A Comparative Study on Effects of Kyungohkgo and Kyungohkgo Ga Nokyong on Growth in Growth
Deficiency Rat with Insufficient Nutrition Diet
Yun-Yeop Cha, O.M.D.
Dept. of Oriental Rehabilitation Medicine, College of Oriental Medicine, Sangji University
Objectives
This study was designed to evaluate the difference of between Kyungohkgo and Kyungohkgo Ga Nokyong effects on growth.
Methods
We divided male Sprague-Dawley rats into 6 groups. They were Normal group, Growth deficiency rat with insufficient nutrition diet group, Growth deficiency rat with 0.1% Kyungohkgo group, Growth deficiency rat with 0.2% Kyungohkgo group, Growth deficiency rat with 0.1%
Kyungohkgo Ga Nokyong group and Growth deficiency rat with 0.2% Kyungohkgo Ga Nokyong group. They were administered for 5 weeks. We measured body weight, serum growth hormone, insulin-like growth factor and thyroid stimulating hormone, RBC, concentration of Hb and PCV ratio, total WBC and its composition, the values of plasma glutamic oxaloacetic transaminase(GOT) and glutamic pyruvic transaminase(GPT) activities.
Results
1. In body weight, Kyungohkgo 0.1%, Kyungohkgo Ga Nokyong 0.1%, 0.2% groups were showed significantly different than control group.
But That groups were not showed significantly different than each others.
2. In serum growth hormone, insulin- like growth factor and thyroid stimulating hormone, we obtained the results of tendency to increase in Kyungohkgo Ga Nokyong group, however these values showed no significantly different.
3. In the counts of RBC, Kyungohkgo group and Kyungohkgo Ga Nokyong group were showed significantly different than control group.
But these values showed no significantly different.
원 저
성장장애 흰쥐에서 瓊玉膏와 瓊玉膏加鹿茸의 성장효과 비교 연구
차윤엽
상지대학교 한의과대학 한방재활의학과교실
■ 교신저자 : 차윤엽, 강원도 원주시 우산동 상지대부속한방병원 한방재활의학과 (033) 741-9260, [email protected]
■ 접수: 09. 05. 07일 수정: 05월 15일 채택: 05월 22일
In the concentration of Hb, Kyungohkgo Ga Nokyong 0.2% group was showed significantly different than control group. Kyungohkgo Ga Nokyong 0.2% group and Kyungohkgo 0.2% group were showed significantly different than control group.
4. The counts of total WBC and its composition showed no significantly different in all treatment groups.
5. The values of plasma glutamic oxaloacetic transaminase(GOT) and glutamic pyruvic transaminase(GPT) activities showed no significantly different in all treatment groups.
Conclusions
So Kyungohkgo Ga Nokyong and Kyungohkgo have an effect of promoting growth of rats. And We know that the effect of Kyungohkgo Ga Nokyong is better than Kyungohkgo.
Key Words : Kyungohkgo Ga Nokyong, Kyungohkgo, growth, Growth Hormone(GH), IGF-Ⅰ, TSH.
Ⅰ. 서 론
瓊玉膏는 《東醫寶鑑》
1)에서 “眞精, 補髓, 調眞, 養生, 返老, 還童하며, 百損을 補하고 百病을 제거하며, 萬神 이 모두 足하며, 五臟을 盈溢하며 白髮이 검어지고, 落齒 가 다시 나며 奔馬처럼 달린다.” 라고 기재되어 있는데, 주요 구성은 人蔘, 白密, 生地黃, 白茯笭의 藥材를 넣고 제조한 고형의 약이다.
瓊玉膏에 관한 연구로는 면역활성에 관한 연구
2)와 염증, 위궤양, 진통 및 정상체온, 폐암 등에 미치는
영향
3,4)등이 있다. 최근에 한 등
5)은 瓊玉膏가 성장장
애에 따른 지능발달장애와 학습효과 저하에 효과가 있다고 하였다.
또한, 鹿茸에는 각종 성장인자와 성호르몬 및 성장 호르몬에 관계하는 물질들이 존재하며, 특히 IGF-1의 생성과 밀접한 관련이 있으며
6-10), 성장에 대한 鹿茸의 효과에 관련한 실험으로 전 등
11)의 鹿茸이 성장인자 와 비만에도 효과적이라는 보고와 김 등
12)의 鹿茸과 鹿角의 성장에 대한 동물 실험, 김 등
13)의 鹿茸 및 鹿茸藥鍼의 성장에 관련한 동물실험 등이 있었다.
그 외에도 배
14-16)와 허 등
17)은 동물의 성장촉진에 鹿 茸이 유의한 영향을 미친다고 보고했다. 그리고, 최근
에 공 등
18)은 瓊玉膏에 鹿茸을 가한 처방이 흰 쥐의 성장 및 학습능력 향상에 도움이 된다는 보고를 하였 으며, 이에 저자는 瓊玉膏와 瓊玉膏加鹿茸이 흰 쥐의 성장에 어떠한 유의한 차이를 보이는지 알아보고자 이 실험을 하게 되었다.
