[속슬렛 추출기의 구조]
[회전증발기]
기능에 이상을 일으키는 사포닌도 존재한다. 사포닌은 크게 두가지로 나뉘는데 스테로이드 계의 사포닌과 트리테르펜 계열의 사포닌이다.
트리테르펜계 사포닌은 넓게 분포하며 세네가근(Polygala senega), 윈지(Polygala속 애기원재), 도라지(Platycodon)등의 뿌리, 감초 (Glycyrhiza의 근경), 퀼리야피(Quilaja의 나무껍질)등이 대표적이다. 스 테로이드계 사포닌은 백합과 참마과 현삼과 등에 분포하며 살사근(백 합과Smilax)의 뿌리나 디기탈리스(현삼과 Digitalis)의 잎에 들어있는 디 기토닌, F-기토닌, 티고닌은 잘 알려져 있다. 동물계의 경우, 해삼류 의 트리테르펜계 사포닌, 불가사리류의 스테로이드계 사포닌이 알려 져 있다.
○ 속슬렛 추출기
추출을 시키고자 하는 시료를 원통여과지에 넣고, 추출시킬 용매를 용매플라스크에 넣는다. 이 때 시 료를 가루상태로 넣으면 표면적이 넓어지기 때문에 추출이 더 잘 일어난다. 용매플라스크를 가열하면 용매가 증발되어 올라가다 환류냉각기를 만나 응축 되어 추출관으로 떨어진다. 용매는 시료의 성분을 녹이고, 일정량의 용매가 추출관에 채워지면 사이펀 의 원리에 의하여 용매플라스크로 용액이 들어가게 된다. 이 과정을 반복하면 용매플라스크에 들어있는
용액의 추출성분의 농도가 점점 높아지게 된다. 추출을 끝내고 용매성 분을 증발시키면 추출성분만 남게 된다.
○ 회전 증발기
회전증발기는 회전농축기, 온수조, 진공펌프로 크게 세 부분으로 나뉜다. 시료를 포함한 용액을 넣은 둥근 바닥플라스크를 회전농축기에 연결시키 고, 진공펌프를 작동시킨다. 진공펌프가 둥근 바닥 플라스크의 압력을 낮춰주기 때문에 용매의 끓는점
[UV 흡광광도계]
이 낮아진다. 그 다음 온수조에 물을 채우고 온도를 높인다. 둥근 바닥 플라스크를 물에 반쯤 넣고 회전을 시키면 용액에서 용매가 증발되어 나온다. 증발된 기체는 냉각수를 지나 응축되어 또 다른 둥근 바닥플라 스크에 떨어지게 된다. 일반적으로 속슬렛 추출을 시킨 용액에서 용 매를 증발시킬 때 회전 증발기를 가장 많이 사용한다.
○ UV 흡광광도계
모든 물질마다 빛을 흡수하는 고유한 파장대 가 존재한다. UV 흡광광도계는 이 원리를 이용해 물질을 구별해내는 장치이다. 시료에 여러 파장 대의 빛을 비춰주어서 시료를 통과하여 나오는 빛의 강도의 변화를 측정한다. 그러면 그 시료가 어느 파장대에서 빛을 가장 흡수하는지 알아내 어 물질의 종류를 알아낼 수 있다. 각 파장대에 서 시료가 빛을 흡수하는 정도는 농도에 비례하
여서 증가한다. 따라서 이미 농도를 알고 있는 시료의 흡광 정도를 측 정하고 같은 파장에서의 미지 농도의 시료의 흡광 정도를 측정한다면 그 농도를 알아낼 수 있다.
