An Experience of Quality Control in a Clinical Bacteriological Laboratory

임상병리검사과학회지

:

1998.

세균배지의 청도관려에 관한 검토

경북대학교병원 엄상병리과

·

An Experience of Quality Control in a Clinical Bacteriological Laboratory

Kim , Kyung sook. , Cho , Kyu Hyeon. , SUng , Hee Lag. , Lee , Seok Gu. , Lee , Hae Sook .•

Lee , Gun Sup

Dept. 01 Clinical Patholo 6Y,

National University Hospital De pt. 01 Clinical

Taegu Hea 1t h College ,

Korea*

To estirnate the accuracy,

and

of the

of

we evaluated the prlonnance

sterility test for the

and

from May

Ikember 1917.

The results were;

1. By the sterility test for media , no contaminated organisms were

2. By the performance test of the enrichment media , selective differential me- dia , biochemical meida and identification reagents for the positive and ne- gative control organisms , the acceptable data were yielded.

3. It should be boiled for 60 minutes that the best effective result of MacConkey agar , xylose lysine desoxycholate(XLD) agar and salmone lI a- shigella(S-S) agar can be obtained and for the growth on the media

colony count must be more than 3 x 10

mL.

4. The MacConkey agar showed the best growth of the three selective medium and XLD agar showed better detection for salmonella than S-S agar.

5. It showed that UV -light and dry media make the bacterial growth to be inhibited.

For the best isolation and identification of the bacteria from the samples , we

should always perform the quality control adivites in dinical bacteriological

laboratory .

1. 서 론

검사실에서의 정도관리란 검사결과의 분석 전 후의 모든 과정에 관여하는 인력， 장비， 환경 등 의 오류의 원인을 조기 감지 예방하며 오류가 검 사결과에 미치는 영향을 최소화하여 신뢰성 있는 검사결과를 만들고자 하는 모든 노력이라고 정의 할수있다.

미생물검사실도 다른 검사실과 마찬가지로 정 도관리가 필요하며 특히 업무의 특성상 기계로 검사하는 검사실과는 달리 주로 검사자의 판단 에 의한 수작업에 의존하여 검사가 이루어지고，

또한 검사실 자체에서 여러 종류의 배지를 포함 한 시약을 만들고 있는 실정에 있다.

감염의 원인을 규명하는 방법의 하나로서 미생 물배양검사는 세균의 분리와 동정에 사용되는 배 지로서 검체내에 있는 목표로 하는 세균올 키워 야 하고， 또한 나타난 그 반응으로써 성상을 결 정하여 미생물을 동정하고 있어 임상미생물검 사실에서 수행되는 검사업무의 우수성은 그 검사 실에서 사용하고 있는 배지 자체의 품질에 직접 관련되어 있다고 할 수 있다. 그러므로 배지의 정도관리는 목표로 하는 미생물이 배지 상에서 증식 되느냐 여부와 그 미생물이 나타내는 물리，

화학적 성상을 확인하는 배지의 작업능력(않fo­

nnance}과 배지 조제상의 오류를 평가하는 작업 이라고 할수 있다.

저자들은 임상미생물검사 결과의 신뢰도를 높 일 목적의 일환으로 현재 임상미생물검사실에서 제조하여 사용하고 있는 증균배지와 감별겸 선택 및 동정용(확인，감별) 생화학 배지의 멸균시험과 작업능력을 1æ7년 5월 부터 12월까지 조사하여 얻은 결과를 보고하는 바이다.

11. 재료및방법

1.

증균배지로 다noglycollate

broth(BB L,

brain-heart infusion broth(Blll, Di fco

aga r( BB L,

eosin rrethylene blue agar

BB L,

xylose lysine desoxycholate agar CXLD, BB L,

(LJ,

{X) tato coI11Iæal tween 00

Simrmn ’ s citrate (BB L,

sugar iron

BBL,

,

omith뾰 æcarooxyl뿔(Difco

Lab.,

,

agar (BB L,

bile esculin

Lab.,

urea broth{BBL,

lysine decarbox- ylase (Di fco Lab.,

se(Showa,

ind이.e

test

Lab.,

그람 염색시약(Muto， 일본) 과 항산균 염색시 약(Muto， 일본)， cata1ase검사에 이용되는

3%

@

disk(BBL,

optochin disk(BBL,

oxidase

g .enn

배지성능을 검사하기 위하여 사용한 균주로는 임상가겸물에서 분리하여 vi뼈‘ 시스템(bioM꾀많x，

미국)에 으로 동정된

E coli , Proteus mirabilis ,

Pnα따s v.띠g따s， salηrnella lJlJ벼.， 당7terdxx:ter c/，αzcae，

Kl ebsiella pneumoniae , Serratia ^m:JrL escens , Acinet OOact er baunrIrv1i i , Pse udormrrJs

