鍵銀을 利用한 細網鐵維梁色法

대한임상병리사회지 : 제 22권 제 l호 1990

鍵銀을 利用한 細網鐵維梁色法

漢陽大學病院 組織病理.科

吳 根 榮

1 . 서 론

세망섬유는 일반적으로 널리 쓰이는 hematoxylin

및 eosin 염색법으로 명확하게 분리염색하기 어려우

며 알카리 존재하에서 ammoniacal silver ^착염이 세망섬유에 흡착하는 성질을 이용한 도은법에 의해 서야 비로소 특정적으로 분리염색된다

도은염색법은 세망섬유의 장기 내에서의 구축이 나섬유와세포의 관계 등을분명히 할뿐아니라종 양의 분류와 병변의 정도 등을 판정하는데 중요한 염색법으로서 들 수 있다.

도은염색법 중에서 Pap법은 섬세한 섬유까지 염 색가능하며 또한 색채적으로도 다채로와 아름답다 그러나 조직절펀을 띄우는 법으로 도은염색을 하 기 때문에 조작이 약간 번잡한 점파 한 번에 많은 표 본을 처리할 수 없는 점 등 일반검사법에는 적응할 수 없으므로 기술해셜은 생략한다

여기에서는 일반검사에서 많은 시설에 이용되고 있다고 추정되는 도은법파 Gomori법만을 들어 기술 적인 해설을 하고자 한다.

1. 세망섬유(호은섬유)

세망섬유는 간엽에서 분화될 때에 최초로 출현하 는데 성인이 되어감에 따라서 교원섬유로 변한다고 한다.

세망섬유는 일반적으로 소성결합조직 (陳性結合組 織) 중에 혼재하여 있으며 특히 상피나 내피 아래의 기저막， 지방조직， 간， 신장， 비장， 림프절， 흉션，

펀도선 및 골수 등 망상구축으로서 널리 분포되어 있다

종래 고립된 섬유로 생각되어 왔으나 근년 들어 전자현미경에 의한 초미세구조적 관찰에 의해 교원 섬유의 제일 버금가는형 콜라겐 III형인 젓이 판명되 었다.

세망섬유는 교원섬유의 세섬유의 작은 덩어리로 가늘게 분지된 그물 내지는 격자상을 형성하고 있으 므로 격자섬유라고도 불려진다. 또한 이 섬유는 은 에 대한 친화성이 매우 높다는 점에서 호은섬유라고 도 불려진다

참고:교원섬유의 분류

Bloom과 Fawcett(A Texbook of Histology) 와 P . R. Wheater들 (Functional Histology) ^{은 교원 섬} 유를 그 섬유형태와 아미노산의 조성 및 물리적 성 질 등에 의해 네 종류로 분류하고 있다.

I 형 : 일반적인 섬유성 결합조직， 힘줄， 뼈에 존 재

II 형 : 초자연골기질에 존재 III형 : 세망섬유 중에 존재 IV형 : 기저막 중에 존재

2. 비상피성 종양 진단의 도은법

일상 병리진단학에서 도은법의 응용은 대단히 유 용하다. 여러 가지 새로운 검사기술(조직화학， 면역 조직화학 등)이 일반화되고 있는 오늘날에도 여전히 그 중요성을 잃지 않고 있다.

예 를 들면 hematoxylin 및 eosin 염 색 에 서 상피 성 유래의 종양인지 또는 비상피성인지의 구별이 어려 운 경우에도 도은법이 유용하게 쓰인다. 그러나 그 위력을 발휘하는 것은 다채로운 형태를 보이며 때때 로 감별진단이 어려운 비상피성 종양， 특히 연부(軟 部)육종에 있어서이다. 개개의 연부육종 증례에 있 어서 세포학적 특정을 어느 정도 파악하여 감별진단 을 좁혀두면 좋다. 세망섬유의 굵기， 양상， 종양세 포와의 관계， 혈관파의 관계 등의 소견이 선배들에 의해 가성인 곳까지 확럽되어 진단에 도움을 준 경 우가 적지 않다. 방추형세포를 주체로 하는 육종에 도 여러 종류가 있지만 평활근육종， 섬유육종， 악성

m

…

사진 1. Watanabe 도은염 색 (paraffin 7 μm) 후복막 종양을 염색하였다. 흑색으로 염색된 세망 섬유가 종양세포를 구획하는 것처럼 증식되어 있고 종양세포의 덩어리상 배열의 종단변에서는 곧게 뻗 었으며 횡단변에서는 상자속에 들어있는 모양을 하 고 있다.