○ 계면 활성제
계면(서로 다른 상의 경계)에 존재하고 있는 물 분자들은 액체 내부 에서는 다른 물 분자들이 끌어 당겨주지만 기체 방향에서는 그러한 요인이 없다. 때문에 계면에 노출된 물 분자들은 액체 내부에 있는 물 분자들보다 상대적으로 불안정하다. 따라서 액체의 물은 표면에 가급적 이면 공기와 접촉할 수 있는 분자들의 수를 줄여서 안정한 상태를 유 지하려고 한다. 계면활성제는 친수성부분과 소수성부분을 가지고 있 는 화합물으로 계면의 경계를 완화시키는 작용으로 비누나 세제 등에 이용된다. 계면활성제의 농도가 일정량 이상이 되면 계면활성제 분자 들끼리 모여 미셀(micelle)구조를 형성한다. 미셀구조는 계면활성제의 소수성 부분은 중심부에 모여 핵을 형성하고 친수성 부분은 물과 접
촉하는 외곽부분을 형성하는 구조로 기름과 같은 소수성물질이 미셀 의 안쪽부분에 위치하게 되어 안정화되며 물에 녹게 된다. 이를 용해 화(solubilization)라 하며 세제의 세척작용의 기본이 된다. 미셀구조는 농도가 임계 미셀농도 이상이고 온도가 임계 미셀 온도 이상일 때 생 성된다. 계면활성제는 약간의 화학구조를 변화시키는 것만으로도 특 성이 크게 변하기 때문에 다양한 종류가 존재한다. 계면활성제는 물 에 해리되었을 때의 친수성 부분의 전하에 따라서 음이온성, 양이온 성, 양쪽성, 비이온성으로 구분된다. 그 특성과 분류는 다음과 같다.
[계면활성제의 분류]
○ 색차계를 이용한 세척 효율의 측정
우리는 세척 효율을 측정하기 위해 IBC 규격에 따라 세탁 전, 후의 반사율을 측정하였다. 그리고 이러한 반사율을 측정하기 위해 색차계 를 사용하였다. 먼저, 반사율을 측정하여 세척 효율을 구하는 식은 다 음과 같다.
×
여기서 이 바로 우리가 구하고자 하는 세척 효율이고, , ,
등이 바로 우리가 측정하는 반사율이 된다. 먼저, 세척하기 전 측
정하는 오염포의 반사율이 이고, 세척하고 나서 측정하는 오염포의 반사율이 이다. 그리고 오염포를 만들기 전에 오염되지 않은 천의 반사율이 이다. 또한, 반사율은 색차계를 이용하여 측정할 수 있 다. 이를 식으로 표현하면 으로 표현할 수 있다. (여기 서 R이 반사율, L이 명도이다.)
□ 연구주제의 선정
○ 산업에서 폐기되어 버려지는 것을 다시 재활용할 수 있도록 주 제를 탐색해 보게 함
○ 학생들에게 문헌 및 신문기사 등을 제시하여 주제를 이끌어 낼 수 있도록 조언함
○ 선행 연구를 통하여 불가사리에 존재하는 물질을 알아보게 하고, 직접 물질을 추출할 수 있도록 추출 방법에 대해 학생 스스로 학습하 게 함
- 불가사리 속 사포닌을 추출하는 방법을 통하여 직접 물질을 추출함으 로써 조작 능력이 향상되도록 함
- 불가사리를 간단한 조작(끓임, 건조, 찜 등)을 통해 추출물의 양이 어떻게 달라지는지 확인함
○ 불가사리 추출물의 정성분석 및 정량분석하기
- UV 흡광광도계를 이용하여 불가사리 추출물의 정성분석 및 정량분석 을 통해 첨단기기를 활용하는 방법을 익힘
○ 세척효율 측정을 위한 방법을 구상하게 하고 실제 가능한지 실험해 봄 - 세척을 위한 다양한 방법을 서로 분담하여 실험하게 한 후, 실험
결과를 서로 분석하고 이를 해석하게 함
- 옷감의 종류를 달리하여 실험을 계획하였으나, 표준 오염포를 이용하 여 다시 실험을 진행함
- 실제 생활에 이용할 수 있도록 세척효율을 증진시킬 수 있는 방법을 찾아보도록 함
○ 세척효과 외 세척물에서 나타나는 현상 즉, 섬유의 손상도, 항균성 등을 탐구하게 함
- 배지를 이용하여 대장균에 대한 항균성의 유무를 확인해 봄 - 미생물을 다루는 조작능력이 향상되도록 함
○ 연구 논문 작성법 및 포스터 작성에 대해 알아보게 함
○ STEAM 연구의 이해와 앞으로의 연구에 대해 논의하게 함
□ 연구 방법
○ 불가사리(아모르) 추출물(사포닌)의 정성, 정량 분석(UV) ○ 불가사리 세척제와 일반 세척제의 세척효율 탐구
○ 불가사리 세척제의 세척효율 극대화를 위한 최적 조건에 대한 탐구 ○ 세척효과 외 세척물에서 나타나는 효과에 대한 탐구
□ 세부계획
○ 아모르 불가사리에 존재하는 사포닌을 추출하여 정성, 정량 분석을 한다.