즉 초기 영양소결핍으로 성장장애를 유도한 흰쥐 에게 瓊玉膏와 瓊玉膏加鹿茸의 급여량을 달리하여 급여한 후 체중, 혈청, 성장호르몬, IGF-1호르몬 및 갑상선 호르몬 농도 및 혈액의 생화학적 성상과 혈구 구성을 처리군 간에 비교, 검토하여 다음과 같은 결과 를 얻었다.
Ⅱ. 실 험
1. 재료
1) 실험동물
실험동물은 이유직후의 평균체중이 28.53±4.11g인 Sprague-Dawely계 수컷 흰쥐를 사용하였으며, 식 이는 쥐용 고형사료(삼양사료, 한국)를 급여하였다.
물은 자유섭취하게 하였으며, 1주일 간 실험실 환경에
Herbal Name Pharmacognostic name Amount(g) 生地黃
人 蔘 白茯笭 白 蜜
Rehmanniae Radix Ginseng Radix
Poria MEL
367 34 69 230
Total 700
Table Ⅰ. Prescription of Kyungohkgo
Herbal Name Pharmacognostic name Amount(g)
生地黃 人 蔘 白茯笭 白 蜜 鹿 茸
Rehmanniae Radix Ginseng Radix
Poria MEL Cervi Pantotrichum Cornu
328 31 61 205 75
Total 700
Table Ⅱ. Prescription of Kyungohkgo Ga Nokyong
적응시킨 후 사용하였다.
2) 약재
이 실험에서 사용된 약재는 상지대학교 부속한방 병원에서 직접 제조한 瓊玉膏와 瓊玉膏加鹿茸을 구 입하여 사용하였으며 그 내용은 다음과 같다(Table
Ⅰ, Ⅱ).
2. 방법
1) 정상군 및 실험군의 구성
정상군(10마리)과 실험군인 성장장애 유도군(50마 리)으로 나누어 5주 동안 정상군은 기본식이(Basal di- et)를, 성장장애 유도군은 영양결핍식이(Insufficient nutrition diet)를 급여하여 성장장애를 유도하였다 (Table Ⅱ).
2) 성장장애 유도군 에서의 대조군과 瓊玉膏, 瓊玉 膏加鹿茸 처리군들의 구성
성장장애를 유도한 50마리들(135.17±10.35 g)은 실험 개시 시에 대조군, 瓊玉膏 0.1% 및 瓊玉膏 0.2%
처리군, 瓊玉膏加鹿茸 0.1% 및 瓊玉膏加鹿茸 0.2%
처리군의 5군으로 나누고, 각각 10마리씩 평균체중이 유사하게 임의 배치했다. 각 처리군 별 식이급여는 정상군(168.35±15.22 g, 이하Ⅰ군)및 대조군(이하 Ⅱ 군)은 기본식이를, 瓊玉膏 처리군 들은 기본식이에 각각 瓊玉膏를 0.1% 첨가한 군(이하 Ⅲ군) 및 0.2%
첨가한 처리군(이하 Ⅳ군), 瓊玉膏加鹿茸 처리군 들 은 기본식이에 각각 瓊玉膏加鹿茸을 0.1% 첨가한 군 (이하 Ⅴ군) 및 0.2% 첨가한 처리군(이하 Ⅵ군) 별 시험식이(Table Ⅲ)를 5주간 급여했다. 물과 식이는 모두 자유 섭취하도록 했다.
3) 체중측정
체중측정은 각 처리군 별 시험식이를 5주간 급여한
Ingredients(%)
Diets
Basal diet Insufficient nutrition diet
0.1%
Kyungohkgo diet
0.2%
Kyungohkgo diet
0.1%
Kyungohkgo Ga Nokyong diet
0.2%
Kyungohkgo Ga Nokyong diet Sugar
Corn starch Casein Corn oil Cellulose AIN-76 Mineral mix.
AIN-76 Vitamin mix.
