Antitumor and Immunomodulatory Activities of the P. grandiflorum Cultivated for More Than 20 Years

다년생 도 라 지 의 항 암 및 면역활성

김영섭* ■ 이병의* • 김근재* ■ 이연태*

한 국 화 학 연 구 소

, *

. ••

, {Received J a n u a r y 8, 1998)

• 조규봉** ■ 정영철*

짐 주 전 문 대 학

A n t i t u m o r a n d I m m u n o m o d u l a t o r y A c t i v i t i e s o f t h e

C u l t i v a t e d f o r M o r e T h a n 2 0 Y e a r s

Y. S. Kim*, B. E. Lee*, K. J . K im *, Y. T. Lee**, K. B. Cho** a n d Y .C . C hung***

Korea Research Instituted of Chemical Technology, Taejon 305-343, Korea

* Department of Chemistry, Han Nam University, Taejon 300-791, Korea

**Department of Microbiology, Dan Kook University, Chenan 330-714, Korea

***Department of Food Science, Chinju Junior College, Chinju 660-759, Korea

A bstract

~ P la t y c o d o n r a d ix is a d r ie d ro o t o f Platycodon grandiflorum (P. grandiflorum) A. D C . a p e r e n n ia l g r o w n o n th e h ills a n d fields i n K o re a a n d J a p a n , o r c u ltiv a te d i n v a r io u s d istric ts. R e c e n tly , P. gran­

diflorum (C h a n g k il) h a s b e e n s u c c e s s fu lly c u ltiv a te d for m o r e t h a n 20 y e a rs a n d g e n e ra lly h a s b e e n e m ­ p lo y e d a s fo lk r e m e d y for a d u lt d is e a s e s s u c h a s h y p e r lip id e m ia . h y p e r te n s io n a n d d ia b e te s . W e i n ­ v e s tig a te d v a r io u s b io lo g ic a l ac tiv itie s o f th e ex tracts fro m C h a n g k il. W h e n tre a te d in vitro w ith B IG -F l m o u s e m e la n o m a cell lin e s , it s h o w e d 100% la m in in - b in d in g in h ib ito r y activ itie s a t th e c o n c e n tr a tio n o v er 0.125 m g / m / . In in vivo te s t it s h o w e d 61.5% r e d u c tio n o f th e so lid t u m o r w e ig h t t r a n s p la n te d in m ic e a n d e x h ib ite d a n t ic a n c e r a c tiv ity o f 1 2 8 ^ ILS a g a in s t S arcom a- 180 a sc ite s . It a ls o in c r e a s e d th e r a ­ tio o f p o sitive cells o f n a t u r a l k ille r cells i n ly m p h o c y tic c o m p o s itio n a g a in s t S arcom a- 180 a s c ite s a n d s o lid t u m o r tr a n s p la n te d i n IC R m ic e w h e n te s ts w ere c a rrie d o u t b y F A C S c a n m e th o d .

Keywards

□ P. grandiflorum (C h a n g k il). la m in in . a sc ite s tu m o r , s o lid tu m o r , n a t u r a l k ille r cell.

도라지 (길경

A. D C )는 배 농 . 거담, 기관지염. 천식 등의 호흡기계질환에 시■되 어온 생약재로서 도라지 가 배합되어 있는 한방 처방 수 는 동의보감에 273건, 방약합편에 49건이 수록되어 있 을 정도로 다양한 약리작용을 갖고 있으며,*-® 주요 약 리성분은 테르펜계 사포닌으로서 동물실험에서 이 물 질은 진해, 거담작용, 중추신경억제작용(진정, 진통, 해 열효과), 급만성염증에 대한 항염증작용, 항궤양 및 위 액분비억제작용, 혈관을 확장하여 혈압을 낮추는 항콜 린작용, 혈당강하작용, 콜레스테롤대사 개선작용 등이 있는 것으로 밝혀졌다/*^® 이외에 도라지의 열수 및 에