- 용매를 통한 추출 및 UV-Vis 분석
- 추출이 최대로 될 수 있는 조건 탐구(추출 방법)
○ 불가사리 추출물을 이용하여 세척제로서의 가능성을 입증하고 일반 세척제의 세척효율을 비교 탐구한다.
- 계면활성제인 사포닌을 이용하여 세척제로서의 가능성 입증 - 접촉각 측정
- 오염포를 이용한 세척효과 탐구
○ 불가사리 세척제의 세척효율 극대화를 위한 최적 조건에 대해 탐구한다.
- 추출물의 양과 세척시간, 온도 등 다양한 조건에 따른 세척효율 탐구
○ 세척효과 외 세척물에서 나타나는 효과에 대해 탐구한다.
- 항균성에 대한 탐구 - COD에 대한 탐구
□ 연구 활동 및 과정
○ 월별 연구 추진 실적
주요 활동 시기 비고
문헌 조사 및 주제 선정 5월~7월 도서 불가사리 추출물 정성, 정량분석 7월~11월 추출 불가사리 추출이 최대로 될 수 있는 조건
탐구 7월~11월 UV 흡광광도계
불가사리 세척제와 일반 세척제의 세척
효율 비교 탐구 8월 접촉각 측정
불가사기 세척제의 세척효율 극대화를
위한 최적 조건에 대한 탐구 7월~11월 오염포
수질 오염 탐구 8월~9월 COD
항균성 탐구 10월~11월 대장균
결과 보고서 작성 11월 도서(작성요령)
결과 보고서 수정 및 보완 12월
○ 연구주제 1 : 불가사리 추출물 분석 및 수득률 증가 실험 1) 불가사리 속 사포닌 추출 방법
① 불가사리 시료를 준비한다.
② 불가사리 시료를 믹서기로 분쇄시켜 표면적을 최대로 증가 시켜준다.
③ 분쇄된 불가사리 시료 일정량을 추출 용매와 함께 5시간 끓 여준다.
④ 일반 추출법으로 추출하였을 경우, 불가사리 시료를 감압여 과를 통하여 걸러주어 건더기가 없는 추출 용액을 얻어낸다.
⑤ 추출 시 사용하였던 용매를 진공농축기를 통해 제거해 준다.
⑥ 농축된 추출물에 물을 가해준 후 잘 섞일 수 있도록 초음파 세척기에 담구어 놓는다.
⑦ 물에 녹인 추출물에 다이에틸에터를 가해 분별증류를 시켜
주어 추출물속 지방 성분을 분리해 준다.
⑧ 탈지한 추출물에서 부탄올을 이용하여 사포닌을 추출해 낸다.
⑨ 진공농축기를 사용하여 부탄올을 제거해 주어 최종적인 사 포닌 추출물을 얻어낸다.
2) 정성 분석 방법
① 추출된 용질이 포함된 용액을 준비한다.
② 용액을 둥근바닥 플라스크로 옮겨 회전증발기로 증발시킨다.
③ 증발 후 남은 물질을 3차 증류수 50ml로 희석하고, UV 흡 광 광도계로 물질이 흡수하는 빛의 파장 피크를 조사한다.
④ UV 흡광 광도계로 표준 사포닌 100ppm 시료가 흡수하는 빛의 파장 피크를 조사하여 ③에서의 피크와 비교한다.
3) 정량 분석 방법
① 추출된 용질이 포함된 용액을 준비한다.
② 용액을 둥근바닥 플라스크로 옮겨 회전증발기로 증발시킨다.
③ 증발 후 남은 물질을 3차 증류수 50ml로 희석하고, UV 흡광
광도계로 물질의 최고 흡수파장을 찾는다. (각 용액에 대해 200~500nm의 범위, 5nm 간격으로 survey scan을 실시하며 이 때 blank 슬롯에는 증류수가 담긴 큐벳을 삽입한다.) ④ 최대흡광파장에서 표준 사포닌 물질로 제조한 농도를 아는
용액의 흡광도를 측정하여 calibration curve를 작성한다, ⑤ 최대흡광파장에서 희석비율을 아는 추출물의 흡광도를 측정
한다.
⑥ ④에서 얻은 calibration curve와 추출물의 흡광도 값을 이용 하여 희석된 추출물의 농도를 알아내고 최종적으로 추출물 속 사포닌의 농도 및 추출률을 알아낸다.
