The Clinicopathologic Significance of a p63 Expression in Invasive Breast Cancer

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서 론

우리나라에서 유방암의 발생률은 서구에 비해 낮은 편이 나 생활양식의 서구화, 비만층의 증가, 출산율 감소 및 모유 수유저하 등으로 점차 증가하고 있다. 2001년도 보건복지 부 통계에 따르면 유방암은 우리나라 여성암 중 16.1%를 차지하여 가장 빈발하는 여성암으로 자리잡았다.(1) 따라서 유방암에 대한 관심이 고조되고 분자생물학적 연구가 활발 히 진행되어 유방암 조직에서 발현되는 여러 가지 단백질 이 규명되었다. 유방암에서 임상적으로 유용한 예후인자로 호르몬 수용체(Estrogen Receptor ER, Progesterone Receptor PR) 발현 유무, HER2/neu, p53 등이 알려져 있지만,(2-4) 같 은 예후인자를 보이는 환자 간에도 생존율의 차이를 보이 는 경우가 있어 임상적으로 보다 유용한 예후인자를 찾으 려는 노력이 계속되고 있으며, 최근 p63에 대한 연구 결과 가 보고되고 있다. p53은 1979년 DeLeo 등(5)에 의해 처음 발견된 이후 암억제 유전자로 밝혀졌으며, p53의 동족체로 p63과 p73이 최근 보고되었다. p63은 3번 염색체의 장완에 위치하며(3q27∼29) p53의 전사능력을 조절한다는 보고 와,(6) 기저세포에 염색되는 양상으로 침윤암과 비침윤암의 감별인자로서의 의의가 있다는 보고도 있다.(7,8) 2004년 Nielsen 등(9)이 유방암의 유형을 내강형, 기저형 등으로 구 분한 후 기저형에서 내강형보다 불량한 생존율을 보인다고 보고하였으며, 2006년 국내에서 이 등(10)이 같은 결과를 보 고하였으며, p63의 발현이 기저형에서 발현율이 높지 않다

침윤성 유방암에서 p63 단백질 발현의 임상 병리학적 의의

고려대학교 의과대학 외과학교실, ¹병리학교실

이성렬․조재승․홍광대․류우상․이재복․손길수․배정원․김애리¹․구범환

The Clinicopathologic Significance of a p63 Expression in Invasive Breast Cancer

Sung-Ryul Lee, M.D., Jae-Seung Cho, M.D., Kwang-Dae Hong, M.D., Woo-Sang Ryu, M.D., Jea-Bok Lee, M.D., Gil-Soo Son, M.D., Jung-Won Bae, M.D., Ae-Ree Kim,

M.D.¹

and Bum-Hwan Koo, M.D.

Purpose: p63 is a recently described as p53 homologue.

Despite their structural homologies, they have different activities. p63 is a specific myoepithelial cell marker in normal breast tissue and it is expressed in a minority of breast cancers. The aim of this study was to evaluate the prognostic significance of the p63 expression in breast cancer.

Methods: The expression of p63 in breast cancer was

determined by performing immunohistochemistry on 350 patients who underwent mastectomy at the Department of Surgery at Korea University Medical Center between January 1992 and September 2004. A retrospective analysis was conducted using the medical records. A tissue microarray was constructed, and immunohistochemical analysis for p63 was performed according to the usual methods.

Results: Among 350 patients, 40 (11.4%) showed a p63

expression. There was a significant correlation between p63 and the histologic grade. There were significant correlations of p63 with p53 and HER2/neu, respectively. In the basal type of breast cancer, the p63 expression was significantly higher than in the luminal type of breast cancer. The 5 year disease free survival rates were 69% in the patients with a p63 expression and 76% in the patients without a p63 expression, but there was no statistical difference.

Conclusion: The present results indicate that a p63

expression is associated with a high grade tumor, a p53 ex- pression and a HER2/neu expression in breast cancer, which are the known poor prognostic factors of breast cancer.

책임저자：구범환, 서울시 구로구 구로동 80번지

ꂕ 152-703, 고려대학교 의과대학 구로병원 외과 Tel: 02-818-6672, Fax: 02-859-5941

E-mail: [email protected]

접수일：2006년 7월 9일, 게재승인일：2006년 8월 21일

Immunohistochemical subtyping shows that the p63 expression is a useful predictor for the basal type of breast cancer. In addition, this study suggests that the p63 expression in the basal type of breast cancer is associated with a poor prognosis. (J Korean Surg Soc 2006;71:243-249)

Key Words: Breast cancer, p63, p53, HER2, Basal type

중심단어: 유방암, p63, p53, HER2, 기저형

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통한 p63발현을 확인하고 유방암의 다른 예후인자와의 상 관관계와, 기저형 유방암에서 p63발현의 의의와 무병 생존 율에 미치는 영향을 확인하고자 하였다.

