Streptococcus thermophilus를 이용한 오미자 유산균 발효물의 생리활성 평가
⁃ 연구노트 ⁃
황경아1․황유진1․황혜정1․황인국1․김영준2
1농촌진흥청 국립농업과학원 농식품자원부
2고려대학교 식품생명공학과
Evaluation of Biological Activities of Fermented Schisandra chinensis Extracts by Streptococcus thermophilus
Kyung-A Hwang1, Yu-Jin Hwang1, Hye-Jeong Hwang1, In-Guk Hwang1, and Young Jun Kim2
1Department of Agrofood Resources, National Institute of Agricultural Sciences, RDA
2Department of Food and Biotechnology, Korea University
ABSTRACT Probiotic bacteria help relieve intestinal infections, and control the immune system. The beneficial effects of fermented lactic acid bacteria that contain physiologically active substances to the body have been reported. On the other hand, there are few reports on the effects of improving the biological activities of the fermented Schisandra chinensis (FSC). This study examined the anti-oxidative, anti-inflammatory, anti-hypertensive, and anti-cholesterol activ- ities of FSC. Fermentation with lactic acid bacteria generally increased the biological activities of FSC. The non-fer- mented S. chinensis (SC) extract showed 5.0% 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radical scavenging activity, whereas the antioxidant activity of the FSC extract was 20.0%, which was increased by lactic acid fermentation. The inhibition of angiotensin-converting enzyme was 44.0%, and the reduction of nitric oxide production was 15.1%. In addition, FSC reduced the 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase activity significantly. These results suggest the applicability of fermentation with lactic acid bacteria to improve the diverse biological activities of SC and develop functional materials or foods.
Key words: Schisandra chinensis, lactic acid bacteria, Streptococcus thermophilus, biological activity
Received 17 August 2018; Accepted 5 November 2018
Corresponding author: Kyung-A Hwang, Department of Agrofood Resources, National Institute of Agricultural Sciences, RDA, Wanju- gun, Jeonbuk 55365, Korea
E-mail: [email protected], Phone: +82-63-238-3683
서 론
유산균은 프로바이오틱스 중 가장 대표적인 미생물로 탄 수화물을 발효시켜 젖산을 생성하는 균류를 말하며, 김치, 된장, 젓갈 등의 전통발효식품과 치즈, 요구르트 등의 발효 유제품에 존재한다(1,2). 유산균은 숙주의 장내 균총 조성을 변화시켜 염증성 장 질환(inflammatory bowel disease), 과민성 대장 증후군(irritable bowel syndrome), 항생제 관 련 설사증(antibiotic-associated diarrhea) 등 위장관 질환 을 개선시킨다는 연구 결과(3,4)와 이 외에도 변비 개선(5), 혈당 개선(1) 및 면역력 개선(6) 등 다양한 효능이 보고되고 있다. 이와 같이 유산균은 요구르트, 유산균 음료, 발효분말, 과립 및 정제 등의 형태로서 건강기능식품 및 기능성식품 제조에 이용되는 기능성과 활용성이 우수한 미생물이다. 최 근 유산균은 천연물 식품 소재와의 상호작용으로 생리활성 과 특정 기능을 증대시켜 인체 건강에 도움이 될 수 있는
연구 결과들이 보고되고 있으며(7), 대표적인 연구로는 유산 균 발효인삼의 항산화와 항노화 활성(8), 유산균 발효꽃송이 버섯의 항산화 활성(9), 유산균 발효마늘의 항산화 및 알코 올성 손상 간세포 보호 효과(10), 유산균 발효부추의 항산화 활성(11) 등이 있다. 이외에도 다양한 천연물 소재와 유산균 을 이용한 유산균 발효식품에 관해 관심이 지속해서 높아지 고 있으며, 유산균 발효식품을 건강기능식품 소재로 응용하 기 위한 연구가 꾸준히 이루어지고 있다.