사진 3. Watanabe 도은염 색 (paraffin 7 μm) 비공종양을 염색하였다. 흑색으로 염색된 세망섬 유가 포파상(服葉狀) 구조를 보여주는데 포파 내에 도 뻗어있는 것이 인정된다. 교원섬유는 갈색을 띈 다

신경수종의 감별을 예로 들어 본다. 평활근육종은 덩어리상의 배열을 특징으로 하며 그의 종단상， 횡 단면이 관찰되고 미세 및 중등도 굵기의 세망섬유가 종양세포를 구획하는 것처럼 관찰된다(사진 1) . 여 기에 대해 악성 신경수종에서는 보다 섬세한 세망섬 유가 종양세포를 따라 곧장 뻗는 것이다. 지방육종 (사진 2), _{횡문근육종(사진} 3), 혈관육종， 골막육종 등에 있어서도 도은상(鍵銀像)에 특정을 찾아낼 수 가 있다. 혈관육종의 진단은 내피세포의 세포학적 특정뿐만 아니라 다소라도 관강(管뺨)형성 vasofor-

‘!

사진 2. Watanabe 도은염 색 (paraffin 7 μm) 복부종양을 염색하였다. 크고 작은 지방육종세포 가 흑염된 미세한 세망섬유에 둘러싸여있고 혈관외 막에 종양세포가 밀착되어 있는 것이 특정이다.

사진 4. Watanabe 도은염 색 (paraffin 7 μm) 늑골종양을 염색하였다. 종양세포를 둘러쌓은 연 골소와양 구조의 벽은 검게 도은되며 종양세포의 세 포돌기를 따라 세망섬유가 깃털 모양으로보이고，연 골기질 내의 교원섬유는 갈색을 띈다

mation을 수반하는 점이 중요하며 이것도 도은법으 로 쉽게 파악할 수 있다. 연골육종(사진 4), 양성 연 골아종에 있어서도 세망섬유의 양상에 특정이 있다.

원형세포를 주체로 하는 육종， 예를 들면 악성림 프종， 신경아종， 간엽성 연골육종 미분화 횡문근육 종 (ij융兒型 ， n월뚫型) 및 소세포성 미분화함을 포함한 감별진단상에서 도은이 매우 유효하다. 그러나 신경

아종파 Ewing 육종의 도은상에는 차이를 구별하기

어렵다. 조직진단의 확실한증례에서 도은을충분히 경험을 통하여 그 결과를 음미하게 된다.

않

사진 5. Gompri 도은염색 (paraffin 6μm) 경 부립 프절을 염 색 하였 다 . Potassium permanga- nate에 1분간 산화， 도은액에 2분간 도은하였다. 미 만성으로 침윤한 종양세포는 적갈색을 띄며 그 사이 에 소량의 세망섬유가 보인다.

3. 세망섬유의 도은염색법

세 망섬 유의 도은염 색 법 은 1904 년 Bielshowsky가 신경축색섬유의 염쩍법으로 고안한 도은법을 Maresch가 1905년에 변형한 것으로 이것은 은착염 을 세망섬유에 침착시켜 환원액으로 처리하여 은입 자 덩어리를 만들어， 이 덩어리가 적당한 크기이변 흑색으로 보이고 작으면 적~잘색으로 밖에 보이지 않는 원리를 이용한 것이라 한다. 그후 Perdrau, Gordon파 Sweet, Gomori, Foot, Wilder, Wata- nabe, N aoumenko와 Feigin들이 여 러 면 에 서 개 량 하여， 방법에도동결절편법보다파라펀절편밥으로，

파라펀절펀법에도 절펀부유법보다 절편부착법으로 발전하여 왔다.

세망섬유의 도은법은 어떤 방법이든지 기본적으 로 다음의 107}지 순서로 이루어져 있다. 산화-환 원·탈색-매염-도은-은의 치환-조색 ·분별-정 착-후염색 -탈수 • 투명 -봉입이다.

1) 염색천 도은염색법에 대한 천반척인 주의사항

CD 도은염색에 사용하는 유리기구류는 실험기구 용세정제 등으로미리 잘닦고충분히 수세한후증 류수로 행구어 사용한다.

@ 도은염색액의 vat는 이중덮개인 것을 사용하 여 암모니아가 증발하지 않도록 한다.

@ 염색시 사용하는 금속제의 펀셋은 염색액을 오 염시키므로 비금속제인 것을 사용한다.

