Genetic parameters of milk β-hydroxybutyrate acid, milk acetone, milk yield, and energy-corrected milk for Holstein dairy cattle in Korea

2017, 28

6)

1349–1360

국내 Holstein종에서 milk β-hydroxybutyrate acid, milk acetone, 에너지 보정유량 및 산유량의 유전모수 추정 ^†

ᄋ

ᅵ석현

¹

²

³

⁴

⁵

134국립 축산과학원 ·²전북대학교 동물생명공학과 · ⁵충남대학교 농업생명과학대학 ᄃ

ᅩ

ᆼ물자원과학부

ᄌ ᅥ

ᆸᄉ ᅮ 2017ᄂ ᅧ ᆫ 7ᄋ ᅯ ᆯ 8ᄋ ᅵ ᆯ, ᄉ ᅮᄌ ᅥ ᆼ 2017ᄂ ᅧ ᆫ 11ᄋ ᅯ ᆯ 2ᄋ ᅵ ᆯ, ᄀ ᅦᄌ ᅢ ᄒ ᅪ ᆨᄌ ᅥ ᆼ 2017ᄂ ᅧ ᆫ 11ᄋ ᅯ ᆯ 2ᄋ ᅵ ᆯ

요 약

ᄏ

ᅦᄐ ᅩᄉ ᅵᄉ ᅳ ᄌ ᅵ ᆯᄇ ᅧ ᆼᄋ ᅴ ᄌ ᅵᄑ ᅭ ᄒ ᅧ ᆼᄌ ᅵ ᆯᄋ ᅵ ᆫ milk β-hydroxybutyrate acid (BHBA), milk acetone, ᄀ ᅳᄅ ᅵᄀ ᅩ ᄉ ᅡ ᄅ

ᅭᄒ ᅭᄋ ᅲ ᆯ ᄋ ᅴ ᄌ ᅵᄑ ᅭᄒ ᅧ ᆼᄌ ᅵ ᆯ ᄋ ᅦᄂ ᅥᄌ ᅵᄇ ᅩᄌ ᅥ ᆼᄋ ᅲᄅ ᅣ ᆼ ᄆ ᅵ ᆾ ᄌ ᅥ ᆽᄉ ᅩᄋ ᅴ ᄌ ᅮᄋ ᅭ ᄀ ᅧ ᆼᄌ ᅦ ᄒ ᅧ ᆼᄌ ᅵ ᆯᄋ ᅵ ᆫ ᄉ ᅡ ᆫᄋ ᅲᄅ ᅣ ᆼᄋ ᅦ ᄃ ᅢᄒ ᅡ ᆫ ᄋ ᅲᄌ ᅥ ᆫᄅ ᅧ ᆨᄀ ᅪ ᄋ ᅵᄃ ᅳ ᆯ ᄀ ᅡ ᆫᄋ ᅴ ᄋ

ᅲᄌ ᅥ ᆫᄌ ᅥ ᆨ ᄀ ᅪ ᆫ ᄀ ᅨᄅ ᅳ ᆯ ᄐ ᅩ ᆼ ᄒ ᅡᄋ ᅧ ᄌ ᅥ ᆽᄉ ᅩᄋ ᅴ ᄏ ᅦᄐ ᅩᄉ ᅵᄉ ᅳ ᄌ ᅥᄒ ᅡ ᆼᄉ ᅥ ᆼ ᄌ ᅳ ᆼᄌ ᅵ ᆫ ᄀ ᅡᄂ ᅳ ᆼᄉ ᅥ ᆼᄋ ᅳ ᆯ ᄒ ᅪ ᆨ ᄋ ᅵ ᆫᄒ ᅡᄀ ᅵ ᄋ ᅱᄒ ᅡᄋ ᅧ ᄇ ᅩ ᆫ ᄋ ᅧ ᆫᄀ ᅮᄅ ᅳ ᆯ ᄉ ᅮᄒ ᅢ ᆼᄒ ᅡᄋ ᅧ ᆻ ᄃ

ᅡ. ᄀ ᅮ ᆨ ᄂ ᅢ ᄌ ᅥ ᆽᄉ ᅩ 14,397ᄃ ᅮᄋ ᅦᄉ ᅥ ᄉ ᅮᄌ ᅵ ᆸᄃ ᅬ ᆫ ᄉ ᅡ ᆫᄋ ᅲᄂ ᅳ ᆼᄅ ᅧ ᆨ ᄀ ᅥ ᆷᄌ ᅥ ᆼᄌ ᅡᄅ ᅭ 75,072ᄀ ᅥ ᆫᄋ ᅴ ᄀ ᅵᄅ ᅩ ᆨ ᄀ ᅪ ᄒ ᅧ ᆯᄐ ᅩ ᆼ ᄀ ᅵᄅ ᅩ ᆨ 44,954ᄃ ᅮᄋ ᅴ ᄀ ᅵ ᄅ

ᅩ

ᆨᄋ ᅳ ᆯ ᄃ ᅡᄒ ᅧ ᆼᄌ ᅵ ᆯ ᄋ ᅵ ᆷᄋ ᅴᄒ ᅬᄀ ᅱ ᄀ ᅥ ᆷᄌ ᅥ ᆼᄋ ᅵ ᆯ ᄉ ᅥ ᆫᄒ ᅧ ᆼ ᄆ ᅩᄒ ᅧ ᆼᄋ ᅳ ᆯ ᄋ ᅵᄋ ᅭ ᆼ ᄒ ᅡᄋ ᅧ ᄇ ᅮ ᆫᄉ ᅥ ᆨᄒ ᅡᄋ ᅧ ᆻᄃ ᅡ. ᄏ ᅦᄐ ᅩᄉ ᅵᄉ ᅳ ᄌ ᅵᄑ ᅭᄒ ᅧ ᆼᄌ ᅵ ᆯᄃ ᅳ ᆯ ᄋ ᅴ ᄋ ᅲᄌ ᅥ ᆫᄅ ᅧ ᆨᄋ ᅳ ᆫ ᄇ ᅥ ᆷ ᄋ