오미자(Schisandra chinensis)는 오미자과에 속하는 낙 엽활엽 넝쿨성 식물로서 단맛, 신맛, 쓴맛, 매운맛, 짠맛 등 독특한 다섯 가지 풍미를 지니고 있으며(12), 안토시아닌 성분에 의해 붉은색을 띠어 음료, 국수, 떡, 차, 엑기스 등 가공식품 개발에 이용되고 있을 뿐만 아니라(13,14), 리그 난, 플라보노이드 등의 기능성 성분을 다량 함유하고 있어, 항염증, 항노화, 콜레스테롤 저하 및 고지혈증 완화 등의 생 리활성 기능이 보고되면서 다양한 기능성 식품소재로 관심 이 증대되고 있다(15-17). 이와 같이 다양한 생리활성 기능 과 약리학적 효능을 지닌 오미자를 이용해 다양한 가공식품 및 건강기능식품 개발 연구가 진행되고 있지만, 유산균을 이 용한 오미자 발효물의 생리활성 기능에 대한 연구는 부족한
실정이다.
따라서 본 연구에서는 프로바이오틱스 대표 균주인 Strep- tococcus thermophilus를 오미자와 혼합하여 발효시켜 제 조한 오미자 유산균 발효물에 대한 생리활성을 비 발효 오미 자 분말과 비교･분석하고 이를 이용한 기능성 식품소재 개 발을 위한 기초자료로 활용하고자 하였다.
재료 및 방법
오미자 추출물 제조
실험에 사용된 오미자는 국내산(경북 문경)을 구입하였 고, 이물질을 물로 세척하여 55°C에서 48시간 열풍건조 하 여 사용하였다.
오미자 에탄올 추출물 제조는 다음과 같은 조건으로 수행 하였다. 칭량된 오미자에 70% 에탄올을 넣고 70°C에서 6시 간 교반하여 1차 추출하고, 남은 잔여물에 동량의 용매를 넣어 1차 추출과 동일한 조건으로 2차 추출을 하였다. 이후 추출물을 여과지를 이용하여 얻어진 여액을 감압농축기를 사용하여 농축한 후 동결건조 하였다. 동결건조 한 오미자 에탄올 추출물의 수율은 54%였다. 오미자 에탄올 동결건조 분말은 -20°C 냉동고에 보관하면서 실험에 사용하였다.
오미자 유산균 발효물 제조
MRS 배지에 오미자 동결건조 분말을 1% 첨가하고, S. thermophilus(NLRI704, 국립축산과학원, 전주, 한국)를 log 7.4 colony forming units per milliliter(CFU/mL)가 되게 접종하여 37°C에서 48시간 배양하여 발효시켰다. 48시간 배양 후 대사산물이 함유된 상층액을 분리한 오미자 유산균 발효물(fermented S. chinensis; FSC)을 동결건조 하였으 며, 오미자 유산균 발효물은 dimethyl sulfoxide(DMSO;
Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO, USA)에 용해시킨 후 실험에 사용하였다. 대조구로는 오미자 유산균 발효물과의 비교를 위해 MRS 배지에 오미자 동결건조 분말을 1% 첨가 하고 동결건조 하여 비 발효 오미자 분말(non-fermented S. chinensis; SC)을 제조하여 실험에 사용하였다.
세포독성 측정
RAW 264.7 세포를 96 well에 분주하여 2시간 배양한 후 비 발효 오미자 분말과 오미자 유산균 발효물을 각각 농 도별(200, 1,000 μg/mL)로 처리하여 37°C, 5% CO2 in- cubator에서 24시간 배양하였다. 배양 완료 후 EZ-cytox 시약(Daeillab Service Co., Ltd., Seoul, Korea)을 처리하 여 2시간 재배양한 후 흡광도(450 nm)를 측정하였다.
Nitric oxide(NO) 생성 측정
RAW 264.7 세포를 96 well에 분주하여 2시간 배양한 후 비 발효 오미자 분말과 오미자 유산균 발효물을 각각 처리하 고 1시간 후 LPS(1 μg/mL, Sigma-Aldrich Co.)를 처리하
여 배양하였다. 이후 세포배양 상등액을 회수하여 Griess reagent(Promega, Madison, WI, USA)를 이용하여 NO 생 성량을 측정하였다. 즉 세포배양 상등액에 sulfanilamide 용 액을 넣고 상온에서 10분간 반응시킨 후, NED 용액을 넣고 상온에서 10분간 반응하여 흡광도(520 nm)를 측정하였다.
NO 생성량은 sodium nitrite를 표준물질로 사용하여 검량 선을 작성하였고, 이에 대입하여 NO 생성량을 계산하여 나 타내었다.
