• 검색 결과가 없습니다.

Malignant melanoma in a grey pony, Korea

N/A
N/A
Protected

Academic year: 2021

Share "Malignant melanoma in a grey pony, Korea"

Copied!
6
0
0

로드 중.... (전체 텍스트 보기)

전체 글

(1)

ISSN 1225-6552, eISSN 2287-7630 http://dx.doi.org/10.7853/kjvs.2016.39.3.199

< Case Report >

Veterinary Service

Available online at http://kjves.org

*Corresponding author: Hyunkyoung Lee, Tel. +82-54-912-0462, Fax. +82-54-912-0465, E-mail. ieustina@korea.kr

회색 조랑말에서 발생한 악성 흑색종 증례

김지현ㆍ이현경 * ㆍ이경현ㆍ백강현ㆍ최은진ㆍ소병재ㆍ양시연

농림축산검역본부 질병진단과

Malignant melanoma in a grey pony, Korea

Ji-Hyeon Kim, Hyunkyoung Lee*, Kyunghyun Lee, Kanghyun Baek, Eunjin Choi, ByungJae So, Siyeon Yang

Animal Disease Diagnostic Division, Animal and Plant Quarantine Agency, Gimcheon 39660, Korea (Received 8 July 2016; revised 13 September 2016; accepted 20 September 2016)

Abstract

A 16 year-old female grey pony was presented to Animal and Plant Quarantine agency for diagnosis in Feb 2, 2015. At necropsy, multiple pigmented masses, likely melanomas, were detected peri-anally and under the tail. Further metastatic spread to the spleen, liver, lung and lymph nodes was also identi- fied. Histopathologically, anaplastic and pleomorphic melanocytes were observed in the mass. By im- munohistochemistry, PNL2, S100 and PGP 9.5 protein were detected, but Melan A was not expressed in the neoplastic melanocytes. Based on the pathological and immunohistochemical examination, we di- agnosed this case as malignant melanoma in a grey pony. To the authors’ knowledge, this is the first report of equine malignant melanoma in republic of Korea.

Key words : Grey horse, Malignant melanoma, Metastasis

서 론

멜라닌세포(melanocytes)는 피부의 표피 기저층에 위치하여 멜라닌(melanin)이라는 색소를 생성하는 세 포이다(Ryuji 등, 2014). 멜라닌세포의 종양은 개, 고 양이, 말을 포함한 가축 동물뿐 아니라 야생동물과 해양동물에서도 나타난다(Sweet 등, 2012). 악성 흑색 종(malignant melanoma)은 멜라닌 세포의 악성 변화로 생긴 종양을 말하며(Lucy 등, 2013), 개에서 가장 흔 한 종양이라고 알려져 있는 질환이다(Donald, 2002).

말의 흑색종은 종양이 발달하는 양상에 따라 세 그 룹으로 분류된다. 전이되지 않고 몇 년간 서서히 진 행되는 양성 흑색종, 이전의 양성 흑색종이 변형되어 생긴 악성 흑색종, 처음부터 악성 흑색종인 경우로 나뉜다(Scott, 1988). 멜라닌 세포의 종양은 말 피부

종양의 18.7% 정도를 차지한다고 알려져 있다(Scott, 1988). 양성 흑색종은 보통 8∼10년생 회색 말(Grey horse)에서 흔히 보이는 질환이며, 다른 색의 말에서는 흔하지 않은 질환이다(Pilsworth과 Knottenbelt, 2006).

회색 말에서 멜라닌 대사에 결함이 있거나, 노화에

따라 털이 회색으로 변하면서 세포 내 멜라닌 색소의

침착이 유도된다. 멜라닌 색소의 과도한 침착은 새로

운 멜라닌모세포(melanoblast)의 형성을 자극하거나

멜라닌모세포의 활성화 증가로 멜라닌세포의 과증식

또는 종양화를 유도한다(Patterson-Kane 등, 2001). 말

에서 멜라닌 세포 종양은 대부분 회음부와 꼬리 아래

부위에서 주로 발견되며, 림프절, 간, 비장, 폐, 혈관,

입술, 눈꺼풀, 침샘 등으로 전이되기도 한다(Mac-

Gillivary 등, 2002). 말에서의 악성 흑색종 사례는 국

내에서 보고된 바 없으며, 국외에서 보고된 사례 중

에서도 흑색종이 전이되는 경우는 드물게 보고되었

다.