• 본 논문에 관한 문의는 이 저자에게로 ( 전화) 042-860-7024 ( 팩스) 042-861-0307

탄올 추출물은 곰광이의 아프라톡신을 억제하며 , 이눌 린 분획은 식균작용과 고형암 및 복수암에 대한 강력한 항종양효능이 있고, 40% 도라지 엑 기 스는 알코올흡수 억제작용이 규명된 바 있다.®"*®

이와같이 길경은 다양한 약리작용을 가지고 있옴에 도 불구하고 장기간 재배에 어 려움이 있었다. 그러나 최 근에 20년 이상 도라지를 재배할 수 있는 기술이 개발 되어 다량 생산되고 었다.^* 현재까지 다년생도라지에 관한 연구는 정""*등이 보고한 항당뇨효과에 관한 실험 과 김 ^>등이 보고한 고지혈증에 관한 실험이 전부이다.

이들의 보고에 따르면 다년생도라지는 길경보다 높은

생 리 활성 효과가 있다고 보고한 바 있다. 따라서 본 연구

에서는 다년생도라지외 다양한 생리활성을 검토하기

위한 계획의 일환으로 먼저 항암효과를

및

다년생도라지의 항암 및 면역활성 383

vivo

실험을 통하여 규명하고 더불어 면역활성도 동시 에 검토하고자 하였다.

실험방법

시료의 추출 및 조제 - 경남 진주에서 재배한 건조된 분말형태의 22년생 다년생도라지(장길) 200유을 증류 수 3 L 로 90°C 이하에서 3시간 동안 3희 추출하고 추출 액들을 모아 40°C 이하에서 감압 증류시켜 물의 양이 1 L 가 되면 동결건조시켜 사용하였다. 이 때 얻어 진 장길 추출물의 양은 67 담이었다. 메탄을 추출물은 건조장길 100 g을 메탄올 1L로 1시간 동안 가열환류시켜 3회 추 출해내고 모아진 여액을 감압증류시켜 나머지를 사용 하였다. 이때 얻어진 장길 추출물은 3.8 g 이었다.

실험동물 - 한국화학연구소로부터 구입한 20+2 g 의 3주령인 수컷 IC R 생쥐를 1주일간 안정화시킨후 생 존율, 종양억제율 및 면역세포 증식능을 위한 실험에 사 용하였다. 시료 투여후 암세포를 이식한 전투여 실험에 서 10마리 또는 그 이상을 실험군으로 하였다. 설험기 간 중 사료(생쥐용)와 물은 자유롭게 먹 게 하였고 실온 은 24±2°C를 유지하였다.

종양세포의 배양 - 실험에 사용한 생쥐 복수형 sar- coma-180 종양세포는 서울대학교 의학연구소에서 분 앙받았다. 복수형 종양세포를 무균적으로 채취하여 4°C H ank's balanced salt solution(H BSS)으로 세 척한 후 1X 10® cells/m/의 농도로 IC R 생쥐 복강에 계 대 배양하여 사용하였다. 계대 배양된 sarcoma-180을 pasteur pipets으로 복강내에서 채취하여 50 m/ con­

ical tube에 넣은 후 1200 rpm 에서 10분간 원심분리하 고 H BSS buffer용액으로 3회 씻은 다옴 복수암 및 고 형암의 발생에 사용하였다.

복수암에 대한 항암실험 - 평균무게 25.1±0.2g의 3~4주령된 IC R 생쥐 10마리를 24±2°C의 배양실에서 1주일간 안정화시키며 장길 추출물을 생리식염수에 녹 여 1일 250mg/kg은 경구로 1주일간 전투여 한 뒤 3X 10® cells/m/의 sarcoma-180을 복강내에 이식하였다.

이식후에는 1일 500 m g/kg의 장길추출물을 같은 방법 으로 투여하며 대조군과 비교하여 평균생존일수 (MST)와 생존일수연장율(ILS )을 아래식을 이용하여 종양 이 식 30일 후 관정 하였다.