DPPH 라디칼 소거능 측정
2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH) 라디칼 소거 능은 Mensor 등(18)의 방법에 따라 측정하였다. 0.3 mM DPPH 용액에 2.5배의 비 발효 오미자 분말 및 오미자 유산 균 발효물을 혼합한 후 실온에서 30분간 반응시킨 다음 분 광광도계(SpectraMax M5, Molecular Devices, LLC, Sun- nyvale, CA, USA)를 이용하여 518 nm에서 흡광도를 측정 하였다. 음성대조군은 시료 대신 DMSO를 처리하였고 라디 칼 소거능은 백분율(%)로 나타내었다.
HMG-CoA 환원효소 억제 활성 측정
오미자 유산균 발효물의 3-hydroxy-3-methylglutar- yl-CoA(HMG-CoA) 환원효소 활성 억제를 확인하기 위해 HMG-CoA reductase activity assay kit(Sigma-Aldrich Co.)을 사용하였다. 즉 5 μL의 비 발효 오미자 분말, 오미자 유산균 발효물 또는 1 μL의 양성대조구 provastatin에 NADPH(4 μL)와 HMG-CoA(12 μL)를 넣고 assay buffer 로 최종 부피 200 μL가 되도록 맞추었다. 반응 혼합물에 2 μL의 HMG-CoA 환원효소를 첨가하고 340 nm에서 10분 간 흡광도를 측정하였다.
ACE 저해 활성 측정
Angiotensin-converting enzyme(ACE) 저해 활성은 ACE kit(Dojindo Molecular Technologies, Inc., Kuma- moto, Japan)을 사용하여 측정하였다. 즉 비 발효 오미자 분말 또는 오미자 유산균 발효물에 substrate buffer와 en- zyme working 용액을 넣고 37°C에서 1시간 반응시켰다.
이후 indicator working 용액을 넣고 상온에서 10분 반응시 킨 다음 흡광도(450 nm)를 측정하였다. 음성대조군은 시료 대신 증류수를 처리하였고, ACE 저해 활성은 백분율(%)로 나타내었다.
Phenolic acid 함량 측정
비 발효 오미자 분말과 오미자 유산균 발효물을 80% 에 탄올에 5 mg/mL 농도로 용해한 후 0.2 μm PVDF mem- brane filter로 여과하여 HPLC 분석시료로 사용하였다.
HPLC 분석조건은 C18 column(Mightysil RP-18 GP col- umn, 4.6×250 mm, 5 μm, Kanto Chemical, Tokyo, Ja- pan)을 사용하였고, 검출기는 FLD(Exλ: 250 nm, Emλ:
Fig. 1. Effect of fermented Schisandra chinensis on cytotoxicity of RAW 264.7 cells. Values are expressed as mean±SEM. *P<
0.05 significantly different from the control group. SC, non-fer- mented S. chinensis; FSC, fermented S. chinensis.
Fig. 2. Inhibitory effect of fermented S. chinensis on nitric oxide (NO) production. The production of NO was assayed in the cul- ture medium of cells stimulated with LPS (1 μg/mL) for 24 h in the presence of fermented S. chinensis at 200 μg/mL. Values are expressed as mean±SEM. *P<0.05 significantly different from the LPS-stimulated PBS group. SC, non-fermented S. chi- nensis; FSC, fermented S. chinensis.
395 nm)를 사용하였으며, 이동상은 A를 water(0.1% ace- tic acid) 용매, B를 acetonitrile 용매로 하여 0~2분까지 A : B를 92:8로 유지시켰으며, 27분까지 70:30, 50분까지 10:90, 51분까지 0:100, 60분까지 0:100, 61분까지 92:8, 70분까지 92:8 비율의 gradient system을 사용하였다. 유 속은 1.0 mL/min이었으며, 반응액은 10 μL를 주입하여 분 석하였다.
통계처리
모든 실험은 3회 이상 실시하여 얻은 결과들을 mean±
standard error of mean(SEM)으로 나타내었고, 각 실험 결과로부터 Student’s t-test를 구한 후 P<0.05인 경우 유 의성이 있는 것으로 판단하였다(SPSS 12.0.0, IBM Co., Armonk, NY, USA).