(2)

Fig. 1. Gross findings. A grey pony (A) has the multiple pigmented masses around the anus and under the tail (B), in the liver (C) and lymph nodes (D).

흑색종에서 보이는 멜라닌 종양세포의 모양은 상 피양 세포에서 방추형 세포까지 모양이 매우 다양하 게 나타날 수 있고, 색소 침착이 불균질하게 되어 있 거나 종종 색소가 없는 형태로 나타날 수 있기 때문 에 진단이 어려울 수 있다(Sheffield 등, 2002). 이 경 우, 종양세포의 항원 특징을 면역조직화학염색을 통 해 확인하면 진단이 보다 쉽고 정확하다. 흑색종을 진단하는데 유용하게 쓰이는 마커로는 S100, human melanoma black-45 (HMB-45), protein gene product 9.5 (PGP9.5), tyrosinase, PNL2, Melan A 등이 잘 알려져 있다(Busam 등, 2004; Ramos-Vara 등, 2002).

본 증례는 국내에서 보고된 바 없는 회색 조랑말의 악성 흑색종 사례에 대한 육안 및 조직 병리학적 특 징을 보고하고자 한다.

증 례

경북 상주국제승마장에서 사육되던 16세, 암말 회

색 조랑말이 2015년 2월에 농림축산검역본부에 부검

의뢰 되었다(Fig. 1A). 조랑말은 부검의뢰 되기 5년

전에 항문 주변에 종괴가 처음 관찰되었으며 2015년

초부터 병변 및 건강상태가 악화되어 부검의뢰 되었

다. 안락사 후 부검을 실시하여 육안으로 관찰했을

때, 항문 주변 및 꼬리 아래에 출혈을 동반한 종괴가

관찰되었으며, 비장, 간, 폐, 림프절 등 몸 전체에 걸

쳐 다양한 크기의 종괴가 관찰되었다. 종괴는 흑색

또는 진녹색을 띄며 경도는 중등도로 단단하였다. 항

문 주변 피부에는 포도송이 양상으로 종괴가 형성되

어 있는 부위도 관찰되었다(Fig. 1B). 절단하여 관찰

해 보았을 때, 항문 주변 피부, 근육에 걸쳐 흑색의

종괴가 분포되어 있었으며 엉치뼈에도 침습하는 양

(3)

Fig. 2. Histopathological findings. Histopathological characterization of the masses around the anus (A, B), under the tail (C) and in the lung (D).

In the mass around the anus, clusters of epithelioid cells are surrounded by interstitial, fine, fibrovascular stroma and melanophaes. Neoplastic em- boli are observed in the vessels around the anus. The neoplastic cells in the mass under the tail and in the lung show similar appearance with them in the mass around the anus. Insert: High magnification of the neoplastic cells. The cells are polygonal of fusiform in shape and contain much or little intracytoplasmic melanin. Melanophages (solid circle) are found among the tumor cells. Hematoxylin and eosin (H&E) stain.

상을 보였다. 꼬리의 경우에는 전반에 걸쳐 피부, 근 육, 연부조직, 척추, 척수에 걸쳐 흑색의 종괴가 분포 된 양상을 보였다. 비장(76×45×18 cm, 20 kg)은 6배 정도 종대되어 있었고, 융기된 다양한 종괴가 다발소 성으로 분포하였다(Fig. 1C). 간(50×46×11 cm)은 전반 적으로 진남색을 띄며, 0.5∼1 cm 크기의 흑색 반점 이 산재되어 있었다. 폐에도 미만성으로 2∼5 mm 크 기의 흑색 반점이 관찰되었고, 몸 전체에 걸쳐 림프 절이 흑색을 띄며 종대되어 있었다(Fig. 1D).