@ 수세， 행굳에 사용하는 물은 정제수(탈이온 수)가 좋으나 수질관리에 각별히 주의하여 염소나

그림 6. Gomori 도은염색 (paraffin 6μm) 경 부림 프절을 염 색 하였 다 . Patassium permanga- nate에 30초간 산화， 도은액에 2분하였다. 산화가 약간 부족한듯하며 미만성으로 침윤한 종양세포의 핵이 짙게 염색되어 보인다. 그 사이에 가는 세망섬 유가 보인다.

금속의 혼입을 방지한다. 필히 도은액의 사용하는 물은 재증류수가 좋다.

@ 도은염색에 사용하는 염색병은 전용의 것을 준 비하여 염색계열을 셋트로 만들어 쓰면 다서 한복하 여 사용할 때는 증류수로 행구는 것만으로 충분하여 펀리하다.

2) 도은용액 만들빼 주의사항

@ 도은염색의 성공파 실패는 ammoniacal silver

용액을 만드는데 달려 있다.

Ammoniacal silver 용액은 사용할 때마다 새로 만들고 시약은 양질의 신선한 것을 사용한다.

Potassium hydroxide (sodium hydroxide) ^{수 용}

액은 매번 사용할 때마다 새로 만든다.

@ 좋은 결과를 얻기 위해서는 도은액 줌의 암모 니아와 알카리의 양을 적당한 비율로 유지하는 것이 중요하다.

岩華들에 의하면 알카리/암모니아의 비가 크게 되 면 염색이 짙게되고 작아지면 염색은 짧게 된다고 한다. 특히 암모니아의 양이 파잉으로 되지 않도록 주의를 하는 것이 중요하다. 이때 작은 파럽상의 산 화은 침전을 몇개 남겨둔다.

@ 여름철에 도은액을 만들 때에는 증류수를 냉각 시켜 사용하면 좋은 결과를 얻게 된다.

@ 사용후 도은액을 방치하면 뢰은(짧銀)이 생성 되어 위험하다. 신속하게 염산을 가하여 염화은의 형태로 보존하며 폐기처리는 전문업자에게 위탁한 다. 직접 하수도에 흘려보내서는 안된다.

-134 -

양성 대조표본 (control slide)

미지의 조직을 도은염색하는 경우에는 반드시 대 조표본으로서 간， 비장， 림프절과 같이 세망섬유가 많은 조직에 염색한 후 염색이 찰되는 절펀을 준비 하여 이것과 동시에 염색하여 염색상태나 비특이척 인 은입자의 침확 등을 체크하면서 실시하는 것이 중요하다.

표본제작

고정 : 10-20% 중성 formalin 용액

포매 및 박절 : 일반법에 따라 파라핀 포매를 하고 5-8μm로 박절한다.

부착 : 깨끗한 slide glass에 비교적 떨어지기 쉬운 골(뼈)조직 같은 것은 0.2-0.25% gelatin액을 부 유옹수조에 가하여 그곳에서 절펀을 잘 핀후 slide에 부착하면 염색도중 박리되는 것을 방지할 수 있다.

。 Watanabe의 세맘섬유 도은염색법

시약

Ammoniacal silver 용액 Watanabe {i，度邊) 法

10% silver acetate ... 10 ml 4% potassium hydroxide(sodium) ... 5 ml Ammonia water (28%)

걷튼 e 까-

0 ,,-'-

마개 달런 삼각 flask에 10% silver acetate 수용 액 10ml를 취 하고 여 기 에 4% potassium hydroxi- de 수용액 또는 4% sodium hydroxide 5 ml를 가한 다. 이때 혹갈색의 침전이 생성된다. 이 용액을 진 탕하면서 ammonia water를 적하하여 작은 침전이 약간 남을 정도에서 멈춘다. 이 용액에 증류수를 가 하여 총량이 100 ml되게 만든다. 이-용액은 사용직 전에 증류수로 2배 희석 사용한다.

(Naoumenko-Feigim법 )

8% ammonium acetate 수용액 ... 7ml

증류수 ... 35 ml 4% sodium hydroxide ... 8 ml 10% silver acetate ^수용액 ... 3.8 ml

환원액

Formalin원 액 ... ~ ... 1 ml 2% ferric alum^{lron alum) ... 2 ml

증류수 ... , ... 97 ml

정착액

사진용 산성경막정착액 5-20배로 희석 사용한 다.

0.5% potassium perma^Q.ganate

Potassium permanganate ... O. 5 g

증류수 ...