4) 추출 방법에 따른 불가사리 추출물의 수득률 - 속실렛 추출기를 이용한 추출방법에 의한 추출
① 분쇄된 불가사리시료를 속실렛추출기의 원통여과지에 담고 용매플라스크에 에탄올 200ml를 담은 뒤 고정시켜 주고 용 매 플라스크를 70℃에서 5시간 끓여준다.
② 추출물과 에탄올이 혼합된 용매 플라스크 속 물질 중 추출 시 사용하였던 용매를 진공농축기를 통해 제거해 준다.
③ 농축된 추출물에 물을 가해준 후 잘 섞일 수 있도록 초음파 세척기에 담구어 놓는다.
④ 물에 녹인 추출물에 다이에틸에터를 가해 분별증류를 시켜 주어 추출물속 지방 성분을 분리해 준다.
⑤ 탈지한 추출물에서 부탄올을 이용하여 사포닌을 추출해 낸다.
⑥ 진공농축기를 사용하여 부탄올을 제거해 주어 최종적인 사 포닌 추출물을 얻어낸다.
⑦ 얻어낸 추출물의 무게를 측정하여 불가사리 추출물의 수득 률을 계산한다.
5) 용매의 종류, 추출 온도, 추출 시간에 따른 불가사리 추출물의 수득률
① 용매의 종류를 메탄올과 에탄올, 아세톤에 따른 추출과 추 출 온도에 따라, 시간에 따라 위와 같은 방법으로 추출한다.
② 얻어낸 추출물의 무게를 측정하여 불가사리 추출물의 수득 률을 계산한다.
○ 연구주제 2 : 불가사리 추출물의 세척 효과 실험 1) 불가사리 추출물의 계면활성제 입증 실험
① 커버 글라스 위에 증류수와 불가사리 추출물 수용액을 한 방울씩 떨어뜨려 유리와의 접촉각을 측정한다.
2) 불가사리 추출물과 일반 세제의 세척 효과 비교 실험 ① 오염포를 준비한다.
순면 Cotton Pigment/Sebum
Size 5*5cm
순수한 면에 오염물질을 묻힌 오염포이다.
② 색차계를 준비한다.
색차계 : MINOLTA 색차계 CR-10 측정경 : 8mm
측정용 광원 : 텅스텐 램프
표시 : Δ(L*a*b) /ΔE*ab, Δ(L*C*H)/ΔE*ab 재현성 : ΔE*ab : 0.1이내
(측정조건:백색판 측정 평균치)
L*a*b 라 하는 색 좌표로 색을 나타냄 L : 명도 0~100의 범위를 가짐
a*b : 색을 나타냄 x, y 좌표계와 같은 평면 좌표계 +a : red, -a : green, +b : yellow, -b : blue
③ 불가사리 추출물과 세제를 각각 같은 질량을 측정한다.
④ 세척 효율을 측정할 오염포의 명도를 측정해 놓는다.
⑤ 500mL 비커를 세제를 사용 하지 않고 세척한 후, 증류수 300mL를 채워 넣는다.
⑥ 교반기 위에 비커를 올리고 마그네틱 바를 비커 안에 넣는다.
⑦ 교반기의 회전수를 400RPM으로 설정한다.
⑧ 절반의 비커에는 불가사리 추출물을, 나머지 절반의 비커에 는 세제를 넣은 후, 오염포를 3장씩 넣는다.
⑨ 교반기를 각각 60분씩 작동시킨 후, 색차계를 이용해 천의 명도를 측정한다.
3) 여러 조건에 따른 세척 효과 실험 실행 - 추출물의 양에 따른 세척 효과
① 500mL 비커를 세제를 사용하지 않고 세척한 후, 증류수 300mL를 채운다.
② 교반기 위에 비커를 올리고 마그네틱 바를 비커 안에 넣는다.
③ 교반기의 회전수를 400RPM(1분당 400회 회전)으로 설정한다.
④ 각각의 비커에 추출물의 양을 1배, 2배, 3배를 넣는다.
⑤ 오염포(순면)를 비커에 넣는다.
⑥ 교반기를 각각 60분 동안 작동시킨다.
⑦ 교반기를 이용해 세탁한 천을 완전히 건조시킨 후 천의 명도 를 색차계를 이용해 측정한다.
- 시간에 따른 세척 효과
① 500mL 비커를 세제를 사용 하지 않고 세척한 후 증류수 300mL를 채운다.
② 교반기 위에 비커를 올리고 마그네틱 바를 비커 안에 넣는다.