생 존 일 수 연 장 율 (ILS%) =

괴검체투여 군의 평 균 생 존 일 수 비투여군의 평 균 생 존 일 수 ^X 100

고형암에 대한 항암실험 - 평균무게 24.8± 0.2g의 3~4주령된 수컷 IC R 생쥐 10마리를 복수암과 동일한 조건으로 전처리 한 후 고형암유발을 위하여 2 .5 x l( f cells/m/의 sarcoma-180을 IC R 생쥐의 오른쪽 서혜 부에 피 하 이 식하였다. 이 식후 복수암과 동일하게 장길 추출물을 투여하며 30일 경과 후 발생된 고형암을 적출 하여 중량을 측정하고 아래식에 의하여 종양증식억제 율을 구하여 이를 항암효과의 지표로 하였다.*^*

종양증식 억 제 율 (IR,%) = 피 검 체투여 군의 평 균 종 양 중 량

비투여군의 평 균 종 양 중 량 ^X 100

세포독성실험 - 장길추출물을 사람의 다양한 암 세 포주인 A549C사람폐암유래세포주), SK 0V -3(사람난 소암유래 세포주) , SKM EL-2(사람색 소세포암유래세 포주). HCT 15(사람결장암유래세포주) , X F 498(사람 중추신경계암유래세포주) 등에 대한 세포득성을 측정 하였다. 이들 세포주들을 실험에 사용하기 위하여 trypsin-EDTA용액으로 부착면으로 부터 분리시키고, 96-well flat-bottom microplate(Falcon) 에 well 당 세포수가 4 ~ 5 x l(y*cells/m/가 되도록 분 주하 였 다 . 분주된 세포들을 C02 incubator내에서 24시간 배양 하여 바닥면에 부착시킨 투 aspirator로 배지 (R P M I 배지)를 제거하고. 배지에 장길추출물을 6가지 농도 (6.25, 12.5, 25, 50, 100 및 200 |ag/m/)의 log-do- se로 희석된 시료 용액들을 암세포가 들어 있는 well 에 각각 100 ^i/씩 3배수로 넣어주고 46시간 동안 더 배 양한 부 sulforhodam ine-B(SRB) assy법에 따라 약 물을 가할때의 세포 수 (Tz)와 약물이 들어 있지 않은 배지를 가하여 48시간을 배양 했을 때의 세 포 수(C) 및 각 농도의 약물과 함께 48시간 배양했을때의 세포수 (T) 등을 측정하였다. 세포증식율은 아래식에 의하여 구하였다.

세포증식 율 (%) = ^{T - T z}

C - T z ^X

100

암세포접착저해 활성 설 험 - 장길 추출물이 B16~F1 생

쥐 melanoma 세포주의 세포외 기질의 일종인 1am-

in in 에 접착을 저해하는지의 여부를 정량적으로 측정하

였다. 이들 세포는 Fetal calf serum(FCS, 10% )를 함

유한 M in im u m essential m edium (M EM , Hank's salt 함유)에서 유지시켰다.

Laminin-coated plate는 lam inin 1 m g을 PBS (phosphate buffer saline) 2 m /에 용해하여 냉장고 에 보관하면서 필요시에 lam in in 의 농도(20 Ug/m/)를 결정하여 PB S 용액으로 희석하고 이 용액을 96-well microplate외 well에 50 씩 분주하여 하룻밤 동안 건 조시켜 사용하였다.

세포 현탁액외 제조는 T-25 culture flask에 80%

confluence률 성장한 B16-F1 세포를 3 m /의 2 m M EDT A 용액으로 떼어낸 다옴 serum-free M E M 5

를 가하여 800 rpm 에서 5분 동안 원심분리시켜 얻은 세포를 1% BSA 를 함유한 serum-free M E M 의 적당 한 양에 현탁하여 세포수가 2x10® cells/m/ 되 게 조절 하였으며, 실험에서는 이 현탁액 50 를 사 ■ 하였다.

