총 CK 활성도 측정에 오류를 보인 4예 보고 권희정

임상병리와 정도관리：제24권 제1호 2002

J. Clin, Pathol. & Quality Control 2002：24：163-165

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총 CK 활성도 측정에 오류를 보인 4예 보고

권희정․서은주․민기옥

가톨릭대학교 의과대학 임상병리학교실

An Error in Measurement of Total CK Activity - A report of 4 cases -

Hi Jeong Kwon, Eun Joo Seo, and Ki Ouk Min

Department of Clinical Pathology, College of Medicine, The Catholic University of Korea, Seoul, Korea

We recently experienced 4 cases of patients with falsely low total CK level, even though their actual levels were very high. At first tests, 3 of them revealed lower than 10 U/L with a warning sign of abnormal linearity from autoanalyzer and one of them showed the level within reference range (70 U/L; reference ranges, 55-215 U/L) without any warning sign. We used Hitachi 747 automatic analyzer for the evaluation. We got proper results when we diluted five to twenty fold the samples and tested them again. One of them was diluted 5 fold, one 10 fold, and two 20 fold and the results after dilution were from 12,876 to 39,780 U/L. Early consumption of the substrate seems to be the reason of falsely low level. LD activity of the same samples showed higher than reference range in all cases. We recommend the total CK level of the specimen to be rechecked when total CK is very low and the results of other related markers show high level.

Key Words：Creatine kinase, Falsely low CK, Linearity

본 논문은 2001년도 가톨릭의대 성바오로병원 임상연구비지원에 의함

교신저자：서은주

우) 130-709 서울시 동대문구 전농동 620-56 성바오로병원 임상병리과

전화：(02)958-2394, FAX：(02)957-8836 E-mail：ejseo@catholic.ac.kr

Creatine phosphate+ADP Creatine + ATP

CK

서 론

총 creatine kinase(CK) 활성도는 응급검사나 일반검 사로 흔히 측정하는 검사종목이며 총 CK 활성도의 측정은 급성심근경색이나 골격근 질환의 진단에 중요한 검사중 하 나이다.

CK의 활성은 다음과 같은 일련의 효소작용의 결과로 얻 어진다[1].

ATP+Glucose glucose-6-phosphate + ADP

hexokinase

Glucose-6-phosphate + NAD

6-phosphogluconate + NADH G6PD

2ADP adenylate kinase ATP + AMP

총 CK 활성도가 매우 낮음에도 불구하고 전기영동 시에 육안으로 확인되는 형광띠가 매우 강하게 보이는 경우가 드 물게 있는데, 이런 검체를 희석하여 다시 검사하여 보면 참 고치보다 매우 높은 결과를 보인다. 처음 검사시에 매우 낮 은 총 CK 활성도가 나왔지만 희석 시 매우 높은 CK 활성 도가 확인되었기에 보고하는 바이다(Table 1).

총 CK 분석은 Hitachi 747-100 자동분석기(Hitachi,

Tokyo, Japan)와 아산테크 CPK(아산제약, 화성, 한국)

시약을 사용하였다. 참고범위는 55-215 U/L이었고 직선

성은 3,000 U/L 이하였다.

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Table 1. CK levels(U/L) and Dilution folds

Dilution fold Patient 1 Patient 2 Patient 3 Patient 4

1 70 2 3 5

5 13,920 12,876 3 5

10 16,070 12,860 3 5

20 16,900 11,500 39,780 19,420

30 9,660 37,500 18,750

증 례 증 례 1

환 자：여자, 39 세

주 소：열흘 전부터 얼굴에 발진

현병력：열과 오한으로 약물을 복용한 후 열흘 전부터 얼굴에 발진이 나서 내원하여 피부근염 및 약물유발성 간염 진단하에 입원

과거력 및 가족력：없음 이학적 소견：특이 사항 없음

검사소견：혈색소 13.0 g/dL, 백혈구 5.0×10

/L, 혈 소판 302×10

/L, AST 714 U/L (참고치：13-36), ALT 340 U/L (5-33), LD 2,143 U/L (218-472), 암 모니아 88 μg/dL (12-66), ALP 155 U/L (96-254), GGT 24 U/L (8-48), 총빌리루빈/직접빌리루빈 0.3/0.2 mg/dL (0.3-1.2/0-0.2), CK-MB 224 μg/L (0-6), 마이 오글로빈 >500 μg/L (19-92), 트로포닌 I<0.5 μg/L (0-0.5), HBsAg(-), anti-HBsAb(-), anti HCV Ab(-), 항핵항체(+);homogenous+speckled형, 항 dsDNA IgM 항체(-), 항 dsDNA IgG 항체(+), 항 Smooth muscle 항체(-), 항 SS-A/Ro 항체(-), 항 SS-B/La 항체(-), ANCA(-), 항 Jo1 항체(-), 항 Scl-70 항체(-), 항 cardiolipin IgG(-), 항 cardiolipin IgM(-), Lupus anticoagulant(-), C3 95.6 mg/dL (90-180), C4 16.6 mg/dL (10-40), 총 CK 70 U/L

