자동화학검사용 영동제약 액상시약의 평가 배숙영

자동화학검사용 영동제약 액상시약의 평가

배숙영․김석수․박영남․김영기

고려대학교 의과대학 임상병리과학교실, 영동제약 주식회사*

Evaluation of the YeongDong's Liquid Form Reagents for the Chemistry Autoanalyzer

Sook Young Bae, Suk Soo Kim, Young Nam Park*, and Young Kee Kim Department of Clinical Pathology, Korea University College of Medicine, Seoul ;

YeongDong Pharmaceutical Corp., Seoul, Korea*

Background：To establish the new reagent for chemistry autoanalyzer, it is essential to evaluate and choose optimal reagents to get reliable results before utilization. The purpose of this study was to compare the newly developed liquid form reagents from YeongDong Pharmaceutical company with those being currently used in Korea University Hospital.

Methods：We evaluated the YeongDong reagents through precision, accuracy, linearity and comparision with the reagents currently used in Korea University Hospital. Nineteen kinds of items (total protein, albumin, aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase (ALP), gamma glutamyl transferase (G-GT), total bilirubin, direct bilirubin, glucose, blood urea nitrogen (BUN), creatinine, uric acid, calcium, magnesium, inorganic phosphorus (Pi), cholesterol, triglyceride, lactate dehydrogenase (LD), and creatine kinase (CK)) were evaluated.

We also tested interference with hemoglobin, ascorbic acid, and bilirubin in this study. The specimens used were commercial quality control materials and patient sera.

Results：Coefficient of variation (CV) of within-run, between run, and between day precision were satisfactory in most analytes except BUN and creatinine, and were comparable to the currently used reagents. The recovery rate were 94.5%～107.0%. Excellent linearity and correlation (r = 0.9702～0.9991) with the current reagents were disclosed for all analytes. Interference with bilirubin was negligible. Although hemoglobin and ascorbic acid showed significant effect on some analytes but, insignificant difference between YeongDong and current reagents.

Conclusions：The newly developed YeongDong's ninteen liquid form chemistry reagents revealed acceptable analytical precision, accuracy and good correlation with the current reagents.

So we conclude that the reagents can be an alternative of currently used reagents in autoanalyzer.

Key Words：YeongDong reagents, Evaluation, Chemistry autoanalyzer

교신저자：김영기

우) 136-705 서울특별시 성북구 안암동5가 126-1 고려대학교 안암병원 임상병리과

전화：(02)920-5784, FAX：(02)920-5538 E-mail：[email protected]

서 론

일반화학검사는 임상병리 검사실에서 가장 많이 시행되

고 있는 기본적인 검사로서 이의 업무는 대부분 자동화학분

석기를 통해 처리된다. 검사실의 질을 높이고 신뢰성 있는

결과를 얻기 위해서는 일반화학검사의 각 항목별로 적절한

시약의 선택이 필요하며, 상품화된 시약마다 측정 원리 및

방법이 다르기 때문에 새로운 시약을 도입하고자 할 때는

검사실마다 충분한 평가를 거친 후 적절한 시약을 사용하는

것이 필수적이다[1]. 또한 현재 국내에서 사용되고 있는 자

동화검사용 시약의 66%는 외국산 시약으로, 국산 시약이

Table 1. Comparison of principles between YeongDong and current reagents

Analyte Current reagents

YeongDong reagents

Company Reagnets

T. Protein SYC Biuret Biuret

Albumin SYC dye binding BCG dye binding BCG

AST SYC 37℃ IFCC 37℃ IFCC

ALT SYC 37℃ IFCC 37℃ IFCC

ALP SYC P-NPP 37℃ (AMP) P-NPP 37℃ (DEA)

G-GT SYC 37℃ IFCC

(carboxylated-GGPNA)

37℃ IFCC (carboxylated-GGPNA)

T. Bilirubin DK Jendrassik DPD

D. Bilirubin DK Jendrassik DPD

Glucose DK (Trinder)

GOD-POD, colorimetry Hexokinase

BUN SYC UV-Kinetic UV-Kinetic

Creatinine DCC Jaffe, kinetic Jaffe, kinetic

Uric acid SYC Trinder, enzymatic Trinder, enzymatic

Calcuim SYC colorimetry(OCPC) Arsenazo III

Mg DCC Magon Magon

Pi WKPC UV-Phosphomolybdate UV-Phosphomolybdate

Cholesterol SYC (Trinder)GPO-POD, enzymatic (Trinder)GPO-POD, enzymatic

Triglyceride BM Trinder(enzymatic) without glycerol blank Trinder(enzymatic) without glycerol blank