결과 및 고찰
오미자 유산균 발효물 처리에 따른 세포독성 평가 RAW 264.7 세포에 비 발효 오미자 분말과 오미자 유산균 발효물을 농도별(200, 1,000 μg/mL)로 처리하였을 때 세포 생존율에 미치는 영향을 평가하기 위해 MTT 분석을 실시하 였다(Fig. 1). 비 발효 오미자 분말과 오미자 유산균 발효물 을 200 μg/mL 농도로 처리한 모든 군은 100% 이상의 세포 생존율을 나타내었고, 1,000 μg/mL 농도의 처리구에서는 대조구 대비 비 발효 오미자 분말이 76.8%, 오미자 유산균 발효물은 73.7%로 세포생존율을 보였으므로, 향후 진행될 실험에서는 처리 농도를 200 μg/mL로 설정하고 진행하였 다.
오미자 유산균 발효물의 항염 활성 평가
체내에 생성된 NO가 정상적인 범위 내에서는 면역 조절, 혈관확장, 신경전달 등 신진대사 작용에 도움이 되지만, 염 증반응 과정에서 과다한 NO 생성은 염증매개체를 활성화함 으로써 세포 및 조직에 산화적 손상과 염증 등의 질병을 유
발한다(19). 세포에 LPS로 염증을 유발한 후 오미자 유산균 발효물을 처리하여 NO 생성 억제능에 미치는 영향을 평가 하여 Fig. 2에 나타내었다. 비 발효 오미자 분말과 오미자 유산균 발효물은 LPS 처리 후 PBS를 처리한 대조군(72.4 μM) 대비 각각 NO 생성량이 68.3, 61.5 μM로 유의적으로 감소하는 것을 확인하였고, 오미자 유산균 발효물은 비 발효 오미자 분말보다 10% 이상 NO 생성이 감소하는 것을 확인 하였으나, 통계적으로 유의적이지는 않았다. Nam 등(20)은 오미자 물, 에탄올, 메탄올 추출물에서 NO 저해 활성을 보고 하였으며, Guo 등(21)도 오미자 에탄올 추출물에서 농도 의 존적으로 NO를 소거하였다고 보고하였다. 또한, Choi 등 (22)의 연구에서는 황금 추출물의 유산균 발효 시 항염증 효과가 증진된다고 보고하였다. 이러한 결과를 종합해보았 을 때 유산균 발효를 통한 유산균과 천연물의 상호 대사과정 이 항염증 활성 성분을 증진시킨 것으로 생각되며, 따라서 비 발효 오미자 분말 자체로도 NO 생성 저해 활성에 영향을 미치는 것으로 확인되었으나 유산균에 의해 오미자를 발효 하였을 때 더 높은 항염증 효과를 기대할 수 있을 것으로 생각된다.
오미자 유산균 발효물의 항산화 활성 평가
DPPH는 질소를 중심으로 구성된 안정한 라디칼 화합물 로 피부노화, 면역기능 억제, 염증 유발, 기미, 주근깨 등의 원인이 되는 활성산소를 제거하는 능력을 DPPH 라디칼 소 거능으로 평가한다(23). 오미자 유산균 발효물에 대한 DPPH 라디칼 소거 활성 결과를 Fig. 3에 나타내었다. 비 발효 오미 자 분말의 DPPH 라디칼 소거 활성은 200 μg/mL 농도로 처 리 시 5%의 소거 활성을 나타내었으며, 오미자 유산균 발효 물의 경우에는 비 발효 오미자 분말보다 높은 DPPH 라디칼 소거 활성을 나타내었는데 200 μg/mL 농도로 처리 시 약
Fig. 3. DPPH radical scavenging activity of fermented S. chi- nensis. Values are expressed as mean±SEM. *P<0.05 signifi- cantly different from the no treated group. SC, non-fermented S. chinensis; FSC, fermented S. chinensis. Vit E as positive con- trol at 10 μg/mL.
Fig. 4. HMG-CoA reductase inhibitory activity of fermented S.
chinensis. Values are expressed as mean±SEM. *P<0.05 signifi- cantly different from the control group. SC, non-fermented S.
chinensis; FSC: fermented S. chinensis. Provastatin as positive control at 10 μM.
Fig. 5. ACE inhibitory activity of fermented S. chinensis. Values are expressed as mean±SEM. *P<0.05 significantly different from the control group. SC, non-fermented S. chinensis; FSC, fermented S. chinensis.
20%의 소거 활성을 나타내었다. 이는 오미자 추출물보다 오미자 발효 시 발효액에서 더 높은 항산화 활성이 관찰됨이 보고된 Cho 등(24)의 연구 결과와 유사함을 알 수 있었다.