ᅱ 0.06 ∼ 0.15, ᄑ ᅧ ᆼᄀ ᅲ ᆫ 0.08 (± 0.03)ᄅ ᅩ ᄎ ᅮᄌ ᅥ ᆼᄃ ᅬᄋ ᅥ ᆻᄋ ᅳᄆ ᅧ, ᄏ ᅦᄐ ᅩᄉ ᅵᄉ ᅳ ᄌ ᅵᄑ ᅭᄒ ᅧ ᆼᄌ ᅵ ᆯᄃ ᅳ ᆯ ᄀ ᅡ ᆫᄋ ᅦ ᄑ ᅭᄒ ᅧ ᆫᄒ ᅧ ᆼ ᄉ ᅡ ᆼ ᄀ ᅪ ᆫᄋ ᅳ ᆫ ᄇ ᅥ ᆷᄋ ᅱ 0.73 ∼ 0.90, ᄑ ᅧ ᆼᄀ ᅲ ᆫ 0.78 (±0.04), ᄋ ᅲᄌ ᅥ ᆫ ᄉ ᅡ ᆼ ᄀ ᅪ ᆫᄋ ᅳ ᆫ 0.93 ∼ 0.98 ᄑ ᅧ ᆼᄀ ᅲ ᆫᄋ ᅳ ᆫ 0.97 (±0.01), milk BHBA, milk acetoneᄀ ᅪ ᄉ ᅡ ᆫᄋ ᅲᄅ ᅣ ᆼᄋ ᅴ ᄑ ᅭᄒ ᅧ ᆫᄒ ᅧ ᆼ ᄉ ᅡ ᆼ ᄀ ᅪ ᆫᄋ ᅳ ᆫ ᄇ ᅥ ᆷᄋ ᅱ -0.18 ∼ -0.05 ᄑ ᅧ ᆼᄀ ᅲ ᆫ -0.08 (±0.027), ᄇ ᅥ ᆷᄋ ᅱ -0.05 ∼ -0.23, ᄑ ᅧ ᆼ ᄀ

ᅲ ᆫ -0.1 (±0.041), ᄋ ᅲᄌ ᅥ ᆫᄉ ᅡ ᆼ ᄀ ᅪ ᆫᄋ ᅳ ᆫ -0.55 ∼ 0.05, ᄑ ᅧ ᆼᄀ ᅲ ᆫ -0.16 (±0.18), -0.62 ∼ -0.04, ᄑ ᅧ ᆼᄀ ᅲ ᆫ -0.24 (±0.17)ᄅ ᅩ ᄀ

ᅡ

ᆨᄀ ᅡ ᆨ ᄎ ᅮᄌ ᅥ ᆼᄋ ᅵ ᄃ ᅬᄋ ᅥ ᆻᄃ ᅡ. milk BHBA, milk acetoneᄀ ᅪ ECMᄋ ᅴ ᄑ ᅭᄒ ᅧ ᆫᄒ ᅧ ᆼ ᄉ ᅡ ᆼ ᄀ ᅪ ᆫᄀ ᅪ ᆫ ᄀ ᅨᄂ ᅳ ᆫ 0.056 (±0.023), -0.04 (±0.029), ᄋ ᅲᄌ ᅥ ᆫᄌ ᅥ ᆨ ᄀ ᅪ ᆫ ᄀ ᅨᄂ ᅳ ᆫ ᄑ ᅧ ᆼᄀ ᅲ ᆫ 0.023 (±0.08), 0.09 (±0.067)ᄅ ᅩ ᄀ ᅡ ᆨᄀ ᅡ ᆨ ᄎ ᅮᄌ ᅥ ᆼᄃ ᅬᄋ ᅥ ᆻᄃ ᅡ. ᄄ ᅡᄅ ᅡᄉ ᅥ ᄉ ᅡ ᆫᄋ ᅲ ᄂ

ᅳ ᆼᄅ ᅧ ᆨ ᄀ ᅥ ᆷᄌ ᅥ ᆼᄌ ᅡᄅ ᅭ ᄉ ᅮᄌ ᅵ ᆸ ᄉ ᅵ ᄇ ᅮᄀ ᅡᄌ ᅥ ᆨᄋ ᅳᄅ ᅩ ᄉ ᅮᄌ ᅵ ᆸᄃ ᅬᄂ ᅳ ᆫ ᄏ ᅦᄐ ᅩ ᆫ ᄎ ᅦᄅ ᅳ ᆯ ᄋ ᅵᄋ ᅭ ᆼ ᄒ ᅡᄆ ᅧ ᆫ ᄏ ᅦᄐ ᅩᄉ ᅵᄉ ᅳ ᄌ ᅥᄒ ᅡ ᆼᄉ ᅥ ᆼ ᄌ ᅳ ᆼᄌ ᅵ ᆫᄋ ᅳ ᆯ ᄒ ᅡ ᆯ ᄉ ᅮ ᄋ ᅵ ᆻᄋ ᅳ ᆯ ᄀ ᅥ

ᆺᄋ ᅳᄅ ᅩ ᄉ ᅡᄅ ᅭ ᄃ ᅬ ᆫ ᄃ ᅡ.

ᄌ

ᅮᄋ ᅭᄋ ᅭ ᆼ ᄋ ᅥ: Acetone, β-hydroxybutyrate acid, ᄋ ᅲᄌ ᅥ ᆫᄆ ᅩᄉ ᅮ, ᄏ ᅦᄐ ᅩᄉ ᅵᄉ ᅳ.

1. 서론

저

ᆽ소의 질병을 미리 예측할 수 있다면 질병 예방과 더불어 질병으로 발생한 경제적 손실을감소시킬 ᄉ

ᅮ 있기 때문에 낙농 농가에서 가축 질병의 중요성은 증가 하고 있다 (Thirunavukkarasu 등, 2010). 케 ᄐ

ᅩ시스는젖소에서 우유 생산으로 발생되는에너지 불균형 또는비유 초기에 젖소의 지방의 과다 사용으 ᄅ

ᅩ 인한 체내 지방대사장애로 인한 케톤체 (acetone, β-hydroxybutyrate acid, acetoacetate)가 비정상 ᄌ

ᅥᆨ으로 체액 (혈액, 오줌, 우유 등)에 증가하는대사성 질병이다. 케토시스는 증상을확인 가능한 임상

†

ᄇ ᅩ ᆫ ᄂ ᅩ ᆫᄆ ᅮ ᆫᄋ ᅳ ᆫ ᄂ ᅩ ᆼᄎ ᅩ ᆫᄌ ᅵ ᆫᄒ ᅳ ᆼᄎ ᅥ ᆼ ᄋ ᅧ ᆫᄀ ᅮᄉ ᅡᄋ ᅥ ᆸ (ᄉ ᅦᄇ ᅮᄀ ᅪᄌ ᅦᄇ ᅥ ᆫᄒ ᅩ : PJ01268002)ᄋ ᅴ ᄌ ᅵᄋ ᅯ ᆫ ᄋ ᅦ ᄋ ᅴᄒ ᅢ ᄋ ᅵᄅ ᅮᄋ ᅥᄌ ᅵ ᆫ ᄀ ᅥ ᆺᄋ ᅵ ᆷ.