LD DK UV-pyruvate UV-pyruvate

CK DK UV-rate UV-rate

Abbreviations：SYC, Shinyang chemical Co., Korea ; DK, Denka corp., Japan ; DCC, Daiichi chemical Co., Japan ; WKPC, Wako pure chemical corp., Japan ; BM, Boehringer Manheim GMBH., Germany

여러 회사에서 개발, 공급되고 있음에도 불구하고 아직도 대부분의 대형 병원 임상병리검사실 및 임상검사센터에서는 외국산 시약을 사용하고 있다[2]. 이처럼 외국산 시약의 국 내 시장 점유율이 매우 높은 현 상황에서 외화의 절약과 안 정적인 시약 공급을 위해 신뢰할 수 있고 경제적인 국산 시 약을 개발, 공급하는 일이 절실하다. 최근 영동제약(Yeong Dong Pharmaceutical Corp., Seoul, Korea)에서 자동 화학검사용 액상시약을 개발하였다. 액상시약은 분말시약과 달리 별도의 조제과정 없이 간편하게 이용할 수 있고, 검사 시간과 노력의 절감 및 시약 제조에 따른 변이 요인을 최소 화할 수 있는 장점을 가진다[3]. 이에 저자들은 현재 고려 대학교병원에서 쓰이고 있는 기존의 검사시약과 영동제약에 서 새로 개발된 일반화학 검사용 액상시약을 비교하여 이의 효율성을 평가하고자 하였다. 일반화학 검사에 속하는 항목 중 19 항목을 택하여 각 시약의 정밀도, 직선성 및 기존 시 약과의 상관관계와 간섭물질에 대한 검사를 시행하였다.

재료 및 방법 1. 재료

시약은 영동제약에서 개발된 total protein, albumin,

aspartate aminotransferase (AST), alanine aminot-

ransferase (ALT), alkaline phosphatase (ALP), gam-

ma glutamyl transferase (G-GT), total bilirubin,

direct bilirubin, glucose, blood urea nitrogen (BUN),

creatinine, uric acid, calcium, magnesium, inorganic

phosphorus (Pi), cholesterol, triglyceride, lactate de-

hydrogenase (LD), and creatine kinase (CK) 등 19

종목의 시약과 현재 고려대학교 의료원 안암병원에서 사용

중인 시약들(Denka, Daiichi, Wako, B.M., Shinyang

등)을 비교하였다. 영동제약 시약은 CK를 제외한 모든 시

약이 액상이며 기존에 사용하던 시약과 일부 항목에서 검사

방법의 차이를 보였으며, 이는 표 1에 항목별로 기존의 회

Table 2. The results of within-run precision tests in Hitachi 747 with current and YeongDong reagents (N=20)

Analyte Reagent Low Medium High

Mean±SD CV(%) Mean±SD CV(%) Mean±SD CV(%)

T. Protein (g/dL) CR* 3.9±0.00 0.00 6.8±0.00 0.00 8.3±0.03 0.37

YD** 3.9±0.04 1.15 6.8±0.05 0.72 8.3±0.05 0.62

Albumin (g/dL) CR 2.6±0.07 2.50 4.0±0.10 2.50 5.1±0.12 2.38

YD 2.7±0.00 0.00 4.1±0.06 1.47 5.1±0.05 1.01

AST (U/L) CR 14.2±1.01 7.08 39.2±1.04 2.66 330.6±2.82 0.85

YD 18.1±0.89 4.91 43.6±0.60 1.37 332.8±2.69 0.81

ALT (U/L) CR 11.9±0.91 7.66 64.5±1.15 1.78 264.9±1.31 0.49

YD 11.5±0.60 5.28 67.4±0.68 1.01 278.3±1.25 0.45

ALP (U/L) CR 50.3±0.47 0.93 172.3±0.98 0.57 372.0±3.85 1.04

YD 157.8±2.82 1.79 533.6±3.76 0.71 1082.1±14.30 1.32

G-GT (U/L) CR 21.1±0.05 2.12 75.1±0.89 1.18 212.0±0.73 0.34

YD 21.9±0.55 2.52 78.6±1.15 1.46 226.8±1.80 0.80 T. Bilirubin (mg/dL) CR 0.2±0.00 0.00 0.9±0.00 0.00 9.5±0.05 0.51