오미자 유산균 발효물의 HMG-CoA 환원효소 활성 억제 평가
HMG-CoA 환원효소는 콜레스테롤 생합성 단계에서 작 용하는 rate-limiting enzyme으로써 스테롤이나 이소프레 노이드계 화합물의 생합성 경로의 중간단계인 메발로닉산 의 합성을 매개하는 역할을 한다. 이때 이 효소의 활성을 억제함으로써 콜레스테롤 저하 및 항동맥경화 효과를 나타 낸다(25). 따라서 오미자 유산균 발효물을 이용해 HMG- CoA 환원효소 활성 억제 효능을 평가하였다(Fig. 4). 비 발 효 오미자 분말은 대조구 대비 약 8% 감소한 것을 확인할 수 있었고, 오미자 유산균 발효물의 경우 약 21% 유의적으 로 감소하는 것을 확인하였다. Lee와 Lee(26)의 연구 결과 에 따르면 오미자를 이용해 제조한 약침액이 고지혈증 쥐의 간 내 HMG-CoA 환원효소 활성을 감소시킨다고 보고하였 다. 또한, 프로바이오틱스가 담즙산 가수분해 효소를 생산시
켜 혈중 콜레스테롤을 낮춘다는 연구(27)와 일치하는 결과 로서 비 발효 오미자 분말을 처리했을 때보다 유산균으로 발효시킨 오미자가 HMG-CoA 환원효소 활성을 큰 폭으로 낮춰준다는 것을 확인할 수 있었다.
오미자 유산균 발효물의 항고혈압 평가
혈압상승 기전인 레닌-안지오텐신-알도스테론은 레닌에 의해 생성된 안지오텐신Ⅰ이 ACE에 의해 말초혈관을 직접 수축시키고 신장에서 알도스테론 분비를 촉진시켜 강력한 혈압 상승을 발현시키는 안지오텐신Ⅱ로 전환된다. 이때 혈 압을 상승시키는 안지오텐신Ⅱ로의 전환을 막기 위해 전환 효소 ACE를 저해시킴으로써 혈압을 낮추는 데 기여한다 (28). 따라서 오미자 유산균 발효물의 항고혈압 활성을 평가 하기 위해 ACE 저해 활성을 측정하였다(Fig. 5). ACE 저해 활성은 대조구 대비 비 발효 오미자 분말 34%, 오미자 유산 균 발효물 44%로, 유산균을 넣어 발효시켰을 때 ACE 효소 억제 활성이 증가하였다. Park(29)의 보고에 따르면 오미자 당침 희석액의 발효 후 ACE 저해 활성이 더욱 높아졌으며, Choi 등(30)의 보고에서는 감귤 유산균 발효물의 ACE 저해 활성은 4.62~86.22%로 유산균 발효기간이 길어질수록 ACE 저해 활성이 증가하였고, 이상의 결과는 본 연구의 결과와 유사한 결과임을 알 수 있다.
오미자 유산균 발효물의 phenolic acid 함량
발효 전후의 오미자 추출물의 phenolic acid 조성을 분석 한 결과는 Fig. 6에 나타내었다. Homogentisic acid는 비 발효 오미자 분말은 51.797 μg/mL, 오미자 유산균 발효물 은 69.990 μg/mL로 발효 전보다 발효 후가 높게 나타났으 며, biochanin의 경우 비 발효 오미자 분말은 1.535 μg/mL, 오미자 유산균 발효물은 0.538 μg/mL로 발효 전보다 발효 후에 함량이 감소하였다.
발효과정 동안 세포벽에 결합하여 있는 폴리페놀 화합물 이 효소적 가수분해에 의해 유리되거나 2차 대사산물로서 생합성에 의해 페놀산으로 전환됨에 따라 함량이 증가하거
A
B
Fig. 6. Change in phenolic acid of fermented S. chinensis. A, standard curve; B, phenolic acid of fermented S. chinensis. SC, non- fermented S. chinensis; FSC, fermented S. chinensis.
나 감소한 것으로 생각되나, 유산균에 의해 페놀화합물의 생합성 또는 분해 대사경로는 구명되지 않았기 때문에 계속 해서 연구가 이루어져야 할 것으로 생각된다.
요 약
본 연구에서는 Streptococcus thermophilus 균주를 이용 하여 오미자 추출물을 발효시킨 후 생리활성을 평가하였다.