병리조직학적 검사를 위하여 장기와 병변 부위를 채취하여 10% 중성완충포르말린에 고정하였다. 일반 적인 조직처리 과정을 거쳐 파라핀에 포매한 후, 4 m 두께로 조직절편을 제작하여 Hematoxylin & Eosin (H&E) 염색과 면역조직화학염색을 시행하였다.

면역조직화학염색은 Ventana 자동화 면역염색기 (Ventana Medical System, Tucson, AZ, USA)를 이용하 여 염색을 실시하였다. PGP9.5와 melan A는 Tris/

Borate/EDTA buffer (pH8.4)로 항원을 복원하였으며,

PGP9.5는 93

o

C에서 36분, melan A는 93

o

C에서 30분

반응시켰다. PNL2와 S100은 citrate buffer (pH6)로

93

o

C에서 96분 반응시켜 항원을 복원하였다. 1차 항

체는 37

o

C에서 40분 반응시켰으며, 사용한 1차 항체

는 mouse-anti PGP9.5 (1:1,000, Biocare medical, San

Diego, CA, USA), mouse-anti PNL2 (1:50, Santa Cruz

Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA), Rabbit anti-S100

(1:100, Dako, Glostrup, Denmark) 및 mouse anti-Melan

A (1:50, Dako, Glostrup, Denmark)였다. 1차 항체 반

응 후, ABC (Avidin Biotin Complex) 방법을 이용하여

(4)

Fig. 3. Immunohistochemistry results. Comparison of immunoreactivity with melanocytic markers in the mass around the anus. (A) PGP9.5. (B) S100. (C) PNL2. (D) Melan A. Both PGP9.5 and S100 are expressed in melanocytic tumor cells (diffuse nuclear and cytoplasmic labeling). PNL2 is expressed in the cytoplasm of the melanocytic tumor cells. There is no labeling for Melan A (brown color is melanin pigment present in melanocytes and melanophages). Alkaline phosphatase red detection, hematoxylin counterstain.

RedMap detection Kit (Ventana Medical Systems, Tucson, AZ, USA)로 발색하였다.

항문 주위와 꼬리 아래 조직의 얕은 진피층에서 근 육층에 걸쳐 다양한 크기의 결절성 종양세포의 증식 이 관찰되었다. 결절 내 종양세포는 다각형 또는 방 추형 모양으로 갈색과립을 함유하고 있으며 얼기설 기 얽혀 있거나 소용돌이 배열을 보이며 증식하는 양 상을 보였고, 결절 사이에는 섬유혈관조직이 관찰되 었으며 갈색 과립을 함유한 대식구 침윤도 동반되었 다(Fig. 2A, C). 꼬리 아래 종괴 혈관 내에는 종양세포 덩어리도 관찰되었다(Fig. 2B). 폐, 간과 비장에서도 항문 주위 및 꼬리 아래 조직과 동일한 조직병리학적 특징을 가진 다양한 크기의 종양성 결절이 관찰되었 다(Fig. 2D). 면역조직화학염색에서 종양세포가 PGP9.5, S100, PNL2에는 각각 양성 반응을 보였지만, Melan

A에는 음성 반응을 보였다. 반응성은 PGP9.5>S10 0>PNL2 순으로 강한 것으로 관찰되었으며, PGP9.5 와 S100은 핵과 세포질에서 발현되었으나 PNL2는 세 포질에서만 발현되었다(Fig. 3A∼D). 이와 같은 조직 병리학적 및 면역조직화학적 검사 결과를 바탕으로 이 사례는 악성 흑색종으로 진단되었다.

고 찰

많은 연구에서 나이든 회색 말의 80% 정도가 피부

의 흑색종을 앓고 있다고 보고되었다(McFadyean,

1988; Scott, 1988). 멜라닌의 양성 종양은 전이될 수

있으며 시간이 지남에 따라 악성이 될 수도 있다

(Johnson 등, 1988; Valentine 등, 1995). 하지만 흑색종

(5)

이 전이되는 경우는 드물다(MacGillivray 등, 2002). 실 제로 한 미국의 연구사례에서 장기간(1990∼2001년) 의뢰된 64,000마리의 말을 부검한 결과, 101마리에서 피부 흑색종 소견이 관찰되었으며, 이 중 전이된 흑색 종의 사례는 대략 14% 뿐이었다(MacGillivray 등, 2002).