YD 0.4±0.02 5.66 1.1±0.05 4.39 10.8±0.08 0.73

D. Bilirubin (mg/dL) CR 0.1±0.00 0.00 0.4±0.00 0.00 2.7±0.00 0.00

YD 0.2±0.00 0.00 0.6±0.02 3.76 2.1±0.03 1.47

Glucose (mg/dL) CR 52.3±1.02 1.95 111.5±1.19 1.07 381.9±4.04 1.06 YD 49.3±0.71 1.45 106.6±1.10 1.03 369.4±2.94 0.80

BUN (mg/dL) CR 9.3±1.02 11.02 16.5±1.79 10.89 54.0±2.25 4.16

YD 9.0±0.92 10.20 16.2±0.89 5.52 53.6±1.70 3.18

Creatinine (mg/dL) CR 0.5±0.08 15.78 1.0±0.08 8.26 9.6±0.12 1.27

YD 0.8±0.09 11.18 1.4±0.06 4.50 9.1±0.10 1.12

Uric acid (mg/dL) CR 1.7±0.13 7.25 5.0±0.10 2.00 9.7±0.07 0.70

YD 1.8±0.13 7.43 5.1±0.11 2.14 10.1±0.12 1.18

Calcuim (mg/dL) CR 9.4±0.09 1.00 10.4±0.07 0.64 11.6±0.11 0.92

YD 9.7±0.08 0.84 10.8±0.09 0.85 11.8±0.09 0.81

Mg (mmol/L) CR 0.7±0.00 0.00 0.9±0.00 0.00 1.2±0.00 0.00

YD 0.8±0.07 9.10 0.9±0.03 3.38 1.2±0.02 1.87

Pi (mg/dL) CR 2.0±0.04 2.22 4.0±0.05 1.23 6.5±0.05 0.78

YD 2.0±0.09 4.54 4.0±0.08 2.00 6.1±0.08 1.37

Cholesterol (mg/dL) CR 88.1±0.55 0.63 187.8±1.06 0.56 310.5±1.43 0.46 YD 89.5±0.51 0.57 191.8±1.33 0.70 316.6±1.50 0.47 Triglyceride(mg/dL) CR 59.4±1.00 1.66 158.1±1.32 0.83 413.6±2.50 0.06 YD 56.2±0.52 0.93 158.9±1.62 1.01 419.6±4.45 1.06

LD (IU/L) CR 276.4±6.70 2.42 349.8±6.74 1.93 839.7±6.13 0.73

YD 267.0±3.37 1.26 338.5±2.50 0.74 806.0±6.14 0.76

CK (IU/L) CR 37.3±1.45 3.88 84.6±1.10 1.29 407.7±6.46 1.58

YD 38.6±1.47 3.81 87.2±1.54 1.77 421.2±4.23 1.02

* CR：current reagent ** YD ; YeongDong reagent

사와 측정원리를 영동제약 시약의 원리와 비교하여 기술하 였다. 장비는 Hitachi 747 자동화학분석기(Hitachi Inc., Japan)를 이용하였으며 정밀도 검사에 이용한 검체는 저농 도, 중간농도, 고농도의 환자 검체를 대상으로 세 군의 혼 주 혈청을 만들어 검사하였으며 검체는 냉장보관하였다. 직 선성 및 회수율 검사에는 상품화된 정도관리물질(Sigma-

Aldrich Chemicals, U.S.A.)과 Hitachi 747에서 사용 하는 Calibrator (Roche Diagnostic System, Switzer- land)를 사용하였다.

2. 방법

1) 정밀도 평가(Precision)

Table 3. The results of between-run precision tests in Hitachi 747 with current and YeongDong reagents (N=20)

Analyte Reagent Low Medium High

Mean±SD CV(%) Mean±SD CV(%) Mean±SD CV(%)