활성외 측정은 laminin-coated well을 100나/의 PB S로 3회 세척한 후 다시 1% BSA 용액(PBS에 용 헤) 100나/률 첨가하였고, BSA를 aspirator로 제거하 였다. 이 판에 0.1% BSA 를 함유한 serum-free M E M 50

시료 및 세포률 첨가하여 5% 탄산가스 존재하에서 37°C로 1시간 동안 배양하였다. 배양 후 PBS(37°C)로 두 번 세척한 후 0.5% BSAXPBS에 용 해) lO On/로 각각 세척한 다옴 부착되어 있는 세포를 2.5% glutaraldehyde 40 로 실온에서 30분 동안 고 정 화 시 켰 다 .

면역활성설험 - 항암실험과 동일한 방법으로 처리된 IC R 생쥐를 3주가 지난 후 전혈을 채혈하여 항응고제가 처리된 EDTA tube 7개에 각각 100 썩 넣고, 단클론 항체둘을 NK-cell, NK-cell control은 각각 10 |X/썩 그리고 나머지 단클론항체 (Ham ster Anti-Mouse CDse FITC, R at Anti-Mouse CDge FITC, R a t A n ­ ti-Mouse C D i 9 FITC, R at IgG 2a K /H C , H am st­

er IgG FITC, Anti-Mouse NK-cell, NK-cell con­

trol ： Serotec에서 구입)들은 4|x/씩 가하였다. 이들을 4°C에서 30분 동안 배양한 뒤 여분외 적혈구를 용혈시 키기 위하여 lysis solution(50% diethylene glycd과 15% formaldehyde가 흔합된 용액을 증류수와 1： 10 v/v으로 혼합한 용액)을 2 m ； 가하여 10분동안 실온에 서 방처하였다. 이것을 1500 rpm 에서 5분동안 원심분 리하고 완층용액으로 1회 씻고 다시 1500 rpm 에서 5분 간 원심분리하고 buffer 0 .5 m /를 가하여 재부유시켜 FACScan tube에 sample을 준버하였다.^^*®

결과 및 고찰

복수암에 대한 항암효과 - 장길 추출물(changkil) 을 일주일간 전투여한 후 3 X 10® cells/m/외 sarcoma- 180 중양세포를 IC R 생쥐에 이식하고 계속 시료를 투 여한 복수암 실험결과는 Table I에 나타낸것과 같이 대 조군의 평균생존일수(M ST)가 19.4일이며 장길 투여 군 (changkil)은 24.9일로 M ST 가 5.4일 정도 연장되 어 생존일수연장율이 128% 로 나타났다. 그리고 30일 까지 생존한 생쥐도 3마리나 되었다. 이러한 결과는 Nagao*®등이 길경외 이눌린성분만 추출하여 실험하였 을 경우 경구처리시 복수암에서 30일 이상 생존이 2마 리이고 IL S 가 131% 인것과 비교해 볼 때 장길의 총추 출물은 길경의 이눌린성분과 거외 비숫한 항암활성을 보여줌을 알 수 있었다.

고형암에 대한 항암효과 - 복수암과 동일한 조건하 에서 2.5X l( f cells/m/의 sarcoma-180 종양세포를 이식한 후 실시한 고형암 실험에서는 Table II에 나타 낸것과 같이 대조군의 평균종양의 무게가 1.79±0.14 g이며 장길추출물(changkil) 투여군은 0.69+0.22 g으 로 종양저지율이 61.5% 로 상당히 높게 나타났다. 한편 길경외 이눌린성분만으로 실험한 Nagao*™의 결과에서 44.2% 의 종양저지율을 나타내었으나 본실험에서 장길 총추출물의 종양저지율은 길경보다 약 15% 이상 증가 한 것으로 보아 길경보다 항암활성 이 높다고 사료된다.