③ 교반기의 회전수를 400RPM(1분당 400회 회전)으로 설정한다.
④ 각각의 비커에 불가사리 추출물을 넣는다.
⑤ 오염포(순면)를 비커에 넣는다.
⑥ 교반기를 각각 60분, 120분, 180분 동안 작동시킨다.
⑦ 교반기를 이용해 세탁한 천을 완전히 건조시킨 후 천의 명도 를 색차계를 이용해 측정한다.
- 온도에 따른 세척 효과
① 500mL 비커를 세제를 사용하지 않고 세척한 후 증류수 300mL를 채운다.
② 교반기 위에 비커를 올리고 마그네틱 바를 비커 안에 넣는다.
③ 교반기의 회전수를 400RPM(1분당 400회 회전)으로 설정한다.
④ 온도 센서를 스탠드와 테이프를 활용해 비커 내에 고정시킨다.
⑤ 교반기의 온도를 비교하고자하는 온도로 설정(15℃, 25℃, 35℃, 45℃)하고 비커내의 물의 수온이 평형을 이룰 때까지 기다린다.
⑥ 온도가 평형에 이르면 각각의 비커에 불가사리 추출물을 넣 는다.
⑦ 오염포(순면)를 비커에 넣는다.
⑧ 교반기를 60분 동안 작동시킨다.
⑨ 교반기를 이용해 세탁한 천을 완전히 건조시킨 후 천의 명도 를 색차계를 이용해 측정한다.
○ 연구주제 3 : 불가사리 추출물의 항균성 확인 1) 액체 배지 제작 및 E.coli 균주 액체 배양
① 50ml 삼각 플라스크에 LB Broth와 증류수 10ml을 넣고 고 온 가압 멸균기를 이용하여 120°C, 1.5기압에서 15분간 멸 균한다.
② 멸균이 끝난 플라스크를 식혀 클린벤치로 옮긴다.
③ 15ml conical tube에 삼각 플라스크의 액체배지를 옮겨 붓는다.
④ 고체배지에서 콜로니 상태로 배양한 E.coli 중 하나의 콜로 니를 루프를 이용하여 조심스레 떠서 액체배지가 든 15ml conical tube에 넣고, 루프는 70% 에탄올이 든 비커에 넣는다.
⑤ E.coli를 넣은 15ml conical tube의 입구를 알코올램프로 소 독한 뒤 뚜껑을 잘 닫아 밀봉하고 vortex하여 콜로니가 풀 리고 액체 배지에 잘 섞일 수 있도록 한다.
⑥ 37°C, 150rpm의 shaking incubator에서 24시간 동안 배양한다.
2) 고체 배지 제작
① LB Agar와 증류수 50ml을 100ml 삼각 플라스크에 넣고 마 이크로 피펫 팁, 핀셋과 함께 고온 가압 멸균기를 이용하여 120°C, 1.5기압에서 15분간 멸균한다.
② 멸균이 끝난 플라스크와 팁, 핀셋을 식혀 클린벤치로 옮긴다.
③ LB Agar를 식혀서 페트리 접시에 붓고 1시간 정도 굳혀서 뚜껑을 닫고 parafilm을 이용하여 밀봉, 냉장고에 보관한다.
3) 불가사리 추출물의 항균성 확인
① 마이크로 피펫을 이용하여 1)에서 배양한 E.coli 액을 2)에서 제작한 고체 배지 위에 올린다.
② 스프레더를 이용하여 균액이 흐르지 않고 배지에 모두 스며 들 때까지 골고루 도말한다.
③ 핀셋으로 페이퍼 디스크를 집어 배지의 정중앙에 놓고 핀셋 끝으로 살짝 눌러 고정한다.
④ 20ul 마이크로 피펫을 이용하여 불가사리 추출물 원액 10ul 을 페이퍼 디스크에 접종한다.
⑤ 불가사리 추출물을 접종한 E.coli 배지를 parafilm으로 밀봉 하여 37°C 인큐베이터에 넣고 배양한다.
⑥ 고체 배지에서 E.coli의 배양 시간이 적절한지 알아보기 위
하여 예비실험을 진행하였다. 예비실험에서는 균 도말 및 불가사리 추출물 접종 이후 37°C 인큐베이터에서 20시간 동안 E.coli를 배양하고 결과를 확인하였다. 하지만 E.coli가 충분히 자라지 못하여 클리어 존을 명확하게 관찰할 수 없 었다. 따라서 본 실험에서는 30시간 동안 E.coli를 배양한 뒤 결과를 관찰하기로 결정하였다.