T. Protein (g/dL) CR 3.9± 0.04 1.08 6.8±0.05 0.78 8.2± 0.06 0.69 YD 3.9± 0.05 1.33 6.8±0.05 0.76 8.2± 0.00 0.00 Albumin (g/dL) CR 2.7± 0.07 2.60 4.1±0.11 2.81 5.1± 0.12 2.30 YD 2.7± 0.00 0.00 4.1±0.07 1.69 5.1± 0.04 0.81 AST (U/L) CR 22.6± 0.82 3.65 56.7±1.20 2.11 361.1± 2.22 0.61 YD 22.5± 1.34 5.94 57.3±1.43 2.50 370.7± 3.78 1.02 ALT (U/L) CR 13.7± 1.01 7.34 56.2±1.43 2.55 268.6± 4.29 1.60 YD 13.8± 1.54 11.13 58.8±2.12 3.60 285.9± 3.07 1.08 ALP (U/L) CR 49.7± 0.98 1.97 168.8±1.96 1.16 364.4± 5.77 1.58 YD 161.9± 3.10 1.91 542.0±5.78 1.07 1099.6±12.29 1.12 G-GT (U/L) CR 21.1± 0.32 1.50 74.5±0.48 0.65 212.6± 0.42 0.20 YD 21.8± 0.48 2.22 78.2±0.57 0.73 228.2± 1.17 0.51 T. Bilirubin (mg/dL) CR 0.2± 0.00 0.00 0.9±0.00 0.00 9.5± 0.05 0.51 YD 0.4± 0.03 8.55 1.0±0.05 5.12 10.8± 0.07 0.63 D. Bilirubin (mg/dL) CR 0.1± 0.00 0.00 0.4±0.00 0.00 2.7± 0.04 1.57 YD 0.2± 0.00 0.00 0.6±0.03 5.36 2.1± 0.05 2.33 Glucose (mg/dL) CR 53.1± 0.63 1.19 112.0±0.48 0.43 385.5± 4.28 1.11 YD 50.0± 0.52 1.03 107.7±0.95 0.88 373.8± 2.39 0.64 BUN (mg/dL) CR 8.5± 0.52 6.11 15.4±1.57 10.18 51.8± 1.81 3.50 YD 7.5± 0.92 12.25 15.3±1.23 8.03 51.7± 1.35 2.61 Creatinine (mg/dL) CR 0.6± 0.06 9.79 1.0±0.04 4.30 9.4± 0.09 0.98 YD 0.9± 0.05 5.52 1.4±0.05 3.54 9.0± 0.14 1.55 Uric acid (mg/dL) CR 1.8± 0.08 4.79 5.0±0.07 1.47 9.7± 0.12 1.26 YD 1.8± 0.09 5.16 5.1±0.11 2.07 9.9± 0.11 1.07 Calcuim (mg/dL) CR 9.4± 0.14 1.44 10.2±0.26 2.56 11.5± 0.11 0.98 YD 9.6± 0.28 2.92 10.6±0.26 2.41 11.6± 0.18 1.52

Mg (mmol/L) CR 0.7± 0.00 0.00 0.9±0.00 0.00 1.2± 0.00 0.00

YD 0.8± 0.05 6.76 0.9±0.06 6.14 1.2± 0.06 4.49

Pi (mg/dL) CR 2.1± 0.05 2.29 4.0±0.06 1.58 6.5± 0.05 0.74

YD 2.1± 0.12 5.80 3.9±0.08 2.17 6.1± 0.06 0.93 Cholesterol (mg/dL) CR 88.4± 0.67 0.76 188.6±1.07 0.57 310.5± 1.65 0.53 YD 90.1± 0.53 0.58 193.6±1.10 0.57 319.0± 1.27 0.40 Triglyceride(mg/dL) CR 60.0± 1.07 1.81 157.1±1.27 0.81 411.9± 2.47 0.60 YD 56.4± 0.82 1.46 158.5±1.17 0.74 416.2± 2.58 0.62

LD (IU/L) CR 265.1±11.13 4.20 336.0±8.33 2.48 812.0±19.47 2.40

YD 264.5± 2.83 1.07 336.2±2.02 0.60 796.6± 3.39 0.43 CK (IU/L) CR 37.9± 0.82 2.18 85.7±1.60 1.86 410.5± 5.56 1.35 YD 38.3± 0.67 1.78 87.5±0.94 1.08 423.9± 6.15 1.45 정상이하, 정상, 정상이상치의 5명씩의 환자검체를 각각

섞어 3농도의 검체를 만들어 검사내 정밀도(within-run precision), 검사간 정밀도(between-run precision) 및 검사일간 정밀도(between-day precision) 평가를 실시하 였다. 각각의 물질을 하루에 두 번 측정하였고 매 검사마다 중복 측정하였다. 비교평가를 위하여 기존에 사용하고 있는 시약으로도 검사하였다.