방 법

1) 연구 대상

1992년 1월부터 2004년 9월까지 고려대학교 의과대학 외 과학교실에서 침윤성 유관암으로 수술 받은 환자 중 수술 후 추적조사가 가능했고, 조직미세배열(tissue microarray, TMA) 제작이 가능한 350명을 대상으로 하였다. 기존의 병 리조직 검사의 염색 slide를 찾아 HER2/neu, ER, PR, p53, 조직학적 분화도는 재검하였다. 종양의 크기, 림프절 전이, 종양 병기 등과의 관계를 후향적으로 조사하였고, 병력 기 록을 검토하여 연령, 폐경 유무, 재발 및 병사 유무를 확인 하였다.

2) 연구 방법

(1) Tissue microarray의 제작: Recipient paraffin block을 제작하여 피부 생검 바늘로 2 mm 직경의 구멍을 만들고, 유방암의 통상 H&E 슬라이드를 검토한 후 donor block에 해당하는 부위에서 동일한 피부 생검 바늘을 이용하여 조 직을 채취하여 이미 만들어 놓은 구멍에 조직을 심었다.

Recipient와 donor block을 합친 상태를 파라핀 절편으로 틀 을 만들고 4μm로 잘라 2 mm 조직을 adhesive coated slide system (Instrument Inc., New Jersey, USA)을 이용하여 슬라 이드에 붙였다. 같은 방법으로 유방암 350예를 차례대로 포 매하여 블록을 제작하였다.

(2) 면역조직화학염색: 항p63 항체는 Colone 4A4 (DAKO, Denmark; 1：100)를, 항CK 5/6 항체는 Cytokeratin (5/6/18) (NCL-LP34, Novocastra Lab, UK; 1：100)를, 항HER1 (EGFR) 항체는 Pharm Dx kit (DAKO, Denmark)를 사용하였 고, 항C-kit 항체는 Polyclonal Rabbit 항체(#sc-168, Santa

Cruz Biotech, USA; 1：50)를 사용하였다(Table 1).

면역조직화학적염색 과정을 간단히 설명하면, TMA를 4 μm 두께로 박절한 절편을 유리 슬라이드에 부착시키고, 함 수과정은 xylene에 5분간 3회 세척하여 파라핀 제거와 함수 과정을 거쳤다. 증류수로 5분간 2회 세척하고, Phosphate Buffered Saline (PBS, 0.58 M Na2HPO4, 0.17 M NaH2PO4, 0.68 M NaCl)에 5분간 세척하였다. 항체의 노출을 위해 10 mM sodium citrate buffer에 압력밥솥을 이용해서 1분간 끓 이고 9분간 방치한 후 증류수에 5분간 3회 세척하고, 1%

Hydrogen Peroxide에 10분간 담갔다. 다시 5분간 3회 증류수 로 세척하고 PBS에 5분간 세척하였다. 상온에서 100∼ 400 ul의 blocking solution (5% hoarse or goat serum in PBS)으로 각 section을 담근 후에 용액을 제거하고, 각 절편에 100∼

400 ul의 일차항체를 가한 후, 4^oC에서 overnight incubation 시켰다. 일차항체를 제거하고, PBS로 5분간 세 번 세척하였 고, 이차 항체를 투여 후 상온에서 30분간 incubation하였다.

ABC reagent (Vectastatin ABC kit, Vector Laboratories, Inc., Burlingame, CA)로 상온에서 30분간 incubation하였고 이차 항체를 제거한 후, PBS에 5분간 3번 세척하였다. 각 절편에 100∼400 ul ABC 용액을 넣고, 상온에서 30분간 incubation 시킨 후 ABC 용액을 제거하고 PBS로 5분간 세 번 세척한 다음, 100∼400 ul DAB (diaminobenzidine tetrahydrochloride) 용액을 각 절편에 가해서 발색반응을 기다렸다. 발색이 되 면, 증류수에 immerse하고, 대조 염색을 위해 10초간 hematoxyl염색을 하고, 증류수에 5분간 2회 세척한다. 탈수 화를 거친 후, 슬라이드를 만들었다.