발효 전후의 오미자 추출물 200 μg/mL, 1,000 μg/mL 농도 를 RAW 264.7 세포에 처리하였을 때 1,000 μg/mL 농도에 서 독성을 나타내어 200 μg/mL를 이용하여 NO 저해능, DPPH 라디칼 소거능, HMG-CoA 환원효소 억제 활성, ACE 저해능을 평가하였다. 비 발효 오미자 분말에 비해 오 미자 유산균 발효물에서 NO 생성 감소, DPPH 라디칼 소거 능 상승, HMG-CoA 환원효소 활성 감소, ACE 저해능 상승 으로 비 발효 분말보다 생리활성에 효과적인 결과를 보여주 었다. 또한, phenolic acid 함량에 있어서 homogentisic acid와 biochanin이 변화된 것으로 보아 생리활성 상승에 두 phenolic acid 성분이 영향을 미치는 것으로 판단되나, 향후 구체적인 작용기전이 구명되어야 할 것으로 생각된다.
본 연구 결과를 종합해봤을 때 오미자 유산균 발효물을 건강 기능식품 기능성 소재나 가공식품 소재로 활용할 때 주요 대상으로 하는 건강 기능성을 증진시키는 데 기초자료로 활 용할 수 있을 것으로 생각된다.
감사의 글
본 연구는 농촌진흥청 국립농업과학원 농업과학기술 연구 개발사업(과제번호: PJ01191901)의 지원에 의해 이루어진 것임.
REFERENCES
1. Kim YH. 2016. Probiotics, prebiotics, synbiotics and human health. BT News 23(1): 17-22.
2. Ahn YT, Lim KS, Huh CS. 2006. Current state of functional yogurt in Korea. J Korean Dairy Technol Sci 24: 29-42.
3. Alander M, Satokari R, Korpela R, Saxelin M, Vilpponen- Salmela T, Mattila-Sandholm T, von Wright A. 1999. Persist- ence of colonization of human colonic mucosa by a probiotic strain, Lactobacillus rhamnosus GG, after oral consumption.
Appl Environ Microbiol 65: 351-354.
4. de Vrese M, Stegelmann A, Richter B, Fenselau S, Laue C, Schrezenmeir J. 2001. Probiotics－compensation for lactase insufficiency. Am J Clin Nutr 73: 421S-429S.
5. Seo JG, Lee GS, Kim JE, Chung MJ. 2010. Development of probiotic products and challenges. KSBB J 25: 303-310.
6. Lee HY. 2013. Approval of functional ingredient of health/
functional foods in Korea. Food Industry and Nutrition 18 (1): 1-7.
7. Park KY. 2012. Increased health functionality of fermented foods. Food Industry and Nutrition 17(1): 1-8.
8. Jeon JM, Choi SK, Kim YJ, Jang SJ, Cheon JW, Lee HS.
2011. Antioxidant and antiaging effect of ginseng berry ex- tract fermented by lactic acid bacteria. J Soc Cosmet Scien-
tists Korea 37: 75-81.
9. Lee JJ, Son HY, Choi YM, Cho JH, Min JK, Oh HK. 2016.
Physicochemical components and antioxidant activity of Sparassis crispa mixture fermented by lactic acid bacteria.
Korean J Food Preserv 23: 361-368.
10. Jung EB, Choi JH, Yu HJ, Kim KH, Lee SK, Hwang YI, Lee SH. 2013. Organosulfur compounds in fermented garlic extracts and the effects on alcohol induced cytotoxicity in CYP2E1-transfected HepG2 cells. J Korean Soc Food Sci Nutr 42: 342-347.
11. Lee YJ, Yoon BR, Kim DB, Kim MD, Lee DW, Kim JK, Lee OH. 2012. Antioxidant activity of fermented wild grass extracts. Korean J Food Nutr 25: 407-412.
12. Cho HE, Choi YJ, Cho EK. 2010. Antioxidant and nitrite scavenging activity and α-glucosidase inhibitory effect of water extract from Schizandra chinensis Baillon. J Korean Soc Food Sci Nutr 39: 481-486.
13. Kim MJ, Park E. 2010. Antioxidative and antigenotoxic ef- fect of Omija (Schizandra chinensis B.) extracted with vari- ous solvents. J Korean Soc Food Sci Nutr 39: 487-493.