2) 직선성 평가(Linearity)

표준물질이나 관리물질을 정제수와 여러농도(1:9, 2:8, 3:7, 4:6, 5:5, 6:4, 7:3, 8:2, 9:1)로 섞어 의학적 범 위보다 넓게 만들어 각각에 대하여 3회씩 반복 측정하고 평 균을 구해 직선성을 평가하였다.

3) 회수율 평가(Recovery Rate)

저농도와 고농도의 2개의 검체를 선택하고, 그 사이의

Table 4. The results of day to day variance in Hitachi 747 with current and YeongDong reagents for successive 3 days

Analyte Reagent Recovery rate (%)

Low Medium High

T. Protein (g/dL) CR 101.3 101.8 103.5

YD 101.3 101.0 103.6

Albumin (g/dL) CR 100.3 98.8 100.7

YD 102.3 99.3 101.2

AST (U/L) CR 98.8 102.6 100.0

YD 98.6 101.0 98.7

ALT (U/L) CR 98.4 102.8 99.5

YD 96.9 101.4 99.3

ALP (U/L) CR 97.2 104.3 100.8

YD 96.5 103.6 99.0

G-GT (U/L) CR 98.0 96.3 98.0

YD 99.3 98.5 100.7

T. Bilirubin (mg/dL) CR 97.6 110.9 108.0

YD 96.9 107.0 99.0

D. Bilirubin (mg/dL) CR 104.5 112.4 108.6

YD 98.6 106.6 102.3

Glucose (mg/dL) CR 96.5 95.6 98.7

YD 98.4 95.5 98.4

BUN (mg/dL) CR 98.7 104.9 101.0

YD 102.7 106.5 102.1

Creatinine (mg/dL) CR 100.3 92.6 98.9

YD 101.2 95.1 101.5

Uric acid (mg/dL) CR 100.1 95.6 98.6

YD 96.8 94.5 98.6

Calcuim (mg/dL) CR 98.1 99.2 100.7

YD 100.7 100.4 102.3

Mg (mmol/L) CR 98.5 104.7 98.9

YD 98.9 103.8 97.9

Pi (mg/dL) CR 100.5 101.7 105.4

YD 98.3 96.2 97.9

Cholesterol (mg/dL) CR 99.5 98.9 97.1

YD 100.9 103.6 96.4

Triglyceride(mg/dL) CR 97.5 101.5 103.0

YD 98.4 98.7 99.8

LD (IU/L) CR 102.9 101.3 96.9

YD 101.4 99.9 96.4

CK (IU/L) CR 100.5 103.7 99.0

YD 99.9 103.8 98.7

농도로서 120%와 150%가 되도록 표준용액을 첨가하여 검체를 제조하였으며 각각의 검체를 3회씩 반복 측정하고 이들을 평균하여 기대치에 대한 측정치의 회수율(%)을 평 가하였다.

4) 검체 비교 시험(Correlation)

임상적으로 만날 수 있는 최대한의 농도범위를 포함하도 록 하루에 40 검체씩 환자검체를 선별하여 5일간 각 종목 별로 검사를 실시하였으며 현재 사용중인 시약과 영동제약

시약으로 각각 측정하여 상관분석을 하였다.

5) 간섭물질 검사

Hemoglobin, bilirubin, ascorbic acid 등을 희석하면

서 검사하였다. Hemoglobin의 경우 혈색소 농도가 15

g/dL인 검체를 생리식염수를 이용하여 5가지 농도(1, 2,

3, 4, 5 g/dL)로 제조하여 참고치 범위내의 환자혈청에 첨

가하여 각각 측정하였다. Bilirubin과 ascorbic acid는 각

각 상품화된 고순도 참고물질(Sigma-Aldrich Chemicals,

Table 5. The recovery rate of each test

Analyte Reagent Low Medium High

Mean±SD CV(%) Mean±SD CV(%) Mean±SD CV(%)