(3) 면역조직화학염색의 판정: 판독은 Her2/neu를 제외한 다른 수용체 및 표지자들은 Allred 등(12)이 제시한 바대로 Proportion Score (0∼5)와 Intensity Score (0∼3)를 합산하여 Total Score 3 이상을 양성으로 판독하였고, Her2/neu는 negative는 0, weak positive는 1, positive는 2, strong positive 는 3으로 판독하였고, 3점을 과발현 양성으로 하였다. p53 발현은 5% 이상 염색된 경우 양성으로 판정하였으며, p63 발현의 판정은 염색 후 환자의 정보 없이 핵염색이 된 것을

Table 1. Antibodies used in the IHC stain

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Clone Pre-treatment Manufacturer

titer time*

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polyclonal IgG

p63 4A4 1：100 RT 30’ Citrate buffer (PH 6.0) pressure cooker method DAKO, Denmark p53 DO-7 1：50 RT 30’ Citrate buffer (PH 6.0) pressure cooker method Novocastra, UK ꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏ

*RT 30’ = room temperature 30 minutes; ^†ER = estrogen receptor; ^‡PR = progesterone receptor.

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양성으로 판정하였다(Fig. 1).

(4) 통계 검증: 통계는 SPSS 12.0 English Version을 이용하였 으며, 유방암 조직의 p63 면역조직화학적염색 결과와 예후인 자와의 비교는 Pearson’s correlation, chi-square, Fisher’s exact test 및 Student t-test를 시행하였고, 생존율 분석은 Kaplan- Meier 생존분석을 시행하여 Log-Rank 검사로 검증하였다.

P＜0.05인 경우를 통계적으로 유의한 것으로 판정하였다.

결 과

1) 연구 대상 환자의 임상, 병리학적 특성

전체 대상 환자 350 명의 수술 당시의 평균 나이는 46.7세 (23∼82)였고, 종양의 크기는 평균 3.6 cm (0.2∼10 cm)로, T1 (2 cm 이내)이 105명(30.0%), T2 (2∼5 cm 이내)가 222명 (63.4%), T3 (5 cm 이상)는 23명(6.6%)이었다. 2004년 Nielsen 등(9)의 분류에 의한 내강형은 133명(38.0%), 기저형은 66명 (18.9%), HER2형은 59명(18.9%), 음성형은 92명(26.2%)이었다 (Table 2). 액와 림프절 전이는 음성이 173명(49.4%), 양성이

177명(50.6%)이었고, 병리학적 병기상 Stage I이 26.9%, II가 52.0%, III는 21.1%였다. Bloom and Richardson Grade I은 94 명(20.9%), Grade II가 182명(53.7%), Grade III는 74명(25.4%) 이었다. ER 음성은 203명(58.0%), 양성은 147명(42.0%)이었 고, PR 음성은 237명(67.7%), 양성은 113명(32.3%)이었다.

p53발현 음성은 190명(54.6%), 양성은 158명(45.4%)이었고, Her2/neu 발현 음성은 291명(83.1%), 양성은 59명(16.9%)이 었다(Table 3). p63 양성군에서 Grade I은 7.5%, Grade II가 45.0%, Grade III는 47.5%였고, 음성군에서 Grade I은 22.6%, Grade II가 54.8%, Grade III는 22.6%로 양성군이 음성군에 비 해 통계적으로 유의하게 분화도가 높았다(P=0.001, Table 4).

2) 면역조직화학적 검사 결과

p63은 대조세포로 생각한 정상 근상피세포의 핵에서 일 관성있게 발현이 되었고, 종양세포에서도 핵에 발현이 되 었는데 전체 350명의 환자 중 40명(11.4%)에서 발현되었다.

p63의 발현율은 내강형 133명 중 10명(7.5%)이었고 기저형 은 66명 중 11명(16.7%)으로 통계적으로 유의하게 기저형 Table 2. Frequency of immunohistochemical (IHC) subtype of breast cancer

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Subtype* ER^† HER2 CK5/6, HER1, C-kit Frequency (%)

Luminal Positive Negative Negative or positive 133 (38.0)

HER2 Positive or negative Positive Negative or positive 59 (17.9)

Basal Negative Negative Positive (one or one more) 66 (18.9)

Negative Negative Negative Negative 92 (26.2)

*Nielsen TO. Immunohistochemical and characterization of the basal-like subtype of invasive breast carcinoma. Clin Cancer Res.