1

(31000) ᄎ ᅮ ᆼ ᄂ ᅡ ᆷ ᄎ ᅥ ᆫᄋ ᅡ ᆫᄉ ᅵ ᄉ ᅥᄇ ᅮ ᆨ ᄀ ᅮ ᄉ ᅥ ᆼᄒ ᅪ ᆫᄋ ᅳ ᆸ ᄉ ᅵ ᆫᄇ ᅡ ᆼ1ᄀ ᅵ ᆯ 114, ᄂ ᅩ ᆼᄎ ᅩ ᆫᄌ ᅵ ᆫᄒ ᅳ ᆼᄎ ᅥ ᆼ ᄀ ᅮ ᆨᄅ ᅵ ᆸᄎ ᅮ ᆨ ᄉ ᅡ ᆫᄀ ᅪᄒ ᅡ ᆨᄋ ᅯ ᆫ, ᄋ ᅧ ᆫᄀ ᅮᄋ ᅯ ᆫ.

2

(54896) ᄌ ᅥ ᆫᄇ ᅮ ᆨ ᄌ ᅥ ᆫᄌ ᅮᄉ ᅵ ᄃ ᅥ ᆨᄌ ᅵ ᆫᄀ ᅮ ᄇ ᅢ ᆨᄌ ᅦᄃ ᅢᄅ ᅩ 567, ᄌ ᅥ ᆫᄇ ᅮ ᆨ ᄃ ᅢᄒ ᅡ ᆨᄀ ᅭ ᄃ ᅩ ᆼᄆ ᅮ ᆯᄉ ᅢ ᆼᄆ ᅧ ᆼᄀ ᅩ ᆼ ᄒ ᅡ ᆨᄀ ᅪ, ᄇ ᅡ ᆨᄉ ᅡᄀ ᅪᄌ ᅥ ᆼ.

3

(31000) ᄎ ᅮ ᆼ ᄂ ᅡ ᆷ ᄎ ᅥ ᆫᄋ ᅡ ᆫᄉ ᅵ ᄉ ᅥᄇ ᅮ ᆨ ᄀ ᅮ ᄉ ᅥ ᆼᄒ ᅪ ᆫᄋ ᅳ ᆸ ᄉ ᅵ ᆫᄇ ᅡ ᆼ1ᄀ ᅵ ᆯ 114, ᄂ ᅩ ᆼᄎ ᅩ ᆫᄌ ᅵ ᆫᄒ ᅳ ᆼᄎ ᅥ ᆼ ᄀ ᅮ ᆨᄅ ᅵ ᆸᄎ ᅮ ᆨ ᄉ ᅡ ᆫᄀ ᅪᄒ ᅡ ᆨᄋ ᅯ ᆫ , ᄋ ᅧ ᆫᄀ ᅮᄉ ᅡ.

4

(31000) ᄎ ᅮ ᆼ ᄂ ᅡ ᆷ ᄎ ᅥ ᆫᄋ ᅡ ᆫᄉ ᅵ ᄉ ᅥᄇ ᅮ ᆨ ᄀ ᅮ ᄉ ᅥ ᆼᄒ ᅪ ᆫᄋ ᅳ ᆸ ᄉ ᅵ ᆫᄇ ᅡ ᆼ1ᄀ ᅵ ᆯ 114, ᄂ ᅩ ᆼᄎ ᅩ ᆫᄌ ᅵ ᆫᄒ ᅳ ᆼᄎ ᅥ ᆼ ᄀ ᅮ ᆨᄅ ᅵ ᆸᄎ ᅮ ᆨ ᄉ ᅡ ᆫᄀ ᅪᄒ ᅡ ᆨᄋ ᅯ ᆫ , ᄇ ᅡ ᆨᄉ ᅡᄒ ᅮᄋ ᅧ ᆫᄀ ᅮᄋ ᅯ ᆫ .

5

ᄀ ᅭᄉ ᅵ ᆫᄌ ᅥᄌ ᅡ: (34134) ᄃ ᅢᄌ ᅥ ᆫᄀ ᅪ ᆼᄋ ᅧ ᆨᄉ ᅵ ᄋ ᅲᄉ ᅥ ᆼᄀ ᅮ ᄃ ᅢᄒ ᅡ ᆨᄅ ᅩ 99, ᄎ ᅮ ᆼ ᄂ ᅡ ᆷᄃ ᅢᄒ ᅡ ᆨᄀ ᅭ ᄃ ᅩ ᆼᄆ ᅮ ᆯ ᄌ ᅡᄋ ᅯ ᆫ ᄀ ᅪᄒ ᅡ ᆨᄇ ᅮ, ᄀ ᅭᄉ ᅮ.

E-mail: [email protected]

혀

ᆼ (clinical)과 육안으로 증상을확인하기 힘든 준임상형 (subclinical)로 구분할 수 있다 (Baird, 1982;

Wood 등, 2004; Sakha 등, 2006;조광현 등, 2015a;조광현 등, 2015b).

ᄏ

ᅦ토시스의 증상으로는 식욕부진, 입과 젖에서 이상한 냄새 발생, 산유량이 감소, 체내 각 장기 에너 ᄌ

ᅵ를대부분포도당에 의존하고 있는 신경조직에 기능장애가 발생한다 (Baird, 1982; Duffield 등, 1997;

Geishauser 등, 2000; Wood 등, 2004; Sakha 등, 2006; Vosman 등, 2015; Mattalia, 2016). 또한 ᄏ

ᅦ토시스 발병으로 농가는수의학적 치료, 산유량의 감소, 초종부 수태율 감소, 생산지속성 감소로 인 ᄒ

ᅢ 경제적 손실이 발생한다고 보고되었다 (Geishauser 등, 2000; Enjalbert 등, 2001; Oetzel, 2007;

Thirunavukkarasu 등, 2010; Adams, 2016). Acetone과 β-hydroxybutyrate acid (BHBA)은케토시 ᄉ

ᅳ 질병의 지표 형질로서 유전능력평가에 유용하게 이용할 수 있다고 보고되었다(Geishauser 등, 2000;