3. 연구 결과 및 시사점 □ 연구 결과
○ 연구주제 1 : 불가사리 추출물 분석 및 수득률 증가 실험 결과 1) 정성분석 결과
① 표준 사포닌과 불가사리 추출물의 UV 흡광도
2) 정량분석 결과
초기 불가사리 질량 8.874g
추출물의 질량 0.680g
Calibration Curve (at 277nm) Abs = 0.00032*Conc + 0.01182 증류수 3ml로 묽힌 추출물의 흡광도 2.45
추출물의 농도 7619ppm
추출물 속 사포닌의 비율 3.36%
3) 추출 용매별 사포닌 수득률
<추출 용매별 사포닌 수득률>
수득률(%)
4) 추출 온도에 따른 사포닌 수득률
5) 추출 시간에 따른 사포닌 수득률
○ 연구주제 2 : 불가사리 추출물의 세척 효과 실험 1) 불가사리 추출물의 계면 활성제 입증 실험 결과
증류수
불가사리 추출물 함유된 증류수
2) 불가사리 추출물과 일반 세제와의 비교 실험 결과
세제 불가사리 추출물
초기반사율 나중반사율 세척효율 초기반사율 나중반사율 세척효율
DATA 14.9512 28.2999 22.6886% 14.6894 24.1744 16.0501%
3) 추출물의 양에 따른 세척 효과
4) 시간에 따른 세척 효과
5) 온도에 따른 세척 효과
○ 연구주제 3 : 불가사리 추출물의 항균성 확인
농도 에 따 른 불 가사리 추 출 물의 항 균 성
불 가사리 추 출 물의 농도 (%)
0.00 0.01 0.10 1.00 10.00 100.00
클리어존의반지름 (cm)
0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
100% 불가사리 추출물을 접종한 배지
□ 시사점
○ 연구의 내용을 통한 기여
- 바다 생태를 파괴시키는 불가사리에서 사포닌을 추출하여 이를 활용 하여 세척제로 쓰는 방안을 제시함. 재활용을 통해 다시 산업에 사용 할 수 있는 계기를 만듦
○ 과학적 탐구능력 향상
- 추출 방법 및 첨단 기자재의 사용, 세척시 통제해야 할 변인, 세균 배양 등을 통해 학생들로 하여금 과학적 탐구 능력이 향상됨 ○ 융합적인 사고 향상
- 폐기물을 재활용하여 실생활에 다시 사용할 수 있도록 다양한 사고 를 하며 과학뿐만 아니라 기술 공학적인 측면을 다루어 융합적인 사고를 향상시킴
○ 교사의 연구역량 강화
- 실제 화학에서의 분석에 그치지 않고 이를 실생활에 사용하려는 의도를 통해 교사 스스로 융합적인 사고의 필요성을 공감하게 되고 연구역량도 강화됨
○ 연구 문화 확산
- 본교의 연구 중심 교육과정의 취지에 맞추어 연구 문화 확산에 기여 함
4. 홍보 및 사후 활용
□ 후속 연구
○ 불가사리를 이용한 바이오차를 연구하여 이를 활용할 수 있는 방안을 강구하고자 함
□ 사후 활용
○ 연구 결과의 우수성에 따라 산업 분야 방법의 논문을 게재할 예정이 며, 이를 통하여 산업에 응용할 수 있는 초석을 다지고자 함 ○ 불가사리처럼 산업에서의 폐기물을 재활용하여 다시 산업에 유용하
게 사용할 수 있는 연구 문화에 기여하고자 함
5. 참고문헌
○ 김광호, 세탁기의 세척 성능 측정방법 출원번호 : 1019950018851 (1995)
○ A. Lee, S. Yang, H. Kim and M. H. Seo, Analysis of Washing Efficiency by Mechanical Action Type, Proceedings of the Korean Textile Conference, 39(2), 67-70(2006).
○ Soon Hyun Cho and Sung Kwon Ko, Analysis of Ginsenosides of Black Ginseng, Yakhak Hoeji Vol, 48, No.6, 490-494(2005)
○ Sang-Jun Han, HPLC/MS/MS Method for Determination of Soyasponins in the Soybean Varieties, Korean J. Crop Sci., 56(3), 244-249(2011).
○ ‘Dr. Lange’, Fundamentals of Colorimetry