2004;10:5367-74. ^†ER = estrogen receptor.

Fig. 1. (A) Expression of p63 in normal ductal myoepithelial cell nucleus of IDC using p63 (4A4, DACO, denmark, 1：100). The nucleus of tumor cells was not stained (×400). (B) Expression of p63 in invasive ductal carcinoma cells nucleus using p63 (4A4, DACO, denmark, 1：100). The nucleus of tumor cell was stained (×400).

(4)

에서의 발현율이 높았다(P=0.006, Table 3). p63 발현 양성 군에서 p53 발현 양성은 27명(67.5%), p53 발현 음성은 13명 (32.5%)이었고, p63 발현 음성인 군에서 p53의 발현 양성은 131명(42.5%), p53발현 음성은 177명(57.5%)으로 통계적으 로 유의하게 차이가 있었으며(P=0.003, Table 4), p53발현을 양성과 음성으로 구분하지 않고 student t-test를 이용하여 발 현된 비율을 비교하여서도 p63발현 양성군에서 p53의 발현 율은 47%, 음성군에서 p53의 발현율은 23%로 유의한 차이 가 있었다. 또한 p63발현 양성군에서 HER2/neu 발현 양성 은 13명(32.5%), HER2/neu 발현 음성은 27명(67.5%)이었고, p63발현 음성인 군에서 HER2/neu 발현 양성은 46명(14.8%), HER2/neu 발현 음성은 264명(85.2%)으로 통계적으로 유의 하게 차이가 있었다(P=0.005, Table 4).

3) 무병 생존율 비교 분석

5년 무병 생존율은 p63발현 음성군에서 76%, 양성군에서

69%로 통계적으로 유의한 차이는 없었다(Fig. 2). 내강형과 기저형 간의 무병 생존율도 p63발현이 통계적으로 유의한 차이는 없었으나, 내강형에서 p63발현 양성군의 5년 무병 생존율은 87%로 음성군의 79%보다 높게 나타났으며, 기저 형에서는 p63발현 양성군에서 5년 무병 생존율은 63%로 음 성군의 73%보다 낮게 나타났다(Fig. 3).

고 찰

유방암에서 지금까지 잘 알려진 예후 예측인자들이 임상 에서 널리 이용되고 있으나 같은 예후인자를 보이는 환자 들 사이에서도 생존율의 차이를 보이고 있다. 따라서 유방 암 조직에서 발현되는 여러 유전자의 분석을 통해 유방암 의 분류를 다시 세분화하고 있고 이를 임상적으로 치료에 적용하려는 연구가 지속되고 있다.(15,18) 정상 유선관은 근 육상피세포로 이루어진 비연속층이 기저막과 연속된 내강 Table 3. Relationship between IHC subtype and clinicopathologic characteristics of breast cancer

ꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚ

Parameters Luminal HER2 Basal Negative P-value

Age, year 0.964

20∼50 95 (71.4) 40 (67.8) 46 (69.7) 64 (69.6)

51∼90 38 (28.6) 19 (32.2) 20 (30.3) 28 (30.4)

Tumor size 0.067

＜2 cm 46 (34.6) 12 (20.3) 17 (25.8) 30 (32.6)

2∼5 cm 79 (59.4) 44 (74.6) 40 (60.6) 59 (64.1)

＞5 cm 8 (6.0) 3 (5.1) 9 (13.6) 3 (3.3)

Axillar LN metastasis 0.854

Negative 65 (48.9) 27 (45.8) 36 (54.5) 45 (48.9)

Positive 68 (51.1) 32 (54.2) 30 (45.5) 47 (51.1)

Stage 0.134

I 38 (28.6) 9 (15.3) 19 (28.8) 28 (30.4)

II 63 (47.4) 42 (71.2) 33 (50.0) 44 (47.8)

III 32 (24.1) 8 (13.6) 14 (21.2) 20 (21.8)

Grade 0.000

I 46 (34.6) 9 (15.3) 3 (4.5) 15 (16.3)

II 73 (54.9) 32 (54.2) 26 (39.4) 57 (62.0)

III 14 (10.5) 18 (30.5) 37 (56.1) 20 (21.7)

P53 0.275

Negative 80 (60.2) 28 (47.5) 31 (48.4) 51 (55.4)

Positive 53 (39.8) 31 (52.5) 33 (51.6) 41 (44.6)

P63 0.006

Negative 123 (92.5) 46 (78.0) 55 (83.3) 86 (93.5)

Positive 10 (7.5) 13 (22.0) 11 (16.7) 6 (6.5)

PR* 0.000

Negative 60 (45.1) 46 (78.0) 64 (97.0) 80 (73.4)

Positive 73 (54.9) 13 (22.0) 2 (3.0) 29 (26.6)

*PR = progesterone receptor.