…… ...

Oxalic acid ...

…

증류수 ... … ... 100 ml

2% ferric alum'

Ferric alum (ammonium sulfate) ... 2 g

증류수 .... ………… ... …… .. ………100ml

Ferric alum은 자색을 띄는 신선한 결정을 사용한

다. 10% 원액을 만들어 두고 사용할 때마다 희석사 용하면 현리하다.

0.2% gold chloride 용액

1% gold chloride ... "10 m l

증류수 ... …·…………40ml

염색

1. 탈파라핀후 수세하여 증류수로 행군다.

Zenker 용액 , Helly 용액 에 고정 한 표본은 반드 시 요드화후 탈요드화를 하고 증류수로 충분히 수세 하여 염색한다. 증류수 대신 이온교환수를 사용해도 좋다.

2. 0.5% potassium permanganate 용액에 1분간 산화시킨다.

산화액에 넣으면 절펀은 갈색으로 된다. 처리시간 이 짧으면 가는 섬유가 잘 염색되는데 핵과 세포질 아 함께 염색된다. 처리시간이 걸어지면 같이 염색 되는 일은 적지만 가는 섬유가 잘 염색되지 않는다.

조직의 종류에 따라 산화시간을 조정한다.

3. 수세 후 증류수로 2-3분간 행군다.

4. 2% oxalic acid에 1-2분간 환원 및 탈색 시 킨 다.

5. 수세 후 증류수로 행군다.

수세는 가급적 수돗물을 피하며 끓여서 식힌 물을 사용하여 여러 차례 통과시키는 것이 안정된 결과를 얻을 수 있다.

6. 2% ferric alum 용액에 40-50초간 매염시킨 다.

매염시간은 1분을 넘지 않도록 주의한다.

7. ^{3-5분간 수세한 후 증류수 I,} II, III 에 각 2분 간씩 행군다.

수세를 충분히 한 후 증류수를 통파시켜 매염성분 이나 수돗물성분이 완전히 다음의 도은액에 념어가 지 않도록 주의한다.

8. Ammoniacal silver 용액에 2-30분간 도은시 킨다.

m

ω

9. 95% ethanol에 1초간 분별한다. Ethan이은 50-70% 를 사용하는 젓이 결과가 좋다. 신속하게 통과시키는 것이 중요하다. 매회 새로운 것을 사용 하는 것이 좋다.

10. 환원액에 1분이상 둔다.

환원액에 넣은 절펀은 1분동안 움직이지 말 것.

11. 수세 후 증류수로 5분간 행군다. 충분히 수세 한 다음 반드시 증류수를 통과하여 염화은액을 오염 시키지 않도록 주의한다.

12. 0.2% gold chloride 용액 에 10분 ~ _{하루밤 치} 환한다.

15분 이상 넣어두는 경우 시간조정을 할 수 있다.

하룻밤 두게되면 색의 심미가 증가하여 결과가 한층 우수하게 된다.

13. 가볍게 수세 후 증류수에 2-3분간 행군다.

14. 2% oxalic acid에 잠시 둔다 . 이 파정은 생략해도 좋다.

15. 수세 후 증류수에 5분간 행군다.

16. 정착액에 5분간 정착한다.

17. 5-10분간 수세한다.

충분히 수세한다. 필요에 따라 hematoxylin 용액 에 핵염색한다

18. Alcohol 탈수 후 투명 하여 봉입 한다 .

염색결과

세망섬유 ... 흑색 교원섬유 ... …·적갈색 핵 ... ……… ... 흑색 세포질 ... … ... 잃은 자색 적혈구 ... 밝은 연지색

。 Gomorri의 세망섬유 도은염색법

시약

Ammoniacal silver 용액

10% silver acetate 수용액 ... 40 ml 10% potassium hydroxide 수용액 ... 8ml Ammonia water, 28%

재 -""'_2A

n τ5""-n- T

10% silver acetate 수용액 40ml를 200 ml의 마 개 달런 삼각플라스크에 넣 고 여 기 에 10% potassiu- m hydroxide 수용액 8ml를 가한다 . 이 때 에 혼탁 물이 형성된다. 다음 이 용액을 잘 섞으면서 침전이 거의 없어질 때까지 암모니아수를 적하하다. 거기에 10% silver acetate 수용액 4방울 가하여 다시 미 량 의 침전물을 만든다. 사용시 이 용액을 두배로 희석 하여 사용한다. 이 용액은 사용시 만들어 쓴다. 이