aeru양no있:， EnterocooαJS

faecalis , Staphyloco- ccus

cægulase

cus , group A

mitis , viridans

pn-

Mycobacter Íl. un

Candida a1 bimns

As pergillus

으며 ， M)α故terit.un tubenαllosis

(35-26

Table 1. Perfonnance of enrichrrent

lV1t영la S없in 않sted

No.of

Result stams

1bi oglycollate broth

A

10 Growth Brain-heart infusion broth Candicb a1 bi 01l1S

5 Growth

with cycloheximide As pergillus

No growth

Blcx성

agar

Group A

40 ^Growth, B-hermlysis

StreptαXXXlJS

mitis Growth, a -hermlysis Chocolate agar

P1e1.1l1'U1iae

10 Growth

Streptαxxcus

Growth

Table 2.

of

M혀ia

Strains tested No. of test

Result s t:r ams

MaCC짜lkeyagar

Eroli Growth. rose

Proteus mirabilis 15 Growth, colorless

과1tercoccus faeD띠is

No growth Eo sin ræthylene

agar E roli

5 Growth. black with Proteus

Growth, colorless

Xylose lysine ^Salmmella

5

black

desoxycholate agar E roli No growth or yellow

Loewens떠n-Jensen m벼ilUl1 Myαkχterium

tuber ru10s is 10 Growth Potato

tween Candida

10 Growth 00 agar with cycloheximide As pergillus

No Gro wth

서 4주)，

C a1 bimns

tlúolglycollate

35- :E oC , 18 -

2.

준량

(l\fac Farland

tube No.

증균배지， 감별선택배지 및 생화학 동정용(확인 및 감별)배지 중 자가제조를 하였던 것들은 배지 멸균시험은 새로 만든 배지는 약 5%를 대표적 를 물에 녹일 때 배지성분의 변질을 염려하여 중 으로 표출하여

35- :E

35-36 oC

121 "C

XLD

Table 3.

average colony nurrters of

lysine <ÈSo xycholate Mar and

Mar by boiling tiræ

E coli Sal monella t1'p hÍ

MacCo nkey XLD ss

XLD ss

C FlJ

30 00 120 30 00 1 3:> 30 00 1 3:> 30 00 120 30 00 1 3:> 30 00 1 3:>

(min)

3x lO

0.5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0.5 0 0 0

3x10

2 3 0 0 0 0 0 0 0 2 3 2 0.5 0.5 1 0

3x1앤

6 6 6 0 0 0 0 0 0 7 9 7 3 5 4 l 2 2

40 40 40 0 0 0 0 0 0 fi) 45 fi) 3:> ²⁾ 15 18 18 18

3x10

0 0 0 0 0 0

3x1 (f

0 0 0 0 0 0

* colony forming units/uL. inoculum.; **. Xylose Iysine desoxycholate agar; ***. Salmonella-Shigella agar

Table 4. Perlormanæ of

Ma:퍼a

Test organism Test no Re sult

Sirrnmn ’ scitrate Kl ebsiella pnwemoniae

20 ^Positive ,

E

Negative

Triple sugar iron agar Proteus mirabilis _Kl AG ,Ii2 S

E coli 20 NAG

Pseudornorns

K!K

Motility

E coli

m ^Positive

Kl ebsiella

α끼ithine

decarboxylase Ent erobacter

20 ^Positive , violet

Pnαeus

mirabilis ^Negative

DNase agar

10 ^Positive

때와따se ne聊fve s，짜까yl，αvccus

Negative Bile esculin agar

10

^black

1fT'αψ

A

Urea broth Proteus

20 ^Positive , red

E

Lysine decarboxylase Sal monella typhi

a ^{Positive , violet}

Proteus

Negative

Ar ginine dihydrolase Enterobacter

20 ^Positive , violet

Proteus

Nitrate

Pseudornorns

Acintetobacter baum::Inni i 10

E coli ^Positive

Inφ，le reac디on

E coli

20 ^Positive , red

Kl ebsiella

Table 5. Perlonnance of stains , biochemi ca1 reaction

disk tests.