(5)

상피세포 사이에 존재한다. 근육상피세포의 소실은 침윤암 의 특징적인 소견으로 이는 면역조직화학적검사를 통해 구 별이 가능하다. 2000년 Perou(15)와 Sorlie 등(16)이 유방암 을 기저형과 내강형으로 분류한 이후, 기저형의 유방암이 불량한 예후를 보인다는 보고가 있다.(17,18) 유방암에서 잘 알려진 예후인자로는 종양의 크기, 림프절 전이, 병기, 호르 몬 수용체(ER, PR), HER2/neu, 조직분화도, p53 등이 인정되 고 있으며, 표피성장인자수용체 및 Bcl-2유전자 군 등 다른 유전자에 대해서도 예후 인자로서의 가치가 보고되기도 하 였다. 1979년에 p53이 처음 보고된 이후 최근에 동족체로 p63과 p73이 보고되었다. p63 유전자(gene)는 유전자지도상 3q27∼29에 위치하며 N-말단 전사활성영역을 가진 3가지

와 전사활성영역이 없는 3가지 등 최소한 6개의 동족체를 가진다.(24) 그러나 현재까지 p63의 역할에 대해서는 연구 자들 사이에 이론이 많은데, p63은 전립선, 자궁경부, 피부 등의 기저세포에서 발현되며 유방암에서의 역할은 상피세 포의 분화와 증식에 관여하며, 유관의 근상피세포에서 발 현되는 단백질로 알려져 있다.(13,14) p63은 3번 염색체의 장완에 위치하며(3q27∼29) p53의 전사능력을 조절한 다.(20) Alfredo 등(20)은 침윤성 유방암환자 85명의 연구에 서 p63은 11.76%가 발현되었고 대부분의 경우가 분화도가 좋지 않은 환자라고 보고하였다. 본 연구에서도 조직학적 분화도가 높은 군에서 p63의 발현이 통계적으로 유의하게 높게 나와 유사한 결과를 보였다. 이와 같은 결과는 p63이 분화도가 좋지 않은 유방암의 표지자 역할을 할 수 있음을 시사한다고 할 수 있다. p63은 p53과 동시 발현되는 경우가 매우 낮아서, p53을 억제함으로써 간접적인 발암 유전자 역 할을 함을 시사하였다.(18) 본 연구에서는 p63의 발현이 p53 과 양의 상관관계를 보여 또 다른 역할이 있음을 예상할 수 있지만, 두 가지 단백질 간의 정확한 상호 작용에 대해서 는 좀 더 많은 연구가 필요하다. p63이 정상 유방 조직의 기저세포에서 염색이 되므로 기저세포에 염색되는 양상으 로 침윤암과 비침윤암의 감별인자로서의 가치가 있다는 보 고도 있고,(21,22) Irina 등(19)은 168명의 침윤성 유방암환자 를 대상으로 한 연구에서 p63의 발현이 내강형에서보다 기 저형에 유의하게 높은 결과를 보여 기저형의 진단에 유용 하다는 보고를 하였다. Meryem 등(24)에 의하면 화생형 유 방암(metaplastic carcinoma)진단에서 민감도와 특이도가 매 우 높다고 보고하였다. Irina 등(19)의 연구에서는 p63의 발 현율이 20.1%였고 이전의 연구에서는 9%정도로 보고되고 있으나,(25) 본 연구에서 p63의 발현율은 350명의 환자 중 45명으로 11.4%였다. p63의 발현은 환자의 연령, 원발 종양 Table 4. Relationship between p63 expression and clinicopatho-

logic characteristics

ꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚꠚ Characteristic p63 Negative p63 Positive P-value ꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏ Total number 310 (88.6) 40 (11.4)

Age, year 1.000

20∼50 217 (70.0) 28 (70.0)

51∼80 93 (30.0) 12 (30.0)

Pathologic staging 0.258

I 86 (27.7) 8 (20.0)

II 163 (52.6) 19 (47.5)