세포독성 실험 - 길 경 (kilkyung) 과 장길 (chang- kil)의 열수 추출물에 대한 S R B assay에서 6.25 Rg/

mZ로 부터 200 나g/mZ까지 외 농도로 A549, SK0V-3,

Table I

— A n t i t u m o r a c tiv itie s o f w a te r e x tr a tio n fr o m C h a n g k i l a g a in s t S a rc o m a - 1 8 0 a s c ite s t u ­ m o r t r a n s p la n t e d i n m ic e

D o s e

T r e a t m e n t ( m g / k g ) R o u t e M S T ( d a y )

I L S

{%)

30 d a y su rv iv o rs C o n t r o l s a lin e

C h a n g k i l 500 p .o . p .o .

19.4 2 4 .9 128

0 /1 0 3/1 0

Table II

— — A n t i t u m o r a c tiv itie s o f w a te r e x t r a tio n fr o m C h a n g k i l a g a i n s t S a r c o m a - 180 s o lid t u m o r t r a n s p la n t e d i n m ic e

D o s e

T r e a t m e n t ( m g / k g ) R o u t e

T u m o r w e ig h t (g)

I n h i b i t i o n r a t e {%)

C o n t r o l s a lin e C h a n g k i l 500

P.O.

p .o .

1 .7 9 ± 0 .1 4

0 .6 9 ± 0 .2 2 61.5

550000 A-0

-2

-o o- o

612500

1

2

에

—. . ra^ro125oou

. 2 3 6 2 5 0 m o- o-

1

9-

^

^ m 이

o o o o o c o

SKMEL-2, HCT 15, X F 498 등 5종에 대하여 실험한 결과 Table III과 IV 에 나타낸것과 같이 도라지 열수추 출물들은 모두 암세포에 대한 영향이 없어 직접적인 세 포득성을 나타내지 않음을 확인했다. 그러나 길경 (kilkyung) 보다는 장길 (changkil) 에서 약간 높은 세 포득성이 나타나고 있으나 저농도에서는 모두 세포득 성이 없었다.

암세포 점착저해활성 - 장길 추출물 0.5, 0.25, 0.125, 0.062 및 0.031 m g /m ； 의 농도로 한시간 동안 처리하였을시 암세포의 la m in in 에의 결합형태 및 세 포형태를 현미경하에서 관찰하여 사진촬영 하였다

— N e t g r o w th a s p e rc e n t o f c o n tro l for C h a n g - ______________ M ___________________________________________________

C o n c . C e lls

(

g / m / ) ^ S K - O V - 3 S K - M E L - 2 X F 4 9 8 H C T 1 5

R e la t iv e O p t i c a l D e n s i t y a t 570 n m C o n c . ________________________

____________________________

( n g / m / ) A 5 4 9 S K - O V - 3 S K - M E L - 2 X F 4 9 8 H C T 1 5

(Fig. 1). Fig. 1 에서 관찰할 수 있듯이 대조구의 경우 에는 암세포가 la m in in 에 부착되어 있었고 0 .5 m g / m /의 농도에서는 20~30% 의 세포가 세포막 손상을 받았으나 나머지 70~ 80%의 세포는 la m in in 에 부착 하지 못하고 구형의 세포형태롤 유지하였다. 0.25 m g/

mZ과 0.125 m g /m /의 처리구에서는 100%의 세포가 la m in in 에 부착하지 못하고 구형의 세포형태를 유지 하였다. 0.062 m g /m ； 의 농도에서는 70% 정도의 세포 가 부착하지 못하였고 0.031 m g /m ； 의 농도에서는 30% 정도의 세포가 부착하지 못하는 것으로 나타났다 (Table V) ,

암세포의 세포외 기질에의 결합은 암세포의 전이에 관여하는 것으로 알려져 있어 도라지 추출물이 동물실 험에서 암세포 전이를 저해하는 것으로 밝혀진다면 도 라지를 이용한 암전이를 예방할 수 있을 가능성 이 높다 고 사료된다.