원액을 그대로 사용하면 농도껴 강하기 때문에 세망 섬유는 굵게 염색된다. 그러므로 2배로 희석하여 사 용하면 세망섬유는 원액보다 섬세하게 염색된다

0.5% potassium permanganate 용액

Potassium permanganate ... 0.5 g

증류수 ... 100 ml 2% potassium metabisulfate 용액

Potassium metabisulfate ... 2 g

증류수 ... … … … 100 ml 2% ferric alum 용액

Ferric alum (ammonium sulfate) ... 2 g

증류수 ... 100 ml 10% 중성 formalin 용액

Formalin(37-40%) ... 10 ml

증류수 ... 90 ml 0.2% gold chloride 용액

1% gold chloride ... 10 ml

증류수 ... 40 n11 2% sodium thiosulfate 용액

Sodiulp thiosulfate ... 2 g

증류수 ... ……… ... 100 ml

명 AH

‘ ... - ,

1. 탈 paraffin 후 수세하고 증류수에 행군다.

2. 0.5% potassium permanganate 용액 에 1-2

분간 산화시킨다.

3. 수세 후 증류수에 약 2분간 행군다

4. 2% potassium metabisulfate 용액 에 약 1분간 환원한다.

시간에 구애받지 않고 황갈색의 절펀이 백색으로 될 때까지 탈색한다. 신선한 탈색액으로 시간이 경 과해도 탈색되지 않고 약간 색이 남아 있을 때에는 불충분한 산화가 원인이 되는 경우가 있다. 이러한 경우 절편을 잘 수세하고 다시 산화를 한다. 2%

oxalic acid를 대 신 사용하여 도 좋다 .

5. 수세 후 증류수에 약 2분간 행군다

6. 2% ferric alum 용액에 1분간 매염시킨다.

2% ferric alum 용액 중에 서 는 조직 이 팽 화되 어 떨어지기 쉽게 된다. 매염시간은 약 30-40초가 적 당하다.

7. 수세 후 증류수 I ， II ， III 에 각 2분간씩 행군 다.

8. Ammoniacal silver 용액 에 1분간 도은한다 절펀이 담황갈색조를 띄면 도은을 완료해도 된다 도은염색 중에는 반드시 이중덮개를 하는 것이 중요 하다.

9. 증류수에 5-10초간 행군다

- 136-

~e-1 ~ -rt:-t. o 1 .iJl.~ .g. 7}-AJ ~.9l ~ Jl:5ti:- ~ :.Q- oJt:-t. t.-1-T- ~~~ 7}-2- ~%7} ~Alls.lJ\] i>.§.Jl·**

~<5}/l] ~A~] <5}~ .g.oJ J\}.9l ..2... ~ ~ ~~7J q.

10. 10% ~~ formalin % 0ll Ol] 2*~ ~~ ~t:+.

~~~~.g. ~7J"All ~~ tM ^~t:+. l:lJ% 7,'-oJl ~ ~ ~ JJl~~ ~~s.loi OJ~o] A~7Jq. t:+%1'9l ~~~~%

~All~ ttl] i:- lQP~ ~ .s:_o}q A~~~ ~.$J Oll ~_5!- .ill.~

~t:+.

n. ~E--e- ~011 ~A~l

+

t:+% .ll}AJ Ol] Al gold chloride % 0ll ~ ..2... ~ A]-7] J\]

?:§.s:..~ *~<51 ~A~l c5}.Jl 16-ff-~oJl ~ -rt:-t.

12. 0. 2% gold chloride % 0ll Ol] 10-30~~ ~1 ~

~t:+.

Gold chloride % 0ll Ol] 1:f .::z.-c ~ ..?:- ~ ~~1 ~ oJ All~

~ ~~c5}ui o]A~]~ ~~l:l].iil.(contrast)~ <5}-2-l:l]

~~ oj ~ q. ~ ~ ..(j ~_g. 10- 30*

xa

~t:+.

13. ~A,l

+

14. 2% potassium metabisulfate % 0ll Ol] 1 *7J

~All ~ ~~~ ~t:-}.

2% oxalic acid~ ~ AJ A}-§-<5}~ .ill.~~ %-2- ~

All, A-j] Pcf~ %.C ~J\}All ~~ *~S-1 oi ~ ~l:l].iil.7} XJ"

~r:-}.

15. 2% sodium thiosulfate % 0ll oJl 1 *7J ~ :;5[~

t:-}.

4^{~% AJ-~} 7a P--fAJ ;5f0ll ~ 2oBA ~ §l A~ c5t~ 4%

\S}PJ ~~~~.Q.] l:l-{t!-]!7} l:lJJ\]~ ¥uJ- o}yt!-} ~.il}.S:..

--9--~15} r:-}.

16. ~E_.C ~ojj 5-1Q*7J ~A~j~t:-}.

**"51 ~A-ll ~r:-} . .nJ .B.. oJl tttt!-} hematoxylin % 0ll

~~ ~~All~t:-}.

o] ttl]oJ] ~~-T~AJo] ~li.-8AJ\].Jl -\4~o] -§-o]-8A

~q. Q{7J gJ.g. ~o] ~r:-}.

17. ~~

+

.s:...g.~All

+

-2- ~.g. tl}t£:}~ \S}J\] *\S}t:-}.

~Ml~~

A~j Pcf~% ••••••••···~J\}All .ill.~~% •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••····~{[All

~ ~ .iJ} A-j] _± ~ · · • · • • • • • • • • · .... · · · ... · · ... -~7J"All

III. ~