III 61 (19.7) 13 (32.5)

Tumor size, cm 0.911

＜2 93 (30.0) 12 (30.0)

2∼5 196 (63.2) 26 (65.0)

＞5 21 (6.8) 2 (5.0)

Axillary LNs 0.266

Negative 158 (50.9) 15 (37.5) Positive 152 (49.1) 25 (62.5)

Histologic grade 0.001

I 70 (22.6) 3 (7.5)

II 170 (54.8) 18 (45.0)

III 70 (22.6) 19 (47.5)

ER* 0.341

PR^† 0.975

P53 0.003

Her2/neu 0.005

ꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏ

*ER = estrogen receptor; ^†PR = progesterone receptor.

Fig. 2. Disease free survival between p63 positive group and p63 negative group, Kaplan-Meier Survival Curve, Log Rank Test (P=0.429). The 5 year survival rates of each group were not significant statistically.

(6)

의 크기, 액와림프절 전이 등의 임상 병리학적 인자들과의 연관성은 없었으나, 조직분화도, p53, Her2/neu 와는 상관관 계가 있게 나타났다. Livasy 등(23)에 의하면 기저형에서 내 강형과 비교하여 p63 발현율에 차이가 없다고 하였지만 본 연구에서는 기저형에서 16.7%로 7.5%의 내강형보다 p63의 발현율이 유의하게 높았다. 통계적으로 유의하지는 않았지 만 기저형에서 p63 양성군에서 음성군에 비해 5년 무병 생 존율이 낮게 나타났으며 내강형에서는 기저형과는 반대로 p63 양성군에서 음성군에 비해서 5년 무병 생존율이 높게 나타났다. 본 연구의 결과로 볼 때 침윤성 유방암에서 p63 의 발현은 조직분화도, p53, Her2/neu 등의 예후인자와의 상 관관계가 있었으며, 기저형 유방암에서 불량한 예후를 예 측할 수 있었고, 기저형 유방암의 진단에 유용한 지표가 될 수 있을 것으로 생각된다. 기저형 유방암의 지표로 여러 연 구마다 차이가 있지만, 본 연구에서는 Her1, CK 5/6, C-kit을 대상으로 하였고 앞으로는 p63도 추가된 연구가 필요하다 고 생각된다. p53 발현과의 상관 관계에서 동시 발현되는 경우가 낮다는 Alfredo 등(20)의 보고와는 다르게 본 연구에 서는 상관 관계를 보였는데 이는 p63의 역할에 대한 더 많 은 연구가 필요하며, 예후인자로서의 유용성 및 그 기전에 대해서는 장기간 추적한 환자의 수가 더 많은 다른 연구들 이 필요하다고 생각된다.

결 론

본 연구에서 p63의 발현율은 350명의 환자 중 40명으로 11.4%를 보였다. p63단백의 발현은 환자의 연령, 원발 종양 의 크기, 액와림프절 전이 등의 임상 병리학적 인자들과의 연관성은 없었다. 조직분화도가 높을 때 p63의 발현율이 높 았고, p53의 발현이 높을 때 p63의 발현율이 높았으며, Her2/

neu 양성에서 p63의 발현율이 높게 나타났다. 내강형 유방 암에서 기저형보다 p63의 발현율이 높았다. p63 발현 유무 에 다른 5년 무병 생존율은 통계적으로 유의한 차이는 없었 다. 내강형과 기저형 간의 5년 무병 생존율도 p63발현에 따 른 통계적으로 유의한 차이는 없었으나, 내강형에서는 p63 양성인 군에서 5년 무병 생존율은 87%로 음성인 군의 79%

보다 높게 나타났으며, 기저형에서는 p63양성인 군에서 5 년 무병 생존율은 63%로 음성인 군의 73%보다 낮은 결과 를 보여 생존율에 미치는 영향은 보다 많은 예에서 장기간 의 추적조사가 필요할 것으로 생각된다.

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Fig. 3. (A) Disease free survival between p63 positive group and p63 negative group in luminal subtype, Kaplan-Meier Survival Curve, Log Rank Test (P=0.480). The 5 year survival rates of each group were not significant statistically. (B) Disease free survival between p63 positive group and p63 negative group in basal subtype, Kaplan-Meier Survival Curve, Log Rank Test (P=0.165).

The 5 year survival rates of each group were not significant statistically.

(7)

ꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏ 6) Jean-Christophe B, Kenneth F, Fiona MZ, Gend L. p53

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