Enjalbert 등, 2001; Wood 등, 2004; Nielsen 등, 2005). 우유에 함유된케톤체 (milk aceotne, milk BHBA)는 혈액에 함유된 케톤체 (blood aceotne, blood BHBA)와 높은 상관관계 (r > 0.8)를 가지 ᄀ

ᅩ 있다고 보고되었으며 (Andersson, 1988), 혈액 내 케톤체보다 자료 수집이 쉽고 비용이 적어 milk BHBA와 milk acetone은케토시스 질병의 지표형질로 이용이 가능하다고 보고되었다 (Geishauser 등, 2000; Wood 등, 2004). 케토시스는우유생산량이 높은고능력우와 경산우의 비유초기에 주로 발생하며 지

ᆸ단에서 발병율은 임상형인 경우 3 ∼ 4%, 준임상형인 경우 12 ∼ 20%로 (Baird, 1982; Adams, 2016;

Mattalia, 2016;조광현 등, 2015a;조광현 등, 2015b)케토시스는젖소에서 발병빈도가 높은 질병이다.

ᄏ

ᅦ토시스 예방전략으로는사료조절 등사양관리 (단기계획)방식의 개설과 유전적 개량 (장기계획)이 있 ᄃ

ᅡ. 케토시스 질병의 지표형질을 이용하면 케토시스 저항능력에 대한 유전적 개량도 가능하다고 보고 ᄃ

ᅬ었다 (Van der Drift 등, 2012).

ᄋ

ᅮ유에 포함된유성분은젖소마다 다양하다. 따라서 각각의 젖소별 산유능력을비교하기 위해서는산 ᄋ

ᅲ량의 표준화가 필요하다. 우유에 포함된유단백량, 유지방량을이용한 에너지 보정 산유량인 energy- corrected milk (ECM)은사료효율 및 우유에 포함된에너지양을나타내는지표형질로서 이용가능하며, ECM의 증가는소화율또는섭취한 사료의 영양적 균형의 증가를나타낸다 (Shirley, 2006).

ᄄ

ᅡ라서 본연구는케토시스 질병의 지표 형질인 milk BHBA와 milk acetone, 그리고 사료효율의 지 ᄑ

ᅭ형질 ECM 및 젖소의 주요 경제 형질인 산유량에 대한 유전력과 이들간의 유전적관계를파악하여 케 ᄐ

ᅩ시스 질병 저항성 증진의 가능성을확인하기 위하여 실시하였다.

2. 재료 및 방법

보

ᆫ 연구는 한국종축개량협회로부터 2012년 5월부터 2016년 4월까지 혈통을 알고 있는 1산차 젖소 ᄋ

ᅴ 검정 자료를수집하였으며, 이 중 분만월령이 18 ∼ 48 개월 사이의 초산우, 총 14,397두의 산유형 지

ᆯ을이용하였다. 산유형질은케토시스 발병율이 높은비유초기(DIM =< 60)에서 오전에 착유된산유 ᄂ

ᅳᆼ력 검정자료 20,464개였으며, 혈통자료는 44,954두였다. 분석에 이용된 형질은유지방량과 유단백량 으

ᆯ이용한 에너지 보정 산유량 energy-corrected milk (ECM), 일일산유량, 케토시스 지표형질인 milk acetone과 milk BHBA였다. milk acetone 과 milk BHBA 및 유성분은한국종축개량협회에서 이용하 ᄀ

ᅩ 있는 FTIR (fourier transform infrared)방식의 분광분석기 (spectrometry)인 유성분자동측정장비 CombiFoss™ FT+ system (Foss analytical A/S, Denmark)을 통하여 수집이 되었다.

ECM은 유지방율 (3.5%)과 유단백율 (3.2%)을 이용하여 산유량을보정하였으며, 계산공식은 (1.1) ᄃ

ᅡ음과 같다.

ECM = (0.327 × kg of milk) + (12.95 × kg of fat) + (7.2 × kg of protein), (2.1)

ᄋ

ᅧ기서, ECM = 에너지 보정유량 (energy-corrected milk) 이며, milk = 산유량, fat = 유지방량, protein =유단백량이다.

milk BHBA와 milk acetone 농도의 분포가 제시된 Figure 2.1에서 milk BHBA의 값이 0인 빈도는 ᄌ

ᅥᆫ체의 26.1%였으나 milk acetone의 경우 0인 빈도는 10%이하로관측되었다. 따라서, 분석의 정확도 르

ᆯ기하고 추정의 편의를제거하기 위하여 milk BHBA = 0 그리고 milk acetone ̸= 0 인 8,009개의 기 ᄅ

ᅩ

ᆨ은 milk BHBA값을 종속변수로 milk acetone 값을 독립변수로 하여 회귀계수를추정한 후, BHBA

= 0자료에 대하여 다음의 공식 (1.2)으로 치환하였다.

milk BHBA = 0.28 × milk acetone + 9.18 (R²= 0.41, p < 0.001). (2.2) ᄄ

ᅩ한 milk BHBA와 milk acetone함량은 자연 로그로 치환하여 분석에 이용하였으며, 분석 자료에 ᄃ

ᅢ한 분포적 특성은 Table 2.1, Table 2.2와 Table 2.3에 제시하였다. 형질들의 대한 분산성분추정을 ᄋ

ᅱ한 다형질 임의회귀 검정일 선형 모형 (1.3)은다음과 같다.

Yijklmn= µ + HT Di+

4

X

m=1

bjzklm+

3

X

m=1

almzklm+

3

X

m=1

pelmzklm+ eijkl, (2.3)

ᄋ

ᅧ기서, Yijklmn = 측정형질, µ = 전체 평균, HT Di = i번째 축군-검정일의 고정효과이고, bj = j번 ᄍ

ᅢ 개체에 중첩된고정효과의 회귀계수, alm와 pelm는 l번째 개체에 중첩된임의회귀계수이며, z1∼4은 Kirkpatrick 등 (1990)이 제시한 Legendre 4차 다항식을변형한 표준화 착유일 d의 공변량이며 다음과 ᄀ

ᅡ

ᇀ이 계산하였다.

z1= 0.7071d⁰, z2= 1.2247d¹, z3= −0.7906d⁰+ 2.3717d², z4= −2.8062d¹+ 4.6771d³, (2.4) ᄋ

ᅧ기서 d는 -1 ∼ 1의 범위를갖는검정일을표준화한 값이다.

dl= 2(tl− tmin)/(tmax− tmin) − 1, (2.5) ᄋ

ᅧ기서, t^min는관측된 검정 기간 중최소값, t^max는관측된 검정 기간 중최대값이다.