T. Protein (g/dL) CR 3.9±0.01 0.26 6.8±0.03 0.39 8.2± 0.04 0.54 YD 3.9±0.04 0.96 6.8±0.05 0.70 8.2± 0.03 0.41

Albumin (g/dL) CR 2.7±0.08 2.88 4.1±0.10 2.42 5.2± 0.11 2.08

YD 2.7±0.00 0.00 4.1±0.05 1.25 5.1± 0.04 0.81

AST (U/L) CR 22.0±1.18 5.40 56.2±1.12 1.99 362.4± 2.21 0.61

YD 22.3±1.59 7.14 57.3±1.72 2.01 372.0± 3.22 0.87

ALT (U/L) CR 14.9±1.06 7.17 55.4±1.31 2.37 254.9± 3.94 1.54

YD 16.9±1.51 8.91 58.5±1.58 2.70 277.4± 3.41 1.22

ALP (U/L) CR 49.4±0.45 0.91 169.5±0.78 0.46 365.7± 2.82 0.77

YD 158.9±2.06 1.31 537.8±6.04 1.12 1094.7± 9.51 0.87

G-GT (U/L) CR 20.9±0.56 2.69 74.9±0.62 0.83 214.9± 0.91 0.42

YD 22.1±0.56 2.54 78.9±0.89 1.13 230.7± 1.72 0.74 T. Bilirubin (mg/dL) CR 0.2±0.00 0.00 0.9±0.00 0.00 9.5± 0.06 0.61 YD 0.4±0.04 10.78 1.0±0.04 4.28 10.8± 0.08 0.71 D. Bilirubin (mg/dL) CR 0.1±0.00 0.00 0.4±0.01 3.17 2.7± 0.02 0.74 YD 0.2±0.02 8.52 0.6±0.03 5.14 2.1± 0.03 1.20 Glucose (mg/dL) CR 53.4±0.85 1.59 113.0±1.02 0.90 385.6± 3.98 1.03 YD 50.5±0.57 1.14 108.3±1.06 0.98 375.0± 2.71 0.72

BUN (mg/dL) CR 7.6±0.85 11.24 15.6±1.53 9.83 52.2± 2.11 4.05

YD 7.8±0.77 9.85 15.4±1.07 7.03 51.8± 1.56 3.01 Creatinine (mg/dL) CR 0.6±0.07 11.55 1.0±0.07 6.69 9.3± 0.12 1.24 YD 0.8±0.08 9.29 1.4±0.05 3.84 9.0± 0.11 1.25 Uric acid (mg/dL) CR 1.8±0.09 5.23 5.1±0.08 1.52 9.8± 0.08 0.82 YD 1.8±0.13 7.33 5.2±0.12 2.35 10.0± 0.11 1.12 Calcuim (mg/dL) CR 9.3±0.10 0.12 10.2±0.14 1.42 11.4± 0.90 0.79 YD 9.6±0.15 1.56 10.5±0.13 1.22 11.6± 0.10 0.86

Mg (mmol/L) CR 0.71±0.01 1.90 0.9±0.01 1.13 1.2± 0.02 0.33

YD 0.78±0.07 8.93 0.9±0.05 4.94 1.2± 0.04 3.31

Pi (mg/dL) CR 2.1±0.04 2.15 4.0±0.05 1.24 6.5± 0.06 0.86

YD 2.1±0.11 5.14 3.9±0.09 2.20 6.2± 0.10 1.57 Cholesterol (mg/dL) CR 88.3±0.68 0.77 188.5±0.94 0.50 310.8± 1.51 0.49 YD 90.1±0.66 0.74 194.2±1.31 0.68 319.9± 1.64 0.51 Triglyceride(mg/dL) CR 60.0±0.87 1.44 158.0±1.28 0.81 412.2± 2.44 0.59 YD 56.8±0.74 1.30 158.7±1.35 0.85 417.0± 3.16 0.76

LD (IU/L) CR 263.3±9.04 3.46 333.6±6.68 2.01 802.3±12.77 1.61

YD 263.1±2.90 1.10 334.1±3.12 0.93 788.7± 4.78 0.60

CK (IU/L) CR 37.6±1.17 3.11 85.2±1.81 2.12 407.1±16.49 4.09

YD 38.7±1.20 3.11 87.5±1.48 1.69 421.8±17.05 4.06 U.S.A., Junsei GR, Japan)을 정제수로 희석한 5가지

농도에 대해 참고치 범위내의 환자혈청에 희석액을 첨가하 여 측정하였고, 비교평가를 위하여 기존에 사용하던 시약도 동일한 방법으로 측정하였다.