~~~ ~~~%.9l .s:...g.~~~

*

Gomori~% ~ol 7] 1t AJ ~ <5}~ t:+. .s:...g.~ All~ oJl Al -2- t:-}-E- ~All~ .lJ}.C ~t!-l ~All .5:.. 7,'-oJl ~ uj?cJ \5}

oJl J.i ~All AJ~A ~ ~oJ 15}~ 4-7}~ All% ~r:-}.f:-J\] .ll}

~All~-¥-*% ~All *~\S}.C %.9l ~~.g. *7}*\5}

ui 7cJ ~~OJ ~ ~.ll} Aj7JPJ-% .Q.] J\] \5}~ ~All \S}.C 7cJ --9--7} "f.§.Jl, utt!-}Al ~All ~.iJ}.S:.. *oJ-AJ <5}~ %~ ~

.C o] %~ o] 1:-§i?:- ~All~~~ ~%~ r:-}.

~~~~~-c .S:..i?:-~~~.Q-1 ~.:g-.ll} AJjiA.C ~~

ammoniacal silver %0ll .Q.] ~:Ail, ·%~ ~~ 0ll oJl ~ 7] ~.Q.] ~o]L-f- alcohol.Q.] A-l]~l:lJ~. ~~~ ~~011 ~

~~ t:-} . .::z.-2-l T .s:.. -if.?:- AJ --tl ~ Al Q{% 4%15}-2- ~

.5:.. 7,'-.B._c5}ui oj ~ojj %.Q.]c5}~ .s:_.g.~AJl~·% AJAJ~

r:-}~ tl].iil.~ oJ-xa~ ~.ll}~ ~% ~ ~% ~o]r:-}.

The Study of Silvering Methods for Reticulin Fibers

Keun Young Oh

Dept. of Pathology, Hanyang University Hospital

ABSTRACT The demonstration of reticulin fibres can be of assistance in diagnosis in c'ertain instances ; myel- Reticulin fibres are fine branching fibers which osclerosis in bone biopsies, where there is an are difficult to see in H and E preparations and excess of reticulin fibres ; also in differentiating need special stains to be visualized. The fibres are poorly differentiated carcinoma showing a poorl- normally seen to best advantage in lymphoid tissu- y marked reticulin pattern compared to the reticu-

e and liver. losarcoma where there is likely to be a profuse

- 137-

reticulin network.

To show these fibres one may carry out a trichr- . orne-type technique where they stain bl~e or

green ; the PAS technique where they are positive or, more popularly, one may take advantage of their argyrophilia. There are many silver techni-

ques for reticulin in common use, the more impor- tant of which will be described. Whilst I prefer to use the Gordon and Sweets' technique, all the methods described in this chapter are capable of yielding good results given the necessary experti- se.

REFERENCES

1. Bloom, W ., Fawcett, D. W. : A Textbook of Histology.W.B. Saunders Co. 1975.

2. Lillie, R.D., Fullmer, H.M. : Histopatho- logic Technic and Practical Histochemistry 4th ed. McGraw Hill 1976.

3. Wheater, P.R. et al. : Functional Histology.

Churchill Livingstone 1979.

4. Gomori, G. : Amer. 1. Path. 13, 993, 1937.

5. N aoumenko, J., Feigin, I. : Stain Technol.

49, 3, 153, 1974.

6. J. F. A. McManus., Robert W. Mawry : His- tologic and histochemical staining methods.

223-229, 1964.

-138-