ᄃ

ᅡ형질 임의회귀 검정일 모형을 행렬식으로 표기하면 다음과 같다.

y = Xb + Za + W p + e. (2.6) ᄀ

ᅳ리고 분산 공분산에 대한 가정은다음과 같다.

E









 y a pe

e











=









 Xb

0 0 0









 ᄋ

ᅵ고,V ar =





 a pe

e





=







G ⊗ A 0 0 0 P ⊗ I 0

0 0 R





, (2.7)

ᄋ

ᅧ기서, A = 혈연계수 행렬, G = 행렬들간의 유전분산-공분산성분, P = 형질들간 영구환경효과에 ᄃ

ᅢ한 분산-공분산성분이며, R = 오차분산-공분산성분으로 총착유기간 (DIM) 60일을 4등분하여 (1 ∼ 15, 16 ∼ 30, 31 ∼ 45, 46 ∼ 60) 4개 그룹을 독립적으로 설정하여 분석하였다 (Heterosis 가정).

ᄀ

ᅩ정효과로써 회귀계수 추정은 분만 시 계절 (5 ∼ 10월 및 11 ∼ 4월) 효과 및 연령으로 구분하였는데 ᄋ

ᅧᆫ령은 18 ∼ 23개월, 24 ∼ 25개월 26 ∼ 29개월 및 30 ∼ 48개월로 구분하였다.

ᄇ

ᅮᆫ산성분추정은 REML algorithm을바탕으로 한 분석프로그램 Wombat program (Meyer, 2010)을 ᄋ

ᅵ용하였다.

ᄎ

ᅮ정된 분산성분을이용하여 다음과 같이 유전력과 유전상관및 표현형 상관을계산하였다.

hˆ²= σˆ²_a σˆa²+ ˆσ²e

, ˆrp= cov\_p(i,j) pσˆp_i∗ ˆσp_j

, ˆra= cov\_a(i,j) pσˆa_i∗ ˆσa_j

(i ̸= j), (2.8)

ᄋ

ᅧ기서, ˆh² =유전력, ˆrp =유전상관, ˆrp =표현형상관, ˆσ²p =표현형 분산, ˆσ²a =상가적 유전분산, σˆ²e=잔차 분산,covca(i, j) = i, j번째 형질 간 유전공분산, \covp(i,j)= i, j번째 형질 간 표현형 공분산.

Table 2.1 Descriptive statistics of the data used in the study

Trait N Mean SD Min Max

Milk BHBA

(μM/L) 20,464 46.08 62.35 0 2100.00

Milk Acetone(μM/L) 20,464 124.00 141.35 0 2540.00

log(Milk BHBA

) 20,464 3.25 1.24 0.00 7.65

log(Milk Acetone) 20,464 4.21 1.51 0.00 7.84

Milk yield(kg/day) 17,072 15.39 3.67 3.40 35.10

ECM

(kg/day) 17,072 15.91 3.87 3.51 43.92

BHBA

:β-hydroxybutyrate acid ECM

:energy-corrected milk

Min: minimum value, Max: maximum value

Table 2.2 Distribution of records according to seasons of milking and milking age

Season Age Milk BHBA

and MilkAcetone ECM

and Milkyield

No of record No of record

Summer 18 ∼ 23 2,876 2,443

(May ∼ October) 24 ∼ 25 2,346 1,914

26 ∼ 29 2,077 1,610

29 ∼ 48 1,537 1,154

Total record 8,836 7,121

Winter 18 ∼ 23 2,713 2,359

(November ∼ April) 24 ∼ 25 3,217 2,786

26 ∼ 29 3,646 3,115

29 ∼ 48 2,052 1,690

Total record 11,628 9,950

BHBA

:β-hydroxybutyrate acid ECM

:energy-corrected milk

Min: minimum value, Max: maximum value

Table 2.3 Number of cows with repeated records in first parity

Number milk BHBA

% milk acetone % milk yield % ECM

%

of repeat (μM/L) (μM/L) (kg/day) (kg/day) %

1 8,448 58.68 8,448 58.68 5,290 47.56 5,290 47.86

2 5,833 40.52 5,833 40.52 5,743 51.55 5,743 51.29

3 114 0.79 114 0.79 96 0.86 96 0.84

4 2 0.01 2 0.01 2 0.02 2 0.02

No of cows 14,397 14,397 11,131 11,131

Number of sires 1,485

BHBA

:β-hydroxybutyrate acid ECM

:energy-corrected milk

Figure 2.1 Distribution of the concentration of milk β-hydroxybutyric acid (with and without regression intercepts) and milk acetone in first parity Korean Holstein cows

3. 결과 및 고찰

3.1. 일반능력

Table 3.1 Pearson’s correlations coefficients between Ketosis indicators and milk yield, and between Ketosis indicators and ECM in first parity cows

ECM

(kg/day) Milk yield(kg/day)

Milk BHBA

(μM/L) 0.00 -0.18

Milk Acetone(μM/L) -0.10 -0.21

BHBA

:β-hydroxybutyrate acid ECM

:energy-corrected milk (all trait p < 0.001)

Milk BHBA와 Milk Acetone의 비유기간에 따른 우유 내에 평균 농도를 Figure 3.1에 제시하였다.

milk BHBA와 milk acetone의 우유 내 농도는 비유 3 ∼ 6일에 가장 높았고 그 이후로 점차 감소 후 이

ᆯ정하게 지속되었다. 본 분석에 이용된자료수집기간에 수집된자료들은케토시스의 발병여부를수집 ᄒ

ᅡ지 않았지만 Enjalbert 와 Nicot(2001)가 제시한 준임상형 케토시스의 기준을따르면 milk acetone 160μM/L, milk BHBA 70μM/L으로, 본 분석 자료에서 milk acetone 160μM/L 이상은 31.33%, milk BHBA 70μM/L이상은 19.13%로 이는기존에 보고된 준임상형 케토시스 발병율 12 ∼ 43%와 유사하

ᄋ

ᅧᆻ다 (Duffield 등, 1997; Geishauser 등, 2000; McArt 등, 2012)또한 milk BHBA와 milk acetone의 ᄇ

ᅵ유 60일간의 전체 농도 평균은 기준점보다 모두 낮았지만 분산의 크기는 매우 높게 나타났다. Ta- ble 3.1에 케토시스 지표형질과 산유량 및 ECM간에관측치의 상관관계를나타내었다. milk BHBA와 milk acetone의관측치의 상관관계는 0.63 (p < 0.001)로 고도의 상관을보였고 (Enjalbert 등, 2001)이 ᄌ

ᅦ시한 0.68과 유사하게 나타났다.