증 례 2

환 자：남자, 43 세 주 소：발작

현병력：알코올 금단증 발작, 진전섬망 진단 하에 입원 과거력 및 가족력：없음

이학적 소견：특이 사항 없음

검사소견：혈색소 14.3 g/dL, 백혈구 9.4×10

/L, 혈 소판 136×10

/L, 혈당 123 mg/dL (70-100), 총단백 6.5 g/dL (5.8- 8.1), 알부민 3.6 g/dL (3.8-5.1), AST 134 U/L, ALT 54 U/L, LD 771 U/L, CK 2 U/L, ALP 163 U/L, GGT 692 U/L, 총빌리루빈/직접빌리루빈 1.9/0.7 mg/dL, 아밀라제 88 U/L(50 -160)

증 례 3

환 자：남자, 43 세 주 소：호흡곤란

현병력：물에 빠진 후 급성 호흡곤란 증후군으로 입원 과거력 및 가족력：없음

이학적 소견：특이 사항 없음

검사소견：혈색소 15.5g/dL, 백혈구 11.3×10

/L, 혈 소판 250×10

/L,

혈당 120 mg/dL, BUN 48.3 mg/dL(8-20.0), Crea- tinine 2.2 mg/dL(0.6-1.3), AST 702 U/L, ALT 231 U/L, LD 2,194 U/L, CK 3 U/L, ALP 211 U/L, GGT 154 U/L, 총빌리루빈/직접빌리루빈 0.8/0.3 mg/dL, 요산 13.3 mg/dL(4.0-7.0), 아밀라제 271 U/L

증 례 4

환 자：남자, 47 세 주 소：발작

현병력：알코올 금단 발작, 알코올성 간염, 진전섬망 진 단 하에 입원

과거력 및 가족력：없음 이학적 소견: 특이 사항 없음

검사소견：혈색소 11.6g/dL, 백혈구 18.8×10

/L, 혈 소판 72 × 10

/L, AST 1,524 U/L, ALT 243 U/L, LD 4,226 U/L, CK 5 U/L, ALP 162 U/L, GGT 238 U/L, 총빌리루빈/직접빌리루빈 1.9/0.6 mg/dL 요산 9.5 mg/dL, 총단백 5.1 g/dL, 알부민 2.9 g/dL, CK-MB 103.73 μg/L, 마이오글로빈 >1,000 μg/L, 트로포닌 I 0.14 μg/L

고 찰

총 CK 분석에는 지체기(lag phase)가 있는데 이는 분

석물질의 혼합물에 기질이나 혈청을 넣은 후 반응의 속도가

느리게 증가하는 것이다. 전형적인 지체기는 적절한 분석환

경하에서 25℃에서는 110초, 30℃에서는 90초, 37℃에서

는 60초이다. 이러한 현상은 실제 검사에 적용할 때 중요한

점으로서, 측정 시간을 적절하게 조절하지 못하면 부정확하

고 낮은 반응의 원인이 될 수 있기 때문이다. 첫 번째 반응

총 CK 활성도 측정에 오류를 보인 예 보고

165 의 시작 후에 발생하는 지체기 동안에, 생성물의 농도는 항

정상태(steady state)에 도달한다. 두 번째 반응의 속도는 지시효소의 활성과 기질(즉 첫 번째 반응의 생성물)의 농도 에 의존한다[2].

효소 측정시 일정한 반응 속도를 보이는 동안에 속도는 효소의 양에만 의존하고 기질 양에 무관하다. 측정한도 이 상인 검체에서는 이 기간 동안에 측정을 하려면 항온반응기 간을 줄여야하는데 높은 효소 활성도를 보이는 경우에는 반 응이 너무 빨라서 이것이 어렵거나 불가능한 경우가 있다 [2].