Stain and

Test no Re sult

Gram stain

l/ wæk Dar k blue. violet

E coli Red

Ac id fast

Mycobacteriuym

lI wæk Red

E co/i Blue

Ca talase test

aureus l/ day Positive

GrOlψ

A

Negative

@쟁띠ase

test

lI day Ag glutination

G찍'glase

negative

No agglutination

않:teitracin 이sk 않st GrOlψ

A Streptococcus 10 >15mm

Gr ^OUP C Streptococcus Negative

Op tochin disk

pne t.ma7iae 10

Streptococcus mitis

oxi없se

test

10 Positive E coli

Genn tube test Candicb albicans

기멸균올 하지 않고 완전히 녹올 때까지 끓인 후 사용하였고 감별선택배지의 민감도를 확인하기 위하여는 대조균주를 l\1acFarlar닙’ s turbi벼Iretry 로 집락수를 조사하여

1. 0

0.45% N aC l

용액으로 10배수 연속회석하여 접종하였다.

111.

증균배지의 정도관리는 배지를 새로 만들거나， 구 입한 평판배지는 새로 들어올 때마다 시험하였는데 모두 만족할 만한 성적을 나타내었다:(Table

1)

감별 선택 배지의 수행능력은 배지에 붙어있 는 라벨의 요구와 일치하는 성적올 나타 내었다.

(Table 2)

감별선태배지의 중탕 시간에 의한 배지의 변성 과 민감도를 조사하기 위하여 실험을 7번 하였는 데，

Mac

agar , XID

Sa1rmnella-

Shigella배지에

E

Negative

ν'day

Positive

희석하여 접종한 결과는 다음과 같았다.<1닙:ble

3)

생화학 동정용배지의 수행능력은 배지에 붙어 있는 라벨의 요구와 일치하는 성적을 나타내었다

(Table 4).

그람 염색 및 항산균 염색시약 및 주요 동정용 시혐의 수행능력은

Table

IV. 요 약

저자들은 임상미생물검사 결과의 정확성， 신뢰 성 및 재현성올 높일 목적의 일환으로 현재 임 상미생물검사실에서 제조하여 사용하고 있는 배 지와 동정용 검사 시약의 작업능력과 멸균시험을 1937년 5월부터 12월까지 조사하여 아래와 같은 결론을 얻었다.

1.

2.

c.v. ^{Mosby Co.,} St.

(1982)

인)배지 및 동정용 시약의 양성 및 음성대조균주

15-16

에 대한 수행능력검사에서는 모두 예상되는 반웅

2. Dharan M Tota1 Quality Control in the

LavoratOIY C.V. Mosby Co., St.

3.

agar , XlD agar

S-S agar

4.

MacConkey

S-S

XlD

salrmnella

5.

철저한 정도관리를 통하여 배지와 시약의 수행 능력올 최고로 유지 하므로써 미생물의 분리와 정확한 균주의 동정이 가능할 수 있다고 결론지 올수 있었다.

참고문헌

1. Bauer JD : Clinical Laboratory Methods ,

Iρ버s (lgη) 때. 'ðl-없7

3. Finegold SM

7thed, C.V. Mosby Co., St.

pp.

23-27

4.

:

감염，

Vol. 13, No. 1 ,1 -15,

5.

SS Lynch's

Laboratory

Technol(핑y， 4단1 어.，

W.B.Saunders Co., Phi ladelphia (1ffi3) w. 349- 3fj)

6. Sinnenwirth AC, Jarett L Gradwohl ’ ^s

Clini떼 Lab야atory

Methcxls and

8th ed, C.V.Mosby Co., St.

(l9Ð) w.

1478-1 4ffi

7.

:

Vol. 8, No 2,

8.

:

p.

46-49