Figure 3.1 Lactation curves of milk β-hydroxybutyric acid and milk acetone

3.2. 유전 모수 ᄎ

ᅮ정된 유전모수와 유전력의 추세는 Table 3.2와 Figure 3.2에 제시하였다. log(milk BHBA)와 log(milk acetone)의 유전력은 범위 0.06 ∼ 0.15, 평균 유전력은 0.08 (± 0.03)로 추정되었으며 비 ᄋ

ᅲ 5일 (DIM =< 5) 이전에 가장 높게 추정되었다. log(milk BHBA)와 log(milk acetone)의 유전력 ᄋ

ᅵ 유사한 이유는 milk BHBA = 0 과 milk acetone ̸= 0인 값을 보정하여 발생된결과로 사료된다.

milk BHBA와 milk acetone의 모든 분산성분은 비유 1 ∼ 15일에 가장 높게 추정이 되었다. 타 연구 Koeck와 Jamrozik (2014)가 추정한 비유기간 5일에서 100일까지의 (DIM 5 ∼ 100) 유전력은 milk BHBA는 0.14 ∼ 0.29였으며, 비유가 지속될수록점차 증가하는결과로 추정되었다. 이러한 차이는다 혀

ᆼ질 모형과 임의회귀모형의 분석모형의 차이로 발생으로 사료된다. 하지만 DIM 5 ∼ 40일의 유전력은 0.12로 유사하게 추정되었고, Mattalia (2016)가 추정한 log(milk BHBA)와 log(milk acetone) 의 유 ᄌ

ᅥᆫ력은각각 0.12, 0.1로 유사하였다. 또한 Van der Drift와 Van Hulzen (2012)가 추정한 milk BHBA ᄋ

ᅪ milk acetone 의 유전력 0.16, 0.10이였으며, 비유기간이 지속될수록 감소되는 경향도 유사하였다.

Lee와 Cho (2016)가 추정한 비유 milk BHBA와 milk acetone의 비유초기 (DIM = 30)의 유전력 0.1 0.18로 각각 추정되었다. 이러한 차이는 Covariance function의 표준화 시간의 범위 및 일 생산량 오전 새

ᆼ산량에 따른차이로 사료된다.

Table 3.2 Estimates of genetic (G), permanent environment (P), residual (R) variance components, and heritability (h

) for milk β-hydroxybutyrate acid, milk acetone, milk yield, and energy-corrected milk at different

days in milk (DIM) of the first lactation of Holstein cows

DIM item log(milk BHBA

log(milk acetone) Milk yield(kg/day) ECM

(kg/day)

15 G 0.12 0.15 3.99 5.26

P 1.07 1.38 6.24 8.57

R 0.24 0.27 0.40 0.66

h

0.08 0.08 0.38 0.36

30 G 0.08 0.11 4.84 5.83

P 1.15 1.32 6.74 8.25

R 0.19 0.38 0.73 0.77

h

0.06 0.06 0.39 0.39

45 G 0.07 0.10 5.41 5.56

P 0.97 1.18 6.72 8.37

R 0.15 0.36 0.92 0.84

h

0.06 0.06 0.41 0.38

60 G 0.11 0.15 6.19 6.16

P 1.18 1.65 7.30 8.56

R 0.17 0.32 0.56 0.73

h

0.08 0.07 0.44 0.40

Overall h

Mean 0.08 0.08 0.40 0.37

SD

0.03 0.03 0.03 0.02

Min 0.06 0.06 0.36 0.32

Max 0.15 0.15 0.45 0.40

BHBA

:β-hydroxybutyrate acid ECM

:energy-corrected milk

SD

: the standard deviation of heritability was estimated through lactation Min: minimum value, Max: maximum value

Figure 3.2 Estimates of heritability (h2) for milk BHBA (milk β-hydroxybutyrate acid), milk Acetone, milk yield, and ECM (energy-corrected milk) traits in Holstein cows

3.3. 표현형 상관 유전상관 ᄎ

ᅮ정된 표현형 상관 및 유전상관의 통계량 및 추세는 Table 3.3, Figure 3.3, Figure 3.4에 제시하

Table 3.3 Basic statistics of phenotypic and genetic correlations of traits estimated in the study B

-A

B

-M

B

-E

A

-M

A

-E

M

-E

Phenotypic Mean 0.78 -0.08 0.06 -0.1 -0.04 0.86

correlation SD 0.04 0.03 0.02 0.04 0.03 0.01

Min 0.73 -0.18 0.00 -0.23 -0.09 0.84

Max 0.90 -0.05 0.10 -0.05 0.01 0.87

Genetic Mean 0.97 -0.16 0.02 -0.24 -0.09 0.94

correlation SD

0.01 0.18 0.08 0.17 0.07 0.06

Min 0.93 -0.55 -0.10 -0.62 -0.20 0.78

Max 0.98 0.05 0.11 -0.04 0.00 0.98

B

: log(milk β-hydroxybutyrate acid), A

: log(milk acetone), M

: milk yield, E

: energy-corrected milk, Min: minimum estimate, Max: maximum estimate SD

: the standard deviation of heritability was estimated through lactation

ᄋ

ᅧᆻ다. log(milk BHBA)와 log(milk acetone)의 표현형상관은 범위0.73 ∼ 0.90, 평균 0.78 (±0.04)로 ᄀ

ᅩ도의 상관을 나타났으며 관측치의 상관 0.64 (p < 0.001)보다 높게 추정이 되었다. milk BHBA와 milk acetone 모두 케토시스 지표형질로 이용이 가능하며 (Wood 등, 2004; Van der Drift 등, 2012), log(milk BHBA)와 log(milk acetone)의 유전상관은범위 0.93 ∼ 0.98 평균은 0.97 (±0.01)로 고도의 ᄋ

