장관을 통하여 흡수되는 각종 영양소를 대사， 저장 및 생체 각 부위로 공급하는 작용을 할 뿐만 아니 라 이물질(異物質)인 의약품과 화학물질을 대사
종 욱
중앙연구소
시켜 체외로 배출하는 해독작용도 가지고 있다. 화학공업의 진보에 의해 급증하고 있는 의약 품과 농약을 포함하는 환경조절 물질에 접하는 기회가 많아짐에 따라 생체에 대한 이들의 유해
작용이 여러가지 문제를 야기하고 있으며 이 중 에서도 간장해 (liver injury) 의 발생빈도가 가장 높은 실정으로 많은 화학물질들이 약물성 간염 이나 지방간 또는 간경변을 유발한다고 보고 되 고 있다. 이러한 약물성 간장해나 바이러스 감
염 둥에 의한 간질환의 치료를 위해서는 안정과 고단백식의 식이요법이 필수적이며 해독제로서 간보 호약물의 사용도 중요하다. 그러므로 간보 호약물의 개발단계에서 약물작용을 사람이 아닌 동물 또는 기타 시험계를 이용하여 평가하는 방 법에 대하여 간략하게 소개한다.
2. 간 보호작용의 평가
약물의 간 보호작용을 평가하려면 우선 시험 계에 간 장해를 유발시키면서 이에 대한 예방효 과나 치료효과를 관찰하게 된다. 이러한 간질환 모델로서 간독성 물질(h e p a to to x ica n t) 을 투여하 여 실험적으로 재현성이 높은 간장해를 유발시 킨 실험동물을 중로 사용하고 있으며 (1〜3), 이 외에도 외과적으로 간 부분절제술을 시행한 동 물을 사용하거나(4) 실험동물로부터 분리한 간
조직 또는 간세포를시험계로사용하고 있다(5).
아래에 간 장해를 유발하는데 빈용하는 몇가지
h e p ato -to xican t에 대해 시험원리를 예시하였다.
人I•염화탄소(C C 14) — C C 14는 h e p a to to x ic a n t중에 서 간장해 유발기전이 가장 잘 알려져 있으며
따라서 많이 사용되는 물질이다. C C 14는 간세포
내에서 대사되어 C C 13 fre e ra d ic a l을 생성하며 바로 이 re a c tiv e m etabolite가 인접한 효소와 지 질 등에 결합하므로서 간의 고유기능을 저해한 다. 즉 rib osom al p ro tein에 아미노산의 유입이 감소되어 간세포의 단백질합성능력에 장해가 생 기며 중성지방의 혈중유출이 저해되어 간세포내 지방축적이 야기되고 궁극적으로 간세포의 괴사 를 초래한다. 간세포가 괴사하면 세포내에 고농 도로 존재하는 효소인 alan in e am in o tran sferase ( A L T ) , asp artate am in o tran sferase ( A S T ) 또는 la cta te d eh yd ro gen ase ( L D H ) 등이 방출되어혈 청중 함량이 상승하게 된다. 따라서 이들의 혈 중함량 상승이나 간조직중 지방죽적 등에 미치 는 약물의 영향을 측정하므로서 간장보호 작용
의 정도를 평가할 수 있는데，C C 14에 의한 급성
간장해모델은 주로 간장해 예방효과를 판단하는 데 이용하고 있으며 만성간장해모델은 간장해치 료효과를 판단하는데 선호된다. 또한 C C 14를rat
에 10주 이상 투여하면 간경변이 유발되므로 간 경변예방과 치료약물개발에 유용한 모델이기도 하다.
D GalactosamineᅳD -G a la c to sa m in e은 g a la ctose 대사경로에 들어가 U D P -g lu c o s e를 급격히 감소시키므로서 간세포의 핵산, 단백질 및 지질 대사기능에 장해를 일으키며 직접 간세포막에 도 장해를 유발한다고 보고되었다. 간독성 발현 증상은 사람의 바이러스성 간염의 경우와 유사 하다고 알려졌으며 주로 비경구적 경로인 북강 내，정맥내 또는 피하경로로 투여하여 질환모델 을 만든다.
간보호약물의 작용은 C C 14에의한 간장해의 경
우와 마찬가지로 주로혈청 중 am in otran sferase
함량상승에 대한억제작용을측정하여 평가한다. 실험동물로 m ouse는 저항성이 있어서 고용량에 서만 간장해가 유발되기 때문에 보다 예민한 반
웅을 보이는 rat를 많이 사용한다.