DL-methionine Choline chloride
Kyungohkgo Kyungohkgo Ga Nokyong
50.00 12.00 20.00 8.00 5.00 3.50 1.00 0.30 0.20
15.00 71.00 5.00 3.00 5.00 0.30 0.30 0.20 0.20
50.00 11.90 20.00 8.00 5.00 3.50 1.00 0.30 0.20 0.10
50.00 11.80 20.00 8.00 5.00 3.50 1.00 0.30 0.20 0.20
50.00 11.90 20.00 8.00 5.00 3.50 1.00 0.30 0.20 0.10
50.00 11.80 20.00 8.00 5.00 3.50 1.00 0.30 0.20 0.20
Total 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00
AIN-76 Mineral mix(g/kg) : CaHPO4: 500, NaCl: 74, K citrate monohydrate: 220, K2SO4: 52, MgO: 24, Mn carbohydrate: 3.5, Fe citrate:
6.0, Zn cabonate: 1.6, Cu Carbonate: 0.3, KIO3: 0.01, Na2SeO3.5H2O: 0.01, CrK(SO4)2.12H2O: 0.55, Sucrose: 118
AIN-76 Vitamin mix(g/kg): thiamin.HCl: 0.6, riboflavin: 0.6, pyridoxine.HCl: 0.7, nicotinic acid: 3, D-calcium pantothenate: 1.6, folic acid: 0.2, D-biotin: 0.02, cyanocobalamin: 0.001, retinyl palmitate: 0.8(500,000iu/g), DL-α-tocopheryl acetate: 20(250IU/g), cholecalferol:
0.00025, menaquinone: 0.005
Table Ⅲ. Composition of Experimental Diets
후, 처리군 별 평균 체중을 구하였다.
4) 혈액채취
혈액채취는 5주간 급여한 후 3일간의 안정기를 가 진 후, 12시간 절식 상태에서 심장 천자법으로 각 개체 당 약 5-7 ml 정도를 채혈하였으며, 채취한 혈액 을 적량으로 나누어 혈액 내 호르몬농도, 효소활성, 생화학적 검사 및 혈구구성검사를 위해 공시했다.
5) Growth hormone(GH), Insulin like growth factor (IGF-1) 및 Thyroid-stimulating hormone(TSH)의 정량
혈청 GH농도, 혈청 IGF-1농도 및 혈청 TSH농도는 각각 시판 Growth hormone정량용 IRMA(Immu- noradiometric assay) Kit.(Daiichi co., Japan), 시판 혈청 IGF-1정량용 IRMA Kit. (Biosource Co., USA) 및
시판 혈청 TSH정량용 IRMA Kit(Nichols Institude Diagnostica, USA.)를 이용하여 각각의 제조사 분석 매뉴얼에 준해 정량했다.
6) 혈액성상 및 혈구구성
Hemoglobin량과 Hematocrit치는 각각 Hb-me- ter와 microhematocrit centrifuge를 사용하여 측정 하였으며, 적혈구 및 백혈구 총수는 counting chamber 를 이용하여 직접 계수하였으며, 백혈구의 구성종류는 Giemsa염색을 한 도말표본을 만들어 검경, 계수하였 다. 구성비는 백혈구 200개를 기준으로 하였다.
7) 혈장 Glutamic oxaloacetic transaminase(GOT) 및 Glutamic pyruvic transaminase(GPT)의 활성
혈장 GOT 및 GPT는 혈액자동분석기(Boehringer
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ 242.73±14.83b 207.88±7.61a 225.17±8.37ab 231.47±7.22b 232.54±10.46b 251.38±9.45b Values with different superscripts in the same column are significant(P<0.05) by Duncan's multiple range test.
Ⅰ:Normal, Ⅱ:Control, Ⅲ:0.1% Kyungohkgo diet, Ⅳ:0.2% Kyungohkgo diet, Ⅴ:0.1% Kyungohkgo Ga Nokyong diet, Ⅵ:0.2% Kyungohkgo Ga Nokyong diet.
Table Ⅳ. Effects of Kyungohkgo and Kyungohkgo Ga Nokyong on Body Weight in Rat Fed Insufficient Nutrition Diet
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ
GH(ng/ml) 0.0241±0.0075 0.0232±0.0081 0.0251±0.0068 0.0249±0.0080 0.0265±0.0082 0.0287±0.0081 IGF-1(ng/ml) 1087.85±83.21 1044.69±79.41 1095.29±85.15 1124.78±63.95 1131.25±96.55 1155.36±88.21 TSH(μ IU/ml) 0.0185±0.0053 0.0117±0.0074 0.0171±0.0075 0.0194±0.0088 0.0180±0.0066 0,0235±0.0069
Ⅰ:Normal, Ⅱ:Control, Ⅲ:0.1% Kyungohkgo diet, Ⅳ:0.2% Kyungohkgo diet, Ⅴ:0.1% Kyungohkgo Ga Nokyong diet, Ⅵ:0.2% Kyungohkgo Ga Nokyong diet.
Table Ⅴ. Effects of Kyungohkgo and Kyungohkgo Ga Nokyong on Serum Concentration of Growth Hor- mone(GH), Insulin-like Growth Factor(IGF-1) and Thyroid Stimulating Hormone(TSH) in Rat Fed Insufficient Nutrition Diet
Manheim, Germany)를 이용하여 측정했다.
8) 통계처리
실험결과는 SPSS package를 이용하여 one-way ANOVA검정을 하였으며, 각 처리군 간의 유의성 검정 은 Duncan's multiple range test 에 의해 P<0.05 를 기준으로 하였다.