대부분 처음에 발병되는 흑색종은 꼬리 부근, 회음부, 귀밑샘 등에서 관찰된다(Johnson, 1988; Valentine 등, 1995). 전이는 우선적으로 림프절과 폐에서 일어나며, 다음으로 간, 비장, 심장, 혈관으로 일어난다(Johnson, 1988; Pulley 등, 1990). 본 연구에서 확인된 말에서도 악성 흑색종은 항문 주위 및 꼬리 피부에서 다른 기 관으로 전이된 것으로 관찰되었다.

최근 연구에서는 임상적으로 말에서 관찰되는 흑 색종을 4가지 형태(melnocytic nevi, dermal melanoma, dermal melanomatosis, anaplastic malignant)로 분류하 였다(Valentine, 1995). Melanocytic nevi는 대게 양성이 며 어린 연령의 말(평균 5세)에서 주로 나타난다. 보 통 작은 크기(2.5 cm 이하)의 종양 형태로 나타나며, 몸의 어느 부위에서나 발병할 수 있다(Valentine, 1995;

Seltenhammer 등, 2004). Dermal melanoma는 주로 양 성이며, 시간이 지나면서 악성으로 발달하기도 한다.

나이든 회색 말에서 꼬리 또는 외부 생식기 부근에서 크기가 다양하게 관찰되며, 종양이 하나씩 별개로 형 성되거나 뭉쳐서 형성되기도 한다(Valentine, 1995;

Seltenhammer 등, 2004). Dermal melanomatosis는 다른 기관으로의 전이율이 높으며, 15세 연령 이상의 말에 서 주로 관찰된다. 또한 Dermal melanoma와 비슷하게 꼬리 아래나 생식기관 부근에서 일어나며, 조직학적 으로 두 유형의 구분이 어렵다고 알려져 있다(Valentine, 1995; Rowe 등, 2004). 마지막으로 anaplastic melano- ma는 드물게 발생하지만 종양이 악성이며 종종 전이 되는 유형이다. 20세 연령이상의 말에서 주로 나타나 며, non-grey horse에서 보고된 사례가 있다(Valentine, 1995). 위의 4가지 분류형태에 따르면, 본 증례에서 관찰된 흑색종은 dermal melanoma 또는 dermal mela- nocytosis로 추정된다.

멜라닌 세포의 종양은 말 유육종(sarcoid), 편평상피 암종(squamous cell carcinoma), 미분화암종(undifferentiated carcinoma)과 구분이 어려운 것으로 알려져 있다(Busam 과 Jungbluth, 1999). 면역조직화학염색은 흑색종을 진 단하는데 주로 사용하는데, 그 이유는 흑색종을 진단 하는 마커가 다양한 민감도와 특이성을 가지기 때문 이다(Modiano 등, 1999; Ramos-Vara 등, 2000). 흑색종 의 진단을 위해 사용되는 마커로는 S100, PGP9.5, ty-

rosinase, PNL2, Melan A 등이 잘 알려져 있다 (Sheffield 등, 2002). 본 증례에서는 이들 마커를 통해 흑색종을 정확히 진단하고자 하였다.