ᅲ전상관을나타냈으며, 1에 가까운상관을나타내는이유는 milk BHBA = 0과 milk acetone ̸=0 인 ᄀ

ᅡ

ᆹ을 보정을 위하여 절편이 없는 회귀식 결과로 사료된다. 하지만 타 연구 결과에서도 milk BHBA와 milk acetone 유전상관관계는 0.85, 0.81로 고도의 유전상관관계를 가진다고 보고되었다 (Van der Drift 등, 2012; Mattalia, 2016). log(milk BHBA)와 산유량의 표현형상관은범위 -0.18 ∼ -0.05 평균 -0.08(±0.03), log(milk acetone)과 산유량의 표현형상관은범위 -0.05 ∼ -0.23, 평균 -0.1 (±0.04), 관 ᄎ

ᅳ

ᆨ치들의 상관관계는각각 -0.18, -0.21 (p < 0.001)로 전반적으로 미미하였다. 그러나 비유 5일 (DIM 5)이전에서는 log(milk BHBH)는 r ≤ -0.16, log(milk acetone)은 r ≤ -0.18로 두 형질 모두 부의관 ᄀ

ᅨ를 보였다. log(milk BHBA)와 산유량의 유전적관계는 -0.55 ∼ 0.05, 평균 -0.16 (±0.18) log(milk acetone)산유량의 유전적관계는 -0.62 ∼ -0.04, 평균 -0.24 (±0.17)로 전체적으로 저도 부의상관을나 ᄐ

ᅡ냈으며 특히 비유 10 (DIM 10)일 log(milk BHBA)는 -0.33, log(milk aetone)은 -0.39로 중도에서 ᄀ

ᅩ도의 부의상관을나타냈으나 비유가 지속될수록상관관계가 0에 가까워졌다. 이는우유 내 아세톤함 ᄋ

ᅲ량은 산유량을 감소시키는 경향이 있지만 모든 비유 기간에서 영향을미치지 않는 원인으로 사료된 ᄃ

ᅡ. (Gustafsson and Emanuelson, 1996) 타 연구 Lee와 Cho (20016)에서도 산유량과 케토시스 지 ᄑ

ᅭ형질 (milk BHBA, milk acetone)간의 유전적 경향은비유초기 (r = -0.14 (DIM4))에 케토시스 발 벼

ᆼ 비율이 높기 때문에 부의관계를가진다고 보고되었고, 이는 임상형 및 준임상형 케토시스 증상인 산 ᄋ

ᅲ량감소의 원인으로 사료된다. (Enjalbert 등, 2001; Oetzel, 2007) 케토시스 지표형질들 (log(milk BHBA), log(milk acetone))과 ECM의 표현 형 상관관계는각각 0.056 (±0.023), -0.04 (±0.029)로 추 저

ᆼ되었고 관측치들간에는 각각 0, -0.01로 상관관계가 없었다. 유전상관 역시 milk BHBA경우 평균 0.023 (±0.08), milk acetone의 경우 -0.09 (±0.067)로 유전적관계가 적게 나타났다.

Lee와 Cho (2016)에서 초산의 젖소 비유초기 유단백량과 케톤체 (milk BHBA, milk acetone)와의 ᄋ

ᅲ전적관계가 없다고 보고되었다 (±0.2이하), 그러나 유지방량과 케톤체 모두 양의 상관관계 (+0.3이 ᄉ

ᅡᆼ)를 보였으며, energy balance 지표 중 하나인 유지방-유단백 비율 (FPR)은 Koeck와 Jamrozik (2014)의 보고에 따르면 milk BHBA와 FPR의 유전적관계는 0.52의 유전적관계가 있다고 보고되었 ᄃ

ᅡ. 따라서 ECM과 케톤체 (milk BHBA, milk acetone)간에 유전적 관계가 미미한 이유는산유량이 ᄀ

ᅡ

ᆷ소하는만큼유지방 함량이 크게 증가하는결과로 사료된다.

Figure 3.3 Phenotypic correlations among log (milk β-hydroxybutyrate acid) (B), log(milk acetone) (A), milk yield (M), energy corrected milk (E) traits in Holstein cows

Figure 3.4 Genetic correlations among log(milk β-hydroxybutyrate acid) (B), log(milk acetone) (A), milk yield (M), energy corrected milk (E) traits in Holstein cows

4. 결론

ᄏ

ᅦ토시스 지표형질인 log(milk BHBA)와 log(milk acetone)은 1산차에서 평균 유전력 0.08 (±

0.03)을 보였으며, 케토시스 질병의 지표형질과 사료효율의 지표형질 ECM간에 유전적 관계는 미미 ᄒ

ᅡ였지만, 비유 10일 (DIM 10) 이전에 산유량과 부의 유전적 관계를 보였다. (r < −0.30) 따라서,

ᄇ

ᅵ유 5 ∼ 50일 기간 동안 수집된 milk BHBA와 milk acetone은 케토시스 질병저항성을위한 유전능 ᄅ

ᅧ

ᆨ 평가를이용하여 젖소의 케토시스 질병 저항성 증진이 가능할 것으로 사료된다. 또한 더욱더 정확 ᄒ

ᅡᆫ 산유량 및 유성분간에 유전적관계를해명 및 질병저항성증진을위해서는케톤체 (milk BHBA, milk acetone)의 농도뿐만 아니라 데이터 수집시 케토시스 발병여부의 자료도 같이 수집이 되면 케토시스 질 벼

ᆼ 저항성 증진에 도움이될 것으로 사료된다.

References

Adams, H. (2016). Measuring the prevalence and impact of subclinical ketosis on lactation performance in US dairy herds. 2016 Joint Annual Meeting, Salt Lake City, UTAH.

Andersson, L. (1988). Subclinical ketosis in dairy cows. Veterinary Clinics of North America: Food Animal Practice, 4, 233-251.

Baird, G. D. (1982). Primary ketosis in the high-producing dairy cow: Clinical and subclinical disorders, treatment, prevention, and outlook. Journal of Dairy Science, 65, 1-10.

Cho, K.-H., Cho, C.-I., Lee, J.-H. and Park, K.-D. (2015). (Co)heritability of acetone and β-hydroxybutyrate concentrations in raw milk related to ketosis in Holsteins. Journal of the Korean Data & Information Science Society, 26, 915-921.

Cho, K.-H., Cho, C.-I., Lee, J.-H. and Park, K.-D. (2015). Environmental factors influencing acetone and β-hydroxybutyrate acid contents in raw milk of Holstein dairy cattle. Journal of the Korean Data &

Information Science Society, 26, 687-693.