면역활성실험 - 대조군 및 장길추출물 투여군의 복 수암 및 고형암이 이식된 생쥐의 혈액에 대한 FA- CScan을 이용하여 NK-cell, T-cell, B-cell, Tc^cell등 면역세포외 비율을 조사하였다. 복수암의 경우에서는

C o n t r o l 0 .0 3 1 m g / m l 0 . 0 6 2 m g / m l

0 . 1 2 5 m g / m l 0 . 2 5 m g / m l 0 . 5 0 m g / m l

Fig. 1

— M icro scop ic o b s e rv a tio n o n th e la m in in co a te d m ic r o p la te o f B16-F1 m o u s e m e la n o m a cell tr e a te d w i t h P.

grandiflorum M e O H e x tr a c t a t th e d iffe ra n t c o n c e n tr a tio n .

다년생도라지의 항암 및 면역활성 385

T able III

— — N e t g r o w t h a s p e r c e n t o f c o n tro l for K i l k ­ y u n g

T able V

~ L a m i n i n b i n d i n g i n h i b i t o r y a c t iv it y o f Pla­

tycodon grandiflorum M e O H e x tr a c t

9 9 0 6 9 4 1 3 4 8 3 5

^

2 -

7 - 9 0 9 9 9 9 1 1 9 5 8 7 0 0 4^ 1 8 5 6 3 -o -7 fi - -3 0 9 9 9 9 9 XI 5 6 2 8 0 4 9 - 7 - 5

^ 9

0 L

-6

-4 wQ-

4^ 0 0 9 9 8 8 l i 1± 1 2 9 9 0 0

^ 8-

4-

o o - 0 9 9 9 9 8 1 1 3 5 0 2 9 9

1 7 2 8 6 9 0 0 0 9 9

±1 IX

1 1

.00

.71

.22 .00 .00 .00

0 8

1 8 8 9 1 9 3 8 4 9 -4

0^ -7 -4

0^ o

o

o

o

o

o V A

XI

l i

t-Hr—H

7

1 9 3 9 6 5 3 2 0 7 6

^

1 -

1 - o- o o-

0 0 0 0 9 9 3 9 4 9 5 7 9 0 4 7 2 7

^

1.

0 0 0 9 9 9 9 8 7

1 7 5 6 7 7 9 7 8 oo - 0^ 7- 4- 2.

0 9 9 9 9 9

1-H

1 9 4 5 3 0 6

3

5

6

3

1

^ -2

-1 9 9 0 0 0 0 A1 IX IX IX 5 5 0 0 0 0 2-

9^

^ -o

-o 6

1 2 5 0 0 1

2

Table VI — Effect of water extration from Changkil on the lymphocyte composition against Sar­

coma-180 ascites tumor ransplanted in ICR-mice

% positive cells CD19

(B cell) CD3e (T cell)

CD

a

(Tc cell) NK cell Control 17.93 71.10 18.87 1.14 Changkil 23.04 62.88 23.37 6.23

^able VII — Effect of water extration from Changkil on the lymphocyte composition against Sarcoma-180 solid tumor transplanted in ICR-mice