Ⅲ. 실험결과
1. 체중을 중심으로 한 성장에 미치는 영향
영양결핍으로 성장장애를 유도한 쥐에게 각 처리군 별 시험식이를 5주간 급여한 후, 각 처리군 별 평균체 중을 측정하였다. 성장장애군 들 중 기본식이를 급여
한 대조군보다 처리군들의 평균체중이 높았으며, 瓊 玉膏 0.1% 처리군은 대조군에 비해 유의한 차이가 없었다. 瓊玉膏 0.2% 처리군이 대조군에 비해 유의한 차이가 있었으며, 瓊玉膏加鹿茸 처리군도 대조군에 비해 유의한 차이가 있었다. 그러나, 이들 세 군 간에 는 유의한 차이가 없었다(Table Ⅳ).
2. 혈청 Growth hormone(GH), 혈청Insulin- like growth factor(IGF-1) 및 혈청thyroid stimulating hormone(TSH)의 각 군별 평균 농도
GH와 IGF-1의 농도는 瓊玉膏加鹿茸 처리군, 瓊玉
膏 처리군, 정상군, 대조군 순으로 높은 경향을 보였으나
유의한 차이를 나타내지는 않았다. TSH농도 역시
처리군 들이 대조군보다 높은 경향을 보였으나 유의한
차이는 없었다(Table Ⅴ).
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ RBC(106/ml)
Hb(mg/dl) PCV(%)
8.04±0.31b 17.11±1.59b 42.57±2.11a
5.77±0.21a 12.35±1.33a 41.84±2.35a
7.58±0.21b 14.35±1.21ab 46.15±2.55ab
7.53±0.25b 15.37±1.14ab 48.35±2.51b
7.33±0.37b 16,51±2.37ab 44.38±2.73ab
7.95±0.35b 19.48±2.88b 48.15±2.39b Values with different superscripts in the same column are significant(P<0.05) by Duncan's multiple range test.
Ⅰ:Normal, Ⅱ:Control, Ⅲ:0.1% Kyungohkgo diet, Ⅳ:0.2% Kyungohkgo diet, Ⅴ:0.1% Kyungohkgo Ga Nokyong diet, Ⅵ:0.2% Kyungohkgo Ga Nokyong diet.
Table Ⅵ. Effects of Kyungohkgo and Kyungohkgo Ga Nokyong on the Counts of RBC, Concentration of Hb and PCV Value in Rat Fed Insufficient Nutrition Diet
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ
WBC(103/ml) Neutrophils(%) Lymphocytes(%)
Monocytes(%) Basophils(%) Eosinophils(%)
8.11±0.85 35.69±2.75 56.81±4.12 2.57±0.61 1.38±0.25 3.55±0.59
8.93±0.71 36.65±2.61 55.62±4.95 2.44±0.77 1.54±0.21 3.75±0.31
8.38±1.92 36.21±2.44 55.25±4.88 2.84±0.44 1.85±0.48 3.85±0.41
8.21±1.73 35.76±2.05 56.39±4.65 2.79±0.61 1.63±0.41 3.43±0.38
8.15±1.52 35.37±2.15 57.93±4.54 2.59±0.51 1.66±0.59 2.45±0.37
7.94±1.38 35.68±1.94 57.17±4.55 2.88±0.53 1.71±0.33 2.56±0.45
Ⅰ:Normal, Ⅱ:Control, Ⅲ:0.1% Kyungohkgo diet, Ⅳ:0.2% Kyungohkgo diet, Ⅴ:0.1% Kyungohkgo Ga Nokyong diet, Ⅵ:0.2% Kyungohkgo Ga Nokyong diet.
Table Ⅶ. Effects of Kyungohkgo and Kyungohkgo Ga Nokyong on the Total Counts and Composition of WBC in Rat Fed Insufficient Nutrition Diet
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ
GOT(karmen unit) GPT(karmen unit)
34.19±2.11 47.35±3.82
32.77±2.85 47.04±2.97
36.15±3.47 48.29±3.55
35.51±3.44 46.33±3.12
34.29±2.38 44.15±2.31
31.71±3.44 45.83±3.05
Ⅰ:Normal, Ⅱ:Control, Ⅲ:0.1% Kyungohkgo diet, Ⅳ:0.2% Kyungohkgo diet, Ⅴ:0.1% Kyungohkgo Ga Nokyong diet, Ⅵ:0.2% Kyungohkgo Ga Nokyong diet.
Table Ⅷ. Effects of Kyungohkgo and Kyungohkgo Ga Nokyong on Plasma GOT(Glutamic Oxaloacetic Transaminase) and GPT(Glutamic Pyruvic Transaminase) Activities in Rat Fed Insufficient Nutrition Diet