S100 단백질은 말의 멜라닌 세포의 종양에서 지속 적으로 발현되는 마커이다. 하지만 신경초세포, 근상 피세포, 지방세포, 백혈구 등의 비종양 세포에서도 S100 단백질을 포함하고 있기 때문에 흑색종으로 진 단하기에는 무리가 있다(Ohsie 등, 2008; Ramos-Vara 등, 2000). PGP9.5는 뉴런이나 신경내분비세포에서 잘 발현되며, 말과 사람의 흑색종 진단에 유용하게 쓰인다(Ramos-Vara과 Miller, 2007). PNL2는 사람, 개 등 다양한 실험동물에서 인식되는 멜라닌 세포 특이 항원이며, 말에서는 다른 종양보다 흑색종에 가장 특 이적으로 반응하는 항체로 잘 알려져 있다(Ramos- Vara 등, 2014). 또한 세포질과 원형질막에서 멜라닌 세포를 감지할 때 주로 사용되며, 흑색종과 육종 종 양세포를 구분할 때 주로 쓰인다(Busam 등, 2005;

Kurotaki 등, 2008a). PNL2는 S-100과 PGP9.5항체보다 말의 멜라닌 세포 종양에 가장 민감하게 반응하는 항 체이다(Ramos-Vara 등, 2014). Melan A는 세포 독성 T세포에 의해 인식되는 세포질 내 단백질이다. 주로 성숙한 멜라닌 세포에서 발현되며, 개에서 민감도가 높다. Melan A는 앞서 언급한 PNL2, S-100, PGP9.5 항체와 다르게 말의 흑색종에서는 잘 반응하지 않는 다고 알려져 있다(Ohsie 등, 2008; Kurotaki 등, 2008b).

위에서 언급한 흑색종의 특이항원을 이용하여 본 증 례의 항문 주위, 폐, 간, 비장의 종괴에서 면역조직화 학염색을 실시한 결과, PGP9.5, S100, PNL2는 양성반 응을 보였으나 Melan A는 음성반응을 나타내어 앞서 보고된 결과와 일치함을 알 수 있었다.

결 론

본 증례는 회색 말에서 발생된 종양으로 육안 및

조직 병리학적 검사, 면역조직화학적 검사 결과를 바

탕으로 항문 주위 및 꼬리 피부의 흑색종이 내장기관

(비장, 간, 폐 등)에 전이된 악성 흑색종으로 진단되

었다. 피부 흑색종에 걸린 말은 눈에 보이지 않는 전

이로 이른 시기에 치료하지 않으면 죽거나 안락사 되

기도 한다. 따라서 발병 초기에 피부에 발생한 양성

흑색종을 생검 조직검사를 통해 발견하여 제거수술

을 실시하여 다른 장기로의 전이를 막는 것이 중요하

다.

(6)

감사의 글

본 증례보고는 농림축산검역본부 농림축산검역검 사기술개발 시험연구비(B-1543069-2015-15-16-01)의 지 원을 받아 수행되었습니다.

REFERENCES

Busam KJ. 2004. The use and application of special techniques in assessing melanocytic tumors. Pathology 36(5): 462- 469.

Busam KJ, Jungbluth AA. 1999. Melan-A, a new melanocytic differentiation marker. Adv Anat Patho l6: 12-18.

Busam KJ, Kucukgol D, Sato E, Frosina D, Teruya-Feldstein J, Jungbluth AA. 2005. Immunohistochemical analysis of novel monoclonal antibody PNL2 and comparison with other melanocyte differentiation markers. Am J Surg Pathol 29(3): 400-406.

Donald J. 2002. Tumor of the skin and soft tissues. pp. 46-51, 81-82. In: Goldschmidt MH, Hendrick MJ(ed). Tumors in domestic animals. 4th ed. Iowa State Press, Ames, lowa.

Johnson PJ. 1998. Dermatologic tumors (excluding sarcoids). Vet Clin North Am Equine Pract 14: 643-658.

Kurotaki T, Tomonari Y, Kanno T, Wako Y, Tsuchitani M.

2008a. A novel immunohistochemical marker of normal and neoplastic melanocytes in formalin-fixed, paraffin- embedded tissues of albino rats. Vet Pathol 45(3): 383- 387.

Kurotaki T, Tomonari Y, Kanno T, Wako Y, Tsuchitani M.

2008b. Malignant amelanotic melanoma behind the left eye in a female Crj:CD(SD)IGS rat: a case report. Vet Pathol 45(4): 681-684.

MacGillivray KC, Sweeney RW, Del Piero F. 2002. Metastatic Melanoma in Horses. J Vet Intern Med 16: 452-456.