% positive cells CD19

(B cell) CD3e

(T cell) CD

a

(Tc cell) NK cell Control 43.85 49.77 12.97 3.6 Changkil 36.92 53.19 13.10 4.55

Table V I에서와 같이 직접적인 항암효과를 나타내는 NK-cell이 대조군에서 1.14%, 장길투여군에서 6.23%

으로 장길투여군에서 약 5.5배 정도 높게 나타났다. 그 리고 B-cell에서도 대조군보다 장길투여군이 높게 나타 났으며 T-cell은 장길투여군이 비록 약간 낮았지만 오히 려 Tc~cell이 높게 나타나 항암효과룰 나타낸다고 사료 된다. 또한 고형암에서는 Table V II에 나타낸것과 같이 NK-cell은 대조군이 3.6%, 장길투여군이 4.55% 로 복 수암의 경우보다는 낮지만 약간 높게 나타났다, 그리고 B-cell은 대조군보다 낮았으나 T-cell과 Tc-cell은 대조 구에 비하여 높게 나타났다. 이와 같은 결과를 통하여 장길 추출물들의 항암활성은 면역세포외 비율 상대적으 로 높아짐 에 따라 나타났다고 사료된다.

결 론

이상의 결과들로 미루어 볼 때 장길의 총추출물은 길 경보다 훨씬 높은 항암효과를 나타내는 것을 알 수 있었 다 . 복수암의 경우 IL S 가 128% 이었으며, 고형암에서 는 항종양저지율이 61.5% 로 나타나 항암효과가 탁월 하였다. 세포득성실험에서는 길경 및 장길 모두에서 세 포득성을 거의 나타내지 않고 있으며, 암세포접착저해 활성실험에서는 장길추출물의 농도가 0,125 m g /m ； 이 상의 농도에서는 100% 의 암전이를 억제하는 것으로 나 타났다. 또한 면역관련 실험에서는 장길추출물은 복수

암에서는 N K - c e l l 이 고형암에서는 T c - c e ll 이 크게 증 가함을 알 수 있다.

이와같은 사실로부터 장길 추출물의 항암활성은 세포 득성에 의한 암세포의 살멸효과에 기인 하는 것이 아니 라 암전이를 억제하거나 면역세포의 비율이 증가함 따 라 나타나는것으로 사료된다. 앞으로 많은 생물실험을 통하여 장길의 약러활성을 검토한다면 향후 항암제로의 개발 가능성이 있다고 사료된다.

감사의 말씀

본 연구수행에 다년생도라지를 공급하여 주신 영농법 인 성호장생도라지에 감사의 말씀을 드럽니다.

문 헌

1) 허 준, 동의보감, 서울 남산당, P 4 8 6 , P 3 9 2 (1 9 8 1 ).

2) 한대석, 생약학, 동명사, P 1 9 7 (1 9 9 2 ).

3 ) H o n g , M . W .

S t a t i s t i c a l a n a ly s e s o f Platycodi ra- d ix prescriptions. Kor. J. Pharmacog., 5, 61 (1 9 7 4 ).

4 ) A k i y a m a , T ., T a n a k a , O. a n d S h i b a t a . S .

C h e m ­ ic a l s t u d ie s o f o r ie n t a l p l a n t d r u g s . Chem. Pharm.

Bull., 20. 1952 (1 9 7 2 ).

5 ) T a d a , T ., K a n e i w a , Y . . S h o ji, J. a n d S h i b a t , S .

S a p o n i n s o f t h e r o o t o f P . 'grandiflorum. Is o l a t io n a n d t h e s t r u c t u r e o f p la t y c o d in D . Chem. Pharm.

B u ll., 23, 29 6 5 (1 9 7 5 ).

6 ) I s h i i , H . , T o r i, K ., T o z y o , T . a n d Y o s h i m u r a . Y .

S a p o n i n s f r o m r o o ts o f Platycodon grandiflorum . J.

Chem. S o c.. P e r k i n t r a n s I. 661 (1 9 8 4 ).

7 ) I g a r a s h i . K . '■ Sogoigaku , 3, 1 (1 9 5 1 ).

8 ) L e e . E. B. ： P h a r m a c o lo g ic a l a c t iv it ie s o f c r u d e p a lt y c o d o n .

164 (1 9 7 5 ).

9 ) H i t o k o t o , H . , M o r o z u m i . S ., W a k e . T ., S a k a i , S . a n d U e n o , I. ：

16 (1 9 7 9 ).