증례들의 경우 총 CK 활성도가 매우 낮음에도 불구하고 전기영동 시에 육안으로 확인되는 형광띠가 매우 강하게 보 여서 검체를 희석하여 다시 검사한 결과 참고치보다 매우 높은 결과를 보였다. 희석하지 않은 검체로 실시한 검사에 서 3예는 10 U/L이하로 자동분석기에서 비정상적인 직선 성의 경고 표시가 있었다. 증례 1 에서는 어떠한 경고 표시 도 없이 참고치내의 결과(70 U/L; 참고치, 55-215)를 보 였다. 동시에 측정한 LD, 마이오글로빈 등은 참고치보다 높은 결과를 보였다.

총 CK활성도에 영향을 주는 물질은 ADP, citrate, fluoride, nitrate, acetate, iodide, bromide, malonate, L-thyroxine. urate, cystine[2], chloropromazine[3]

같은 약물 등이 효소반응을 억제하며, 용혈된 검체에서 실 제보다 높은 결과를 보이고[4, 5], 헤파린을 사용한 혈장을 이용하였을 경우에는 헤파린 양에 따라서 높거나 낮은 활성 도를 보인다[6]. Ca

와 같은 내인성 억제제가 존재하기 때문에 효소 반응을 시킬 때 혈청의 양에 따라서 측정되는 활성도가 달라진다. 그러므로 높은 수치를 보인 총 CK를 생리적 식염수로 두 배 희석하여 검사하면 측정치가 10 % 정도 증가한다고 한다[2].

총 CK 활성도 측정을 의뢰한 검체 모두 전기영동검사를 의뢰하는 것이 아니기 때문에 전기영동만으로 이러한 예를 모두 발견할 수는 없다. 급성심근 경색의 경우에는 대개 총 CK 활성도 외에, CK-MB, 트로포닌, 마이오글로빈, LD, AST 등도 증가하는 양상을 보인다. 그러므로 총 CK 활성 도가 매우 낮고 다른 연관된 검사들의 결과가 높을 때 희석 한 후 재검을 하는 것이 필요하다고 생각한다.

요 약

실제로는 매우 높은 총 CK 활성도를 가졌으나 검사 시

에 매우 낮은 결과치를 보인 4예를 보고한다. 증례들의 경 우 총 CK 활성도가 매우 낮음에도 불구하고 전기영동시에 육안으로 확인되는 형광띠가 매우 강하게 보여서 검체를 희 석하여 다시 검사한 결과 참고치보다 매우 높은 결과를 보 였다. 희석하지 않은 검체로 실시한 검사에서, 이중 3예는 10 U/L이하이면서 자동분석기에서 비정상적인 직선성을 보인다는 경고가 있었으나, 한 예에서는 참고치 내의 결과 를 보였고(70 U/L; 참고치 55-215 U/L), 자동분석기에 서 경고가 없었다. 이들 검체를 5-20배 희석하여 다시 검 사를 실시하였다. 1예는 5배, 다른 1예는 10배, 나머지 2 예는 20배로 희석하여 검사를 하여서 얻은 결과치는 12,876-39,780 U/L 이었다. 이들은 CK의 농도가 너무 높아 기질이 조기에 소진되어 실제 반응 측정시에는 반응이 거의 일어나지 않아서 매우 낮은 결과치를 보인 것으로 생 각된다. 동시에 측정한 LD 활성도는 모든 예에서 참고치 이상이었다. 저자들은 다른 연관된 검사들의 결과치가 참고 치보다 높으면서 총 CK 활성도가 매우 낮은 경우는 검체를 희석하여 총 CK 검사를 다시할 것을 권유한다.

참 고 문 헌

1. Dufour DR, Lott JA, Henry JB. Clinical enzymology. In:

Henry JB, ed. Clinical diagnosis and management by laboratory methods, 20th ed. Philadelphia: WB Saunders, 2001:281-303.

2. Moss DW and Henderson AR. Clinical enzymology. In:

Burtis CA and Ashwood ER, ed. Tietz textbook of clinical chemistry, 3rd ed. Philadelphia: WB Saunders, 1999:617- 721.

3. Brazeau GA and Fung HL. Interferences with assay of creatine kinase activity in vitro. Biochem J 1989;257:619-21.

4. Greeson JK, Farber SJ, Dubin SB. The effect of hemolysis on creatine kinase determination. Arch Pathol Lab Med 1989;113:184-5.

5. McKinney CD and Brubs DE. Predicting the effect of hemolysis on measured creatinine kinase: a caveat. Arch Pathol Lab Med 1992;116:7-8.

6. Andrejat G, Fitzgibbon L, Gilis R, Rodgers J, Doumas BT.

Heparin interference in creatine kinase assays. Clin Chem

1982;28:1718-9.