EthionineᅳE th io n in e은m ethion ine의 대사를 저해하므로서 간장해를일으킨다. 즉m ethionine 대신에 S - e t h io n y l adenine을 생성하므로서 간세 포의 단백질 합성능력을 저해하며 이에 수반
하여 효소류와 lipoprotein의 합성이 저하한다.
E th io n in e은지방간의 질환모델로서 혈청중a m i
n o tran sferase 활성의 상승정도는 낮고 간조직중
총지질함량，중성지방량 및 총콜레스테롤 감량 이 증가하며 혈청중 지질함량은 감소한다. 또한
실험동물종에 따라 ethion ine 투여에 의한 지방
간의 발중이후에 간암으로 이행하는 예도 보고 되어 있다. 이 질환모델을 사용하여 간보호작용 을 관찰할 때에는 간조직중의 지방질함량을 즉 정하며 또한 병리조직학적으로 간세포중 지방축 적을 관찰하여 평가한다.
Alcohol—인체에서 alco h이의 만성적 섭취는
지방간을 유발하는 가장 큰 원인이 되고 있으나
정상사료를 섭취하는 동물에 alco h o l을투여하여
지방간을 일으키는 것은 용이하지 않다. 그러나
단백질함량이 아주낮은사료로사육하며 alcohol
을 고용량 투여하면 肝 내중성지방이 증가하여 지방간이 생기는데 개체차이가 심하므로 바람직
한 모델은 되지 못하다. 한편 alco h o l과 C C 14를
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병용투여하면 단시일내에 지방간모델ᅵ의 작성이 용이하며 5주 이상 병용투여하면 간경변이 유발
되기 때문에 CC14 단독투여시보다는 상대적으로
짧은 기간에 실험을 수행할 수 있으므로 간경변 모델로 자주 사용되고 있다.
참 고 문 헌
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항혈전작용과 생 약성분
한 용 남
서울대학교생약연구소
이 심포지움에서는 최근에 알려지고 있는 생 체에서 유래하는 몇가지 항혈전 작용을 갖는 단 백질과 아울러, 연자 등이 생약으로부터 단리한 몇가지 항혈전성 성분만을 소개하자 하며, 이미 잘 알려진 항응고제，항혈전성 약물, 혈전용 해
물질 등에 관해서는 문헌 1 ~ 5와 이들 문헌에
인용된 보문들을 참고하기 바란다.
1. 혈액응고 제X I I인자의
표면활성〜 저해물질
1-1. 혈 전5>
지혈에는 4가지 상이 있으며 제 1 상은 상처난 혈관을 수축하여 상처부위의 혈류를 감소시키는 단계이다. 제 2 상은 손상부위에 노출된 collagen 이 혈소판의 결합부위로 작용하여 혈소판의 내 부구조가 붕괴하여 혈소판으로부터 thromboxane
및 A D P가 유리된다. 이물질들은 다른 혈소판
으로 하여금 콜라겐에 결합된 혈소판에 점착하 도록 하여 느슨한, 일시적인혈소판 덮개즉, 백 색 혈전을 형성하도록 한다. 제 3 상은 적색 혈 전을 형성하는 단계이며 , 제 4 상은 혈전을 부분 적으로 또는 완전히 용해하는 단계이다.
혈전에는 3가지 유형이 있다. 백색 혈전은 혈 소판과 피브린으로 구성되며，비교적 적혈구 함 량이 적으며，특히 동맥에서 형성된다. 두번째 유형의 혈전은 모세관에 퍼져있는 피브린 침전
물이다. 세번째 유형은 적색 혈전으로 적혈구와 피브린으로 구성되며 형태적으로 시험관내에서 생성되는 혈병과 비슷하다. 적색 혈전은 정맥에 서 주로 생기며 또한 생체내에서 지체된 혈류가 있는 부위에서도 생길 수 있다.
조직손상에 의해 생기는 혈전의 개시반응은 혈액응고 외인계 (extrinsic system of clotting) 에
의해 수행된다(Fig. 1). 적색혈전의 개시반응은
INTRINSIC SYSTEM
HMW-K
E X T R IN S IC SYSTEM
Fibrinogen F i b r i ns o lu b le
I no
F ib r in — insoluble
Fig. 1—Intrinsic and extrinsic systems of flood coa
gulation. HMW-K, H M W kininogen; Pre-K, prekallikrein; Ka, kallikrein; PL, phosph
olipid from platelet.