결 과 1. 정밀도

시험한 모든 종목에서의 변이계수(within-run coefficient

of variation)는 각각 저농도군 검체의 경우 0.0%에서

11.2% 범위였고, 중간농도군 검체는 0.7%에서 5.5%, 고

농도군 검체의 경우 0.5%에서 3.2% 범위였다. 검사간 변

이계수(between-run coefficient of variation) 및 일간

변이계수(between-day coefficient of variation)는 저농

도군에서 0.0%에서 12.3% 및 0.0%에서 10.8%, 중간농

도군에서 0.6%에서 8.0% 및 0.7%에서 7.0%, 고농도군

Table 6. Analysis of correlation between current and YeongDong reagents (n=200)

Analyte Regression equation Correlation coefficient (r)

T. Protein y = 1.03x - 0.25 0.985

Albumin y = 0.96x + 0.20 0.985

AST y = 0.99x + 3.93 0.998

ALT y = 1.02x + 0.26 0.999

ALP y = 3.12x + 3.20 0.996

G-GT y = 1.07x + 0.33 0.999

T. Bilirubin y = 0.94x + 0.15 0.998

D. Bilirubin y = 0.53x + 0.31 0.970

Glucose y = 0.98x - 0.30 0.997

BUN y = 1.00x - 0.55 0.995

Creatinine y = 0.95x + 0.10 0.997

Uric acid y = 0.97x + 0.09 0.997

Calcium y = 0.97x - 0.08 0.973

Mg y = 0.99x + 0.02 0.974

Pi y = 0.93x + 0.14 0.994

Cholesterol y = 1.04x - 3.67 0.991

Triglyceride y = 1.00x + 6.32 0.995

LD y = 0.99x - 2.69 0.997

CK y = 0.97x + 4.09 0.999

y：YeongDong reagent x：Current reagent

에서 0.0%에서 4.5% 및 0.4%에서 4.1% 범위였다. 이들 의 평균, 표준편차 및 변이계수 등을 산정한 결과를 Table 2, Table 3, Table 4에 각각 나타내었다.

2. 직선성

각각의 검사 종목에 대해 단계적으로 희석한 10가지 농 도 검체에서의 측정 결과는 임상적으로 측정 가능한 농도 범위를 포함한 모든 범위 내에서 모든 종목에서 직선성이 유지되었다(Fig. 1).

3. 회수율

정확도 측정을 위해 시행한 회수율 실험에서는, 제조혈청 에서의 평균측정치와 원래 혈청농도의 차에서 제조시 첨가 한 표준용액양의 비를 구하여 얻은 회수율이 94.5%에서 107.0% 범위에 있었다(Table 5).

4. 기존 시약과의 상관성

각 항목의 상관성 평가는 19 종목에 걸쳐 광범위한 농도 를 포함하도록 200개의 환자검체를 이용하여 영동제약의 시약과 기존에 사용하고 있던 시약으로 검사하고 상관관계 를 Fig. 2에 보였다. 상관계수(r)는 모두 0.970 이상으로 상관관계가 우수한 것으로 나타났으며 상관분석 결과는

table 6과 같다.

5. 간섭물질 검사

Bilirubin, hemoglobin, ascorbic acid 각각에 대해 5 가지 농도에서의 방해 효과를 측정한 결과 bilirubin의 경 우는 모든 검사 항목에서 검사 범위인 20 mg/dL까지 별다 른 차이를 나타내지 않았다. Hemoglobin (Hb)은 T.

Bilirubin, D. Bilirubin, LD, CK와 AST 검사시 첨가 농도와 비례하여 positive interference를 보였으며, ascorbic acid (A.A)는 T. Bilirubin, D. Bilirubin, LD, CK, AST, ALP, G-GT에서는 첨가농도에 비례하여 negative interference를 Pi에서는 positive interference 를 보였다(Fig. 3). 이러한 간섭물질에 의한 영향은 기존 시약의 결과와 대동소이하였으나, hemoglobin의 T. biliru- bin과 D. bilirubin에 대한 간섭이 기존시약은 negative interfernece로 영동제약의 시약은 positive interference 로 나타났다.

고 찰

최근 국내에서 임상검사용 시약제조 및 연구가 많이 이

루이지고 있으며 이에 대한 평가도 자주 보고되고 있다

Fig. 1. Linearity of the YeongDong reagents.

[4-7]. 본 연구에서 사용된 영동제약에서 개발된 시약은 액 상시약으로서, 분말제조시약과 비교하여 볼 때, 검사실에서

시약의 제조가 필요하지 않고 각 자동분석기에 그대로 사용

할 수 있으며, 조제시의 실수로 인한 오차를 방지하여 재현

Fig. 2. Correlation study between current and YeongDong reagents.