10)

N a g a o , T ., M a t s u d a . H . , N a m b o . K . a n d K u b o , M .

I m m u n e p h a n n a c o l o g i c a l s t u d ie s o n p l a ­ t y c o d i r a d i x I

E f f e c t o n t h e p h a g o c y t o s is i n t h e m o u s e , Shoyakugaku Z a ssh i, 40, 3 6 7 (1 9 8 6 ).

11) N a g a , T ., M a t s u d a , H . , M a k a t a , K . N a m b a

a n d K u b o , M .

I m m u n e p h a r m a c o l o g i c a l s t u ­

d ie s o n p la t y c o d i r a d i x I

A n t i t u m o r a c t i v it y o f

i n u l i n f r o m P la t y c o d i r a d ix , Shoyakugaku Zasshi,

40, 3 7 5 (1 9 8 6 ).

다년생도라지의 항암 및 면역활성 387

12 ) K u b o , M .

A n t i t u m o r i n u l i n - l i k e s u b s t a n c e s f r o m Platycodon grandiflorum roots , J P 6 0 - 8 9 4 2 7 (1 9 8 5 ).

13) j p

. m m .

:

-;

J P

3-264534 (1 9 9 1 ).

14 ) 이성호. ** 다년생도라지재배범", 대한민국 톡허 제

0 4 5 7 3 1 호.

15) S u n g , N . K ., L e e , S . J . , S h i n . J . H . . K e e , I. S ..

a n d C h u n g , Y . C .

E f f e c t o f P la t y c o d o n g r a n ­ d i f l o r u m e x t r a c t s o n b l o o d g l u c o s e a n d l i p i d c o m p o s it io n i n A l l o x a n i n d u c e d h y p e r g ly c e r m ic r a t s . /. Korean Soc. Food Sci. Nutr,, 25. 9 8 6 (1 9 9 6 ).

16) K i m , K . S .. E z a k i , O . , I k e m o t o . S . a n d I t a k u r a , H .

E f f e c t s o f Platycodon grandiflorum f e e d i n g o n s e r u m a n d l iv e r l i p i d c o n c e n t a t i o n s i n r a t s w i t h d i e M n d u c e d h y p e r l i p i d e m i a , ]. Nur. Sci. Vi- taminol. 41, 4 8 5 (1 9 9 5 ).

17) R u b i n s t e i n . L . V ., P a u l i , K . D . , S h o e m a k e r . R . H . , S i m o n . R . M . , S k e h a n , P . a n d B o y d , M . R .

C o r r e l a t io n o f s c r e e n i n g d a t a g e n e r a t e d w i t h a t e t r a z o l i u m a s s a y ( M T T ) v e r s u s a p r o t e i n a s ­ s a y ( S R B ) a g a i n s t a b i o a d p a n e l o f h u m a n t u ­ m o r c e ll l i n e s , Proceeding of the American As­

sociation for Cancer Research . 30, 2 4 1 8 (1 9 8 9 ).

18 ) S k e h a n . P .. S t o r e n g , R . . S c u d i e r o , D . , M o n k , A . . M c M a h o n , J . D . , V i s t a . J . . W a r r e n , T ., K e n n e y , S . a n d B o y d , M . R . ■ N e w c o l o r i m e t r i c c y ­ t o t o x i c it y a s s a y fo r a n t i c a n c e i ^ d m g s c r e e n in g , J.

Natl Cancer Inst., 8 2 (1 3 ), 11 07 (1 9 9 0 ).

19) S k e h a n , P ., S to r e n g , R . , S c u d e r io , N . , B o y d . M .

E v a l u a t i o n o f c o lo r im e t r ic p r o t e i n a n d b i o m a s s

s t r a i n s fo r a s s a y in g i n v it r o d r u g e ffe c ts u p o n h u ­

m a n t u m o r c e ll lin e s , Proceedings of the American

Assodiation for Cancer Research . 30, 2 4 3 6 (1 9 8 9 ).