McFadyean J. 1988. Equine melanomatosis. J Comp Pathol 46:

186-204.

Modiano JF, Ritt MG, Wojcieszyn J. 1999. The molecular basis of canine melnoma; pathogenesis and trends in diag-

nostic and therapy. J Vet Intern Med 13: 163-174.

Ohsie SJ, Sarantopoulus GP, Cochran AJ, Binder SW. 2008.

Immunohistochemical characteristics of melanoma. J Cutan Pathol 35(5): 433-444.

Patterson-Kane JC, Sanchez LC, Uhl EW, Edens LM. 2001.

Disseminated metastatic intramedullary melanoma in an aged grey horse. J Comp Path 125: 204-207.

Pilsworth RC, Knottenbelt D. 2006. Skin diseases refresher: mela- noma. Equine Vet Educ 18: 228-230.

Ramos-Vara JA, Beissenherz ME, Miller MA, Johnson GC, Pace LW, Fard A, Kotteler SJ. 2008. Retrospective study of 338 canine oral melanomas with clinical, histologic, and immunohistochemical review of 129 cases. Vet Pathol 37(6): 597-608.

Ramos-Vara JA, Frank CB, DuSold D, Miller MA. 2014. Immu- nohistochemical Expression of Melanocytic Antigen PNL2, Melan A, S100, and PGP9.5 in Equine Melanocytic Neoplasms. Vet Pathol 51(1): 161-166.

Ramos-Vara JA, Miller MA. 2007. Immunohistochemical detec- tion of protein gene product 9.5 (PGP 9.5) in canine epi- thelitropic T-cell lymphoma (micosis fungoides). Vet Pathol 44(1): 74-79.

Ramos-Vara JA, Miller MA, Johnson GC, Turnquist SE, Kreeger JM, Watson GL. 2002. Melan A and S100 protein im- munohistochemistry in feline melanomas: 48 cases. Vet Pathol 39(1): 127-132.

Ryuji U, Ishikawa S, Tomoda H. 2014. Inhibition of tyrosinase activity and melanine pigmentation by 2-hydroxytyrosol.

Acta Pharm Sin B 4(2): 141-145.

Scott DW. 1988. pp. 448-450. Large Animal Dermatology. 2nd ed. W.B Saunders Company. Philadelphia.

Sheffield MV, Yee H, Dorvault CC, Weilbaecher KN, Eltoum IA, Siegal GP, Fisher DE, Chhieng DC. 2002. Comparison of five antibodies as markers in the diagnosis of melano- ma in cytologic preparations. Am J Clin Pathol 118(6):

930-936.

Sweet M, Kirkham N, Bendall M, Currey L, Bythell J, Heupel M. 2012. Evidence of Melanoma in Wild Marine Fish Populations. PLoS ONE 7(8): e41989.

Valentine BA. 1995. Equine melanotic tumors: a retrospective study of 53 horses. J Vet Intern Med 9: 291-297.

참조

관련 문서

What is the number of square units in the area of a triangle whose sides measure 5, 5 and

 As a affiliated company of Green Cross in the field of genome analysis, we provide disease diagnosis services, such as prenatal genetic test, oncogenomic analysis and

and an improvement set of extragradient-type iteration methods in [5], we in- troduce new iteration algorithms for finding a common of the solution set of an equilibrium problem

 간호업무에 대한 규정과 지침이 제정되면 각 의료기관에서의 위험도 관리가 보다 더 원활하게 운영될 수 있으므로 의료서비스 제공 중에 발생하는 위험 상황을 사전에

&lt;Figure 5-6&gt; Transport in an asymmetric Membrane as a result of various mechanisms.. • transport through a

This book contains hundreds of complete, working examples illustrating many common Java programming tasks using the core, enterprise, and foun- dation classes APIs.. Java Examples

Pituitary tumor transforming gene (PTTG) expression in pituitary adenomas.. Pathophysiology of

In a recent study ([9]), Jung and Kim have studied the problem of scalar curvature functions on Lorentzian warped product manifolds and obtaind par- tial results about the