14. Sung KC. 2011. A study on the pharmaceutical & chemical characteristics and analysis of natural Omija extract. J Kore- an Oil Chem Soc 28: 290-298.
15. Panossian A, Wikman G. 2008. Pharmacology of Schisandra chinensis Bail.: An overview of Russian research and uses in medicine. J Ethnopharmacol 118: 183-212.
16. Kim SR, Kim MR. 2012. Inhibition of foodborne pathogens and spoilage bacteria and their structural changes by ethanol extract of Schizandra chinensis Baillon. J East Asian Soc Diet Life 22: 109-119.
17. Bae SH, Jung EY, Kim SY, Shin KS, Suh HJ. 2010. Antiox- idant and immuno-modulating activities of Korean traditional rice wine, takju. J Food Biochem 34: 233-248.
18. Mensor LL, Menezes FS, Leitão GG, Reis AS, dos Santos TC, Coube CS, Leitão SG. 2001. Screening of Brazilian plant extracts for antioxidant activity by the use of DPPH free radical method. Phytother Res 15: 127-130.
19. Jeong H, Sung M, Kim Y, Ham H, Choi Y, Lee J. 2012.
Anti-inflammatory activity of Salvia plebeia R. Br. leaf through heme oxygenase-1 induction in LPS-stimulated RAW 264.7 macrophages. J Korean Soc Food Sci Nutr 41: 888- 894.
20. Nam SY, Lee JY, Ko JS, Kim JB, Jang HH, Kim HR, Lee
YM. 2014. Changes in antioxidant and antimicrobial activ- ities of Schizandra chinensis Baillon under different solvent extraction. Korean J Int Agric 26: 513-518.
21. Guo LY, Hung TM, Bae KH, Shin EM, Zhou HY, Hong YN, Kang SS, Kim HP, Kim YS. 2008. Anti-inflammatory effects of schisandrin isolated from the fruit of Schisandra chinensis Baill. Eur J Pharmacol 591: 293-299.
22. Choi WS, Kwon HS, No RH, Choi GP, Lee HY. 2013.
Enhancement of anti-inflammatory activities of fermented Scutellaria baicalensis extracts using Lactobacillus rhamno- sus. J Soc Cosmet Scientists Korea 39: 303-311.
23. Ammar RB, Bhouri W, Sghaier MB, Boubaker J, Skandrani I, Neffati A, Bouhlel I, Kilani S, Mariotte AM, Chekir- Ghedira L, Dijoux-Franca MG, Ghedira K. 2009. Antioxidant and free radical-scavenging properties of three flavonoids isolated from the leaves of Rhamnus alaternus L. (Rhamna- ceae): A structure-activity relationship study. Food Chem 116: 258-264.
24. Cho EK, Cho HE, Choi YJ. 2010. Antioxidant and anti- bacterial activities, and tyrosinase and elastase inhibitory ef- fect of fermented Omija (Schizandra chinensis Baillon.) bev- erage. J Appl Biol Chem 53: 212-218.
25. Hwang KA, Hwang YJ, Hwang IG, Song J, Cho SM. 2017.
Cholesterol-lowering effect of astringent persimmon fruits (Diospyros kaki Thunb.) extracts. Food Sci Biotechnol 26:
229-235.
26. Lee SH, Lee H. 2011. A study on the effect of herbal-acu- puncture with Schizandrae Fructus solution on hyperlipide- mia in rats induced by high fat diet. J Korean Acupunct Moxib Soc 28(2): 143-153.
27. De Smet I, Van Hoorde L, Vande Woestyne M, Christiaens H, Verstraete W. 1995. Significance of bile salt hydrolytic activities of lactobacilli. J Appl Bacteriol 79: 292-301.
28. Hong JH, Son BS, Kim BK, Chee HY, Song KS, Lee BH, Shin HC, Lee KB. 2006. Antihypertensive effect of Ecklo- nia cava extract. Korean J Pharmacogn 37: 200-205.
29. Park SC. 2014. Characteristics of fermented omija (Schizan- dra chinensis Baillon) sugar treatment extracts by Lactoba- cillus sp.. Korean J Microbiol 50: 60-66.
30. Choi SY, Kim SK, Youn UY, Kang DO, Choi NS, Mun MS, Lee SC. 2015. Antimicrobial and ACE inhibitory activ- ities of Citrus unshiu fermented with lactic acid bacteria.
J Korean Soc Food Sci Nutr 44: 1084-1089.