Fig. 3. Interference study with hemoglobin and ascorbic acid. Abbreviations：Hb, hemoglobin；A.A, ascoric acid.

성이 양호하다는 등의 장점을 갖는다. 반면에 완제품의 경 우 유효기간이 동결건조 제품에 비해 짧은 편이며 시약을 개봉한 후의 안정성이 떨어지는 등의 문제는 각 검사실의 주의가 필요하다. 그러나, 다량의 검사를 처리하는 큰 규모 의 병원에서 시약의 소모를 고려할 때, 장기 보관으로 인한 문제는 최소화 할 수 있을 것으로 본다. 본 연구는 현재 고 려대학교 병원에서 사용되고 있는 외국회사 제품을 포함한 여러 회사 시약들과 국산 시약인 영동시약에 대하여 가장

높은 빈도로 측정되는 19가지 생화학 검사 종목에 대하여 정밀도, 직선성, 상관성 및 간섭물질에 대한 연구를 시행하 였다.

검사내 정밀도, 검사간 정밀도, 일간 정밀도 평가를 살펴

보면 기존의 시약들로 검사한 변이계수와 대동소이하여 크

게 벗어난 것이 없고, 이 결과들은 CLIA、88(Clinical

Laboratory Improvement Amendments of 1988)의

허용오차 한계[1] 내에 들어 대체로 양호하였다. 기존의 방

법과의 정밀도검사 측정 비교에서는 total bilirubin과 direct bilirubin 검사에서 일간 정밀도가 기존 방법에 비 해 저농도에서 높은 변이계수를 보여, 이는 채택된 분석방 법에 대한 재고를 요하나 중간 농도와 고농도에서는 0.

7%～5.1%임을 감안할 때, 시약의 정밀도 문제보다는 평 균농도가 매우 낮았기 때문에 소량의 편차가 변이계수에 큰 영향을 미쳤을 것으로 생각되며 실제 적용에는 큰 무리가 없을 것으로 판단된다. 회수율은 기존시약으로 검사한 회수 율이 92.6%～112.4%, 영동시약의 경우 94.5%～

107.0%로 비교적 정확히 측정함을 보여 주었다 (Table 5). 직선성의 평가에는 관리물질을 이용하여 임상적으로 적 용되는 범위를 포함한 모든 농도에서 19 종목 모두에서 우 수한 직선성을 관찰할 수 있었다 (Fig. 1). 상관관계 분석 시험에서는 모든 검사 종목에서의 상관계수가 0.970～

0.999로 기존시약과의 상관관계가 매우 우수한 것으로 나 타났다. ALP의 경우 회귀방정식의 기울기가 3.12의 비례 오차를 보였는데, 이는 기존 시약은 2-amino-2-methyl-1- propanol (AMP) buffer를, 영동 시약은 diethanolamine (DEA) buffer를 사용하는 차이 때문으로 판단된다. 이러한 방법상의 차이로 인해 ALP는 검사실마다 참고치를 새로 설정하는 것이 필요하다. 방해물질 검사의 경우 bilirubin 은 20 mg/dL의 농도까지 모든 검사 종목에서 별다른 차이 를 보이지 않았으나, ascorbic acid와 hemoglobin은 검사 종목에 따라 positive 또는 negative interference를 보 였다. 이는 기존의 시약과 비교하여 의미있는 차이는 없었 으며, 실험한 물질의 농도가 통상적인 검체의 농도 범위보 다 고농도임을 감안할 때 임상적 적용에는 별다른 문제는 없을것으로 판단된다. 그러나, hemoglobin의 경우 T.

bilirubin과 D. bilirubin에서의 interference가 기존시약 은 negative로 영동제약 시약은 positive를 보여 이는 측 정 원리상의 차이로 추정되며 검체 상태에 대한 세심한 주 의가 요구된다.

이상의 결과를 종합하여 볼 때, 새로 개발된 영동제약의 액상시약은 자동화학분석기에 적용이 가능한 일반화학검사 용 시약으로서, 기존의 시약과 비교하여 볼 때 정밀도, 정 확도, 직선성및 상관성 등이 매우 우수하여 Hitachi 자동 분석기에 적용하기에 만족할 만 하였고 앞으로 국내에서 사 용중인 많은 자동분석 장비에도 적용하여 국산화에 도움이

될 수 있을 것으로 사료된다.

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