Duffield, T. F., Kelton, D. F., Leslie, K. E., Lissemore, K. D. and Lumsden, J. H. (1997). Use of test day milk fat and milk protein to detect subclinical ketosis in dairy cattle in Ontario. The Canadian Veterinary Journal , 38, 713.

Enjalbert, F., Nicot, M., Bayourthe, C. and Moncoulon, R. (2001). Ketone bodies in milk and blood of dairy cows: Relationship between concentrations and utilization for detection of subclinical ketosis.

Journal of Dairy Science, 84, 583-589.

Geishauser, T., Leslie, K., Tenhag, J. and Bashiri, A. (2000). Evaluation of eight cow-side ketone tests in milk for detection of subclinical ketosis in dairy cows. Journal of Dairy Science, 83, 296-299.

Gustafsson, A., and Emanuelson, U. (1996). Milk acetone concentration as an indicator of hyperketonaemia in dairy cows: the critical value revised. Animal Science, 63, 183-188.

Koeck, A., Jamrozik, J., Schenkel, F. S., Moore, R. K., Lefebvre, D. M., Kelton, D. F., Miglior, F. (2014).

Genetic analysis of milk β-hydroxybutyrate and its association with fat-to-protein ratio, body condition score, clinical ketosis, and displaced abomasum in early first lactation of Canadian Holsteins. Journal of Dairy Science, 97, 7286-7292.

Lee, S., Cho, K.-H., Park, M.-N., Choi, T.-J., Kim, S.-D. and Do, C.-H. (2016). Genetic parameters of milk β-hydroxybutyric acid and acetone and their genetic association with milk production traits of Holstein cattle. Asian-Australasian Journal of Animal Sciences, 29, 1530.

Mattalia, S. (2016). GenoSante: Improving productive health of dairy cows by genomic selection and management: A first step with ketosis. Interbull Bulletin.

McArt, J., Nydam, D. and Oetzel, G. (2012). Epidemiology of subclinical ketosis in early lactation dairy cattle. Journal of Dairy Science, 95, 5056-5066.

Meyer, K. (2007). WOMBAT-A tool for mixed model analyses in quantitative genetics by restricted max- imum likelihood (REML). Journal of Zhejiang University Science B , 8, 815-821.

Nielsen, N. I., Friggens, N. C., Chagunda, M. G. and Ingvartsen, K. L. (2005). Predicting risk of ketosis in dairy cows using in-line measurements of β-hydroxybutyrate: A biological model. Journal of Dairy Science, 88, 2441-2453.

Oetzel, G. R. (2007). Herd-level ketosis-diagnosis and risk factors. Proceedings of the 40th Annual Con- ference of Bovine Practitioners, Vancouver, Canada.

Sakha, M., Ameri, M. and Rohbakhsh, A. (2006). Changes in blood β-hydroxybutyrate and glucose concen- trations during dry and lactation periods in Iranian Holstein cows. Comparative Clinical Pathology, 15, 221-226.

Shirley, J. (2006). Feed efficiency is an important management tool for dairy producers. Proc. High Plains Dairy Conf. Amarillo TX. Texas A & M University, College Station, 63-67.

Thirunavukkarasu, M., Kathiravan, G., Kalaikannan, A. and Jebarani, W. (2010). Quantifying economic

losses due to milk fever in dairy farms. Agricultural Economics Research Review , 23, 77-81.

Van der Drift, S., Van Hulzen, K. J. E., Teweldemedhn, T. G., Jorritsma, R., Nielen, M. and Heuven, H.

C. (2012). Genetic and nongenetic variation in plasma and milk β-hydroxybutyrate and milk acetone concentrations of early-lactation dairy cows. Journal of Dairy Science, 95, 6781-6787.

Vosman, J., De Jong, G., Eding, H. and Knijn, H. (2015). Genetic evaluation for ketosis in the Netherlands based on FTIR measurements. Interbull Bulletin, 49.

Wood, G., Boettcher, P., Kelton, D. and Jansen, G. (2004). Phenotypic and genetic influences on test-day

measures of acetone concentration in milk. Journal of Dairy Science, 87, 1108-1114.

2017, 28

6)

1349–1360

Genetic parameters of milk β-hydroxybutyrate acid, milk acetone, milk yield, and energy-corrected milk for

Holstein dairy cattle in Korea ^†

SeokHyun Lee

¹

²

³

⁴

⁵

134National Institute of Animal Science, RDA

2Chonbuk National University

5Chungnam National University

Received 8 July 2017, revised 2 November 2017, accepted 2 November 2017

Abstract

This study was conducted to estimate the genetic parameters for common ketosis indicators (β-hydroxybutyrate acid, BHBA; milk acetone), feed intake efficiency indica- tor (energy-corrected milk, ECM), and milk yield (MY) in Korean Holstein. A total of 75,072 monthly test-day records from 14,397 first parity cows were collected, between 2012 and 2016, from Korea animal improvement association enrolled farms. Variance components were estimated using a multiple trait random regression model. The heri- tability of BHBA and acetone levels ranged from 0.06 to 0.15 at different DIMs. The phenotypic and genetic correlations between BHBA and acetone were between 0.73 and 0.90, and between 0.93 and 0.98, respectively. The phenotypic correlation between BHBA and MY, between acetone and MY, between BHBA and ECM, and between acetone and ECM ranged from -0.18 to -0.05, -0.23 to -0.05, 0 to 0.10, and -0.09 to 0.01, respectively. Genetic correlation estimates between BHBA and MY, between ace- tone and MY, between BHBA and ECM, and between acetone and ECM also ranged from -0.55 to 0.05, -0.62 to -0.04, -0.10 to 0.11, and -0.20 to 0.00, respectively. We hope that these results would greatly assist in the improvement of ketosis disease in the local Holsteins.

Keywords: Acetone, β-hydroxybutyrate acid, genetic parameter, ketosis.

†

This work was carried out with the support of“Cooperative Research Program for Agriculture Science and Technology Development (Project No. PJ01268002)” Rural Development Administration, Republic of Korea.

1

Researcher, National Institute of Animal Science, RDA, Chungnam 31000, Korea.

2

Researcher, Chonbuk National University, Jeollabuk-do 54896, Korea.

3

Researcher, National Institute of Animal Science, RDA, Chungnam 31000, Korea.

4

Post-Doc, National Institute of Animal Science, RDA, Chungnam 31000, Korea.

5

Corresponding author: Professor, Chungnam National University, Daejeon 34134, Korea. E-